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1、新型一次性去白细胞滤器血袋应用研究中国输血杂志2007年8月第2O卷第4期ChinJ131oodTransfusion,August,2007,Vo1.20,No.4角型青光眼的相关性调查J.中国输血杂志,2005,18(5)413414Eg刘海英,邓安梅,张建,等.原发性胆汁性肝硬化患者人类白细胞抗原等位基因多态性分析J.中华肝脏病杂志,2005,13(200612-25收稿,20070530修回)本文编辑:闻欣新型一次性去白细胞滤器血袋应用研究?实验研究?陈长荣郑秀娟陈苹曾晓新装斌倪宏英(厦门市中心血站.福建厦门361004)摘要:目的评价一次性去白细胞滤器血袋的应用效果.方法采用CBRF
2、QM2O6CDF(IU)和CB-RFQM4O6CDF(2U)一次性去白细胞滤血袋,随机抽取采集7h内的新鲜全血6O袋(各3O袋),观察过滤时间,过滤前后细菌学检测,重量,游离血红蛋白含量以及血液常规指标等的变化另取2种滤器血袋各5个批号各过滤5袋血液,比较不同批号滤器间白细胞过滤效果;采用细胞记数仪检测过滤前后血液常规指标,并用Nageotte计数板检测过滤后残留白细胞数,邻甲苯胺法检测FHb含量.结果2种滤器血袋过滤白细胞前后的血液均无细菌污染.CB-RFQM2O6CDF和CRFQM4O6CDF型滤器血袋血液过滤时间分别为(321.4132.9)S和(663.3210.5)S,血液回收率为(
3、91.68士1.80)和(92.702.儿).白细胞去除率均为(99.9980.001)%,白细胞残留量为(2.4士0.7)lO/袋和(4.6士1.6)lO/袋,红细胞回收率为(92.494.05)和(91.994-3.28).2种滤器血袋过滤白细胞前后血液其它红细胞指标和FHb含量均无明显变化.2种滤器血袋不同批号间的白细胞去除率和红细胞回收率差异均无统计学意义(P>O.05).结论该2种新型一次性去白细胞过滤血袋质量优良.关键词:去白细胞;过滤;滤器中图分类号:R457.1R331.142文献标识码:A文章编号:1004549X(2007)040309-03去除血液中自细胞能减少输血
4、并发症的发生l_l.从血液中去除白细胞有离心法,洗涤法,冰冻法,沉降法,细胞单采法,照射法和过滤法等方法.目前.白细胞过滤器以其去除白细胞效率高,操作简单,价格合理且无不良反应而成为最有效的去除白细胞的方法,并较广泛应用于临床,在预防输血不良反应的产生及输血相关病毒的传染方面取得较为满意的效果L3.我们对本站2006年3一lO月将一次性使用去白细胞滤器血袋应用于血液成分制备的效果进行了总结,报告如下.1材料与方法l_1材料一次性白细胞过滤血袋CRFQM2O6CDF(1U)(简称206型)和CRFQM406CDF型(2U)(长春泰尔茂),WBF-PRC型滤器(美国PALL),BacT/Alert
5、全自动微生物培养系统(美国OrganonTeknika),BacT/Alert需氧,厌氧培养瓶(美国OrganonTeknika),CZKZB型微电脑采液控制器(苏州市医用仪器厂),CELL-DYN1700型细胞记数仪(美国雅堵),Nageotte白细胞计数板(美国Hausser).CX31型显微镜(日本OLYMPUS),Turks白细胞稀释液(本站自制),邻甲苯胺(美国Fluka).通讯作者:倪宏英,电话:05922291223,Email:ZXXZpublic.xm.fj.CnL2方法1.2.1白细胞过滤滤白工作前30min,开机预冷低温冷柜,保持滤白过程处于2一lO的低温环境中.随机抽取
6、本站采集7h内的新鲜全血6O袋,将母袋悬挂于低温冷柜内,关闭排气管止流夹,打开滤盘止流夹,拆断母袋上的阻断装置,让全血利用重力作用经过Pall滤盘收集到接收袋内.1.2.2留样检测用微电脑采集控制器对去白前后的全血进行称量,计算去白后血容量的回收率.过滤前后分别留取血样5ml,将血样插入细胞计数仪吸样针位置,按压吸样针后面的按键,计数仪即自动检测白细胞数,红细胞数,红细胞平均体积(MCV),红细胞的平均血红蛋白含量(MCH),红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC),红细胞压积(Hot),红细胞体积分布宽度(RDW).过滤后血液的wBC用Nageotte计数板检测.过滤前后血浆游离血红蛋白量(FHb
