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自然科学基金申请书技术路线汇总.doc

1、生物学特性检测形态学观察、倍增时间、细胞活率检测免疫组化、FACS特异标志物、RT-PCR检测染色体核型分析、AP检测mES标准体系培养mES非分化增殖mES niche模拟培养mES分化为EBs流式细胞术、RT-PCR检测EBs形态学观察LN, FN, E-cadherin表达差异检测RT-PCR检测免疫组化检测FACS检测甲基化修饰检测MSP检测Nanog等CpG岛甲基化状态免疫组化检测H3R2等的表达ChIP检测H3修饰的位置甲基化抑制/启动剂作用EBs后的基因表达分析生物学特性检测形态学观察、倍增时间、细胞活率检测免疫组化、FACS特异标志物、RT-PCR检测染色体核型分析、AP检测m

2、ES标准体系培养mES非分化增殖mES niche模拟培养mES分化为EBs流式细胞术、RT-PCR检测EBs形态学观察LN, FN, E-cadherin表达差异检测RT-PCR检测免疫组化检测FACS检测甲基化修饰检测MSP检测Nanog等CpG岛甲基化状态免疫组化检测H3R2等的表达ChIP检测H3修饰的位置甲基化抑制/启动剂作用EBs后的基因表达分析 技术路线: 临床资料淋巴瘤患者 病理活检 常规病理组织学诊断与分型制成单个核 RT-PCR诊断:t(14;18),细胞悬液 t(11;18),t(11;14),t(8;14),t(9;14),t(2;5)等染色体易位后形成的融合基因相关探

3、针直接间期FISH:CCND1,BCL2,BCL6,PAX5,ALK,NPM,MYC,IgH技术路线铝接触剂量/尿铝含量调查尿铝含量与年龄和细胞丢失的关系遗传基因多态性检测60岁以上铝接触人群及对照尿铝含量与Caspase-3, LC3-II蛋白表达的关系外周血淋巴细胞M受体表达铝致神经细胞丢失和/或遗传因素与MCI、AD的关系认知功能检查,MCI诊断,AD诊断,脑部核磁及磁共振波谱分析 Nec-1和/或不同死亡通路阻断剂处理铝致神经细胞死亡的方式检测神经行为改变Caspase-3,LC3-II基因/蛋白表达铝染毒SD大鼠APP、Tau蛋白水平氧化应激水平铝染毒大鼠神经细胞Nec-1阻断神经细胞坏死性凋亡通路与铝致痴呆的关系神经细胞凋亡/坏死/坏死性凋亡/自吞噬研究骨形成到骨吸收质的变化过程中,OB、OC基因调控机理。骨界面OB、OC基因表达谱的时序变化提取骨界面取材的OB和OC体内种植体骨界面区域的骨组织骨界面OB、OC基因表达谱的时序变化1、 RT-PCR法检测OB、OC表达差异最大的几个基因;2、 结合基因数据库,明确“标记”基因及功能。体外OB、OC基因表达谱的时序变化体外OB、OC基因表达谱的时序变化提取骨界面取材的OB和OC体内种植体骨界面区域的骨组织体外培养的成骨(OB)细胞和破骨细胞(OC)体外培养的成骨细胞(OB)和破骨细胞(OC)

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