乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂盒.docx

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1、乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂盒(酶联免疫法)【检验原理】 本试剂采用双抗原夹心酶联免疫吸附实验原理。在微孔条上预包被乙肝表面抗原(HBsAg),加入待测样品及酶标抗原(HBsAg-HRP)试剂进行温育。样品中的HBsAb与包被抗原和酶标抗原形成“包被抗原-抗体-酶标抗原”复合物。洗板后加入显色剂(TMB),复合物上连接的HRP催化显色剂反应,生成蓝色产物,终止反应后为黄色。若样品中午乙型肝炎表面抗体时,不显色。【检验方法】1. 配液:将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20稀释。2. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照3孔,阳性对照2孔和空白对照1孔(用双波长检测,可不设空白对照孔)。3

2、. 加样:分别在相应孔中加入待测样品及阴、阳性对照各50ul。4. 加霉:每孔加入酶标试剂50ul,空白孔除外,轻轻震荡混匀。5. 温育:用封板膜封板后,置于37温育30分钟。6. 洗涤:小心揭掉封板莫,用洗板机洗涤5遍,最后一次尽量扣干。7. 显色:每孔加入显色剂A、B液各50ul,轻轻震荡混匀,37避光显色15分钟。8. 测定:每孔加终止液50ul,轻轻震荡混匀,10分钟内测定结果。没定酶标仪波长于450nm处(建议用双波长450nm/600-650nm检测),用空白孔调零后测定各孔A值。【注意事项】1. 本品禁用于体外检测,操作应按说明书严格进行。封板莫不能重复使用,不同批号的酶标板,酶

3、标试剂和阴阳性对照不可混用,不能与其他厂家实际混用。2. 避免在有挥发性物及次氯酸类消毒剂(如84消毒液)的环境下操作。3. 使用前请将试剂平衡至室温(平衡30分钟),实验请将试剂轻轻震荡混匀,使用后立即放回2-8。未用完的微孔板条与干燥剂一起用封装袋密封2-8保存。过期试剂请勿使用。4. 加液时必须用加样器加样,并经常校对加样器的准确性。加入不同样品或不同试剂组分时,应更换加样器吸头和加样槽,以及出现交叉污染。5. 洗涤时各孔均需加满洗液,防止孔内有游离酶不能洗净。使用洗板机应设定30-60秒侵泡时间。在洗板结束后,必须立即进行下一步,不可使用酶标板干燥。避免长时间的中断实验步骤,以确保每孔实验条件的均一。6. 结果判定必须以酶标仪读数为准。读取结果时,应擦干酶标板底部,且孔内不能有气泡。不要触碰孔底部的外壁,指引或划痕都可能影响板孔的读值。7. 所用样品(包括阴、阳性对照),废液和废气物都应该按传染物处理。终止液为硫酸,使用时必须注意安全。8. 显色时必须先加显色剂A液后加显色剂B液,以免显色过低。

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