7、)用邻甲苯胺法检测.1.2.3细菌培养过滤前后均以无菌技术分别留取血液510ml厌氧和需氧培养各l瓶,置全自动微生物培养系统,35培养7d观察结果1_2.4血袋批问比较随机抽取2种滤器血袋各5个批号(206型为20050317x,20050407x,20050414x,20050804x,20051209x,2005l2l4x,20060413x,20060429x,20060520x,20060715x)各过滤全血5袋,同l_2.2方法检测白细胞去除率,红细胞回收率,观察不同批号的血袋过滤效果的稳定性?310?中国输血杂志2007年8月第20卷第4期ChinJBloodTransfusion
8、,August,2007,Vo1.20,No.4及差异性.1.3统计分析采用配对t检验评价过滤前后MCV,MCH,MCHC,Hot,RDW及FHb的差别.采用单因素方差分析评价不同批号的滤器在去除白细胞和回收红细胞效果的稳定性2结果2.12种滤器血袋过滤时间,白细胞去除率及残量比较206型和406型滤器血袋过滤时间分别为(321.4132.9)s和(663.321O.5)s,白细胞去除率均为(99.998士0.001)%,白细胞残留量为(2.40.7)10/袋和(4.61.6)1O/袋.2.22种滤器血袋滤除白细胞前后血容量,RBC及其回收率RBC参数的变化见表1,2.2.3细菌检测2种滤器血
9、袋过滤前后的血液均未见细菌污染.表12种滤器血袋滤除白细胞前后血容量,RBC及其回收率CB-RFQM206CDF型(=30)CRFQM406CDF型(n=30)滤前滤后f滤前滤后t注:P均>0.052.42种滤器血袋不同批号间WBC去除率及RBC回收率比较见表3.表32种滤器不同批号滤全血后WBC去除率及RBC回收率比较注:WBC去除率:F:0.350,P>0.05;RBC回收率:F一1.763P>0.053讨论滤除血液成分中的白细胞可有效降低输血不良反应.用白细胞滤器去除白细胞在国外起步较早,并被广泛用于临床,至2001年底,已有24个国家实施或决定实施100过滤.国内输血
10、器材起步较晚,因受工艺,材料,制作技术等多种因素的影响,在质量上存在差异5,与国外同类产品相比较仍存在差距.然而,进口输血器材价格昂贵,本站使用的一次性白细胞过滤血袋是将PallwBF-PRC型白细胞过滤器与血袋连结的第4代白细胞滤器,其滤材是经过表面特殊处理的聚酯材料合成的,有很好的亲水性,因此过滤时免去了用生理盐水冲洗的步骤,同时扁平的结构增加了过滤面积,过滤速度快.血液过滤后,血液容量回收率为CB-RFQM206CDF型(9r.,68土1.8),CB-RFQM4O6CDF型(92.702.1),均达到标准(标准含量1O).由于滤器血袋可直接使用无需接管,减少工作量的同时也减少了污染的机会
11、.我们对过滤前后血液进行细菌培养,结果显示使用的两种规格的滤器血袋均达到无菌标准.本站使用的wBFPRC型去白细胞滤器,CRFQM206CDF型和CB-RFQM406CDF型滤器血袋白细胞去除率,白细胞残留量,红细胞回收率均达标准.过滤前后MCH,MCHC,Hct,MCV,RDW,FHb差异均无统计学意义(P>o.o5),其中滤后FHb远小于标准规定的530mg/L.2006年31O月,本站已使用该型去白细胞滤器血袋过滤血液18699袋,出库前均经仔细的检查外观,无一袋出现溶血现象.表4显示,不同批号的滤器其白细胞去除率和红细胞回收率的差别无统计学意义(P>O.05),说明该产品在
12、去除白细胞和回收红细胞方面有良好的稳定性和可靠性.综上所述,本站所用的新型一次性使用去白细胞滤器血袋具有白细胞去除率高,减少工作量,减少污染等,有利于保中国输血杂志2007年8月第20卷第4期ChinJBloodTransfusion,August,2007,Vo1.20,No.4证临床输血反应的减少.但其不足之处是价格较高.参考文献1Mu11er-steinhardtM,JanetzkoK,KirchnerH,eta1.Effectofwholebloodpreparationandleukocytefiltrationonstorageoferythrocyteconcentratesov
