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1、实验四 氯化三苯基四氮唑（TTC）法测定种子生活力一、实验目的种子生活力是指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。可以通过发芽试验方法了解种子有无生活力，为正确评定种子质量提供依据。本实验的目的是让学生掌握化学快速测定种子生活力的原理、方法和鉴定标准。二、仪器与试剂培养皿4套；镊子把；单面刀片片；垫板（切种子用）块；烧杯个；棕色试剂瓶；解剖针把；搪瓷盘个；放大镜。TTC溶液，配制方法：取1g TTC溶于L蒸馏水或冷开水中，配制成0.1的TTC溶液。 三、原理以氯化三苯基四氮唑(简称四唑)无色溶液作为指示剂。这种指示剂是一种可被种子活组织吸收后，接受活细胞脱氢酶中的氢而被还原成一种红色的、稳定的
2、、不扩散的和不溶于水的三苯基甲臜。据此，可根据胚和胚乳组织染色反应来区别有生活力和无生活力的种子。四、方法步骤材料：4份，分别是吸胀的玉米、小麦种子100粒，吸胀后煮5分钟的玉米、小麦种子） 1.将玉米、小麦等作物的种子，用温水（30）浸泡26h，使种子充分吸胀。 2.随机取吸涨种子 100 粒，沿种胚中央准确切开，取每粒种子的一半备用。然后将处理好的种子置于培养皿中，加入 0.1% TTC 溶液，以浸没种子为度。另取沸水中煮 5 min 后的100 粒吸涨种子，再加入 0.1%TTC 溶液染色。于35恒温箱中保温 0.51 h。也可在20左右的室温下放置4060min. 3.保温后，倾出药液
3、，用自来水冲洗23次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表4-1内。五、注意事项 1.判断有生活力的种子应具备：胚发育良好、完整、整个胚染成鲜红色；子叶有小部分坏死，其部位不是胚中轴和子叶连接处；胚根尖虽有小部分坏死，但其它部位完好。 2.判断无生活力的种子应具备：胚全部或大部分不染色；胚根不染色部分不限于根尖；子叶不染色或丧失机能的组织超过1/2；胚染成很淡的紫红色或淡灰红色；子叶与胚中轴的连接处或在胚根上有坏死的部分；胚根受伤以及发育不良的未成熟的种子。 3.不同作物种子生活力的测定，所需试剂浓度、浸泡时间、染色时间不同。六、实验报告内容：目的、原理、填表4-1，实验中的问题及解决办法提醒：上实验课带上文字材料，课本，实验做完就上交该个实验的报告。表4-1 四唑染色法测定种子生活力记载表方法种子名称供试粒数有生活力种子粒数无生活力种子粒数有生活力种子占供式粒数的%