13、er42daysJ.Beitr1nfusionstherTransfusionsmed.1997,34(1):53572ShinarE,ProberG.YahalomV,eta1.WBCfiltrationofwholebloodafterprolongedstorageatambienttemperaturebyuseofaninlinefiltercollectionsystemJ.Transfusion,2002.42(6):7347373WadhwaM,SeghatchianMJ,DilgerP.eta1.CytokinesinWBCreducedeopheresisPCsduring
14、storage:flcomparisonoftwoWBCreductionmethodsJ.Transfusion.2000.40(9):1118一l1Z64MullerSM,SchlenkeP,WagnerT.eta1.Transfusionofplateletconcentratesfrompooledbuffeycoats:comparisonofbesideVSprestorageleukofitrationJ.TransfusionMed,2000.10(1):59655赵莉华,梁晓虎.张爱红,等.国产白细胞滤器过滤血液质量考察比较J.中国输血杂志.2006,19(1):54556梁
15、文华.孙波,王群.等.国产一次性去白细胞采血袋的应用评价J.中国输血杂志.2006.19(3):2262277傅雪梅.陈颜,文远蓉,等.3种滤器制备少白细胞悬浮红细胞的随机对照研究J.中国输血杂志.2006.19(1):4345(20061204收稿,20070530修回)本文编辑:蔡辉尚云血小板残留白细胞不同计数方法的比较方敏王明元(苏卅I市红十字中心血站,江苏苏卅I215006)?实验研究?摘要:目的比较分析用于测定机采血小板中微量白细胞的流式细胞仪测定法(FC)和Nageotte测定法(NC)方法用已知白细胞数目的血小板标本测定两种方法的最低检测值.结果FC和NC的最低检测值分别为0.1
16、和1WBC/1.>1WBC/,1时,FC和NC检测变化较小,而在0.11WBC/1只有FC检测变化较小.结论FC检测是一种更有效,准确,稳定的方法,但还需要进一步改进.关键词:血小板;白细胞残留量;白细胞计数;流式细胞仪中图分类号:R331.14R457.1文献标识码:A近年来研究表明,输注含白细胞的血液可以引起很多并发症.现代输血要求将白细胞去除.以保证用血安全.近年来已有越来越多经各种方法去除白细胞的血液成分应用于临床.血液成分中自细胞的去除既要求有效地清除白细胞.又能保证有效成分的回收.如何准确测定去除白细胞后血液成分中残留白细胞含量是质量评估的关键.当白细胞100WBC/>
17、I时,自动血细胞计数仪计数和牛鲍氏计数板测定误差很大.目前微量白细胞检测采用的方法主要包括FC和NC两种.我们比较分析了FC和NC检测血小板中自细胞残留量,旨在确定两种方法的最低检测值以及比较两种方法的优缺点.1材料与方法1.1标本制备已知白细胞数目的血小板标本制备方法参照文献1.1.2试剂与仪器流式细胞仪(EPICS-XL型.美国Beckman-Coulter);Nageotte计数板(美国HausserScientific公司);CH20生物光学显微镜(日本Olympus公司);血细胞分离机(MCS+.美国血液技术公司);含有PI,RNA酶,穿孔文章编号:1004549X(2007)O40
18、311-02剂的混合液(LeucoC()UNT试剂,BD公司).1.3流式细胞仪计数法取血小板标本7001加入装有已知数目荧光微球的试管中,再加入含有PI,RNA酶,穿孔剂的混合液3001,室温暗处孵育5min,上机检测.在FL1/FL3散点图中设定wBC和荧光微球门,收集10.000个荧光微球,按公式计算出每微升标本中自细胞的数量(cell/1),cell/1=(FCM收集的微球数R2/荧光微球数R1)(管中已知荧光微球数/样本体积).见图1.1.4Nageotte计数板计数法取1份样本(1001)加入9份(90Ora1)白细胞稀释液混合.静置lOmin;吸取混合液滴入Nageotte血细胞计数板中,室温沉降15min;显微镜下(200).计数1个满格子(51)上的白细胞,当样品按1:10倍稀释时,白细胞浓度/l一(WBCs计数稀释倍数)/计数体积(计数1个满格子,计数体积为5Ol;计数2个满格子,计数体积为1001).每份标本测定3次,取其平均值.2结果白细胞数目<0.1WBC/I,FC和NC2种方法结果均远远偏离预测值;FC和NC的最低检测值分别为0.1和