实验六-从淡奶粉中分离、鉴定酪蛋白和乳糖.docx

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1、。实验六从淡奶粉中分离、鉴定酪蛋白和乳糖教学要求 :1 掌握通过等电点分离蛋白质的原理和方法;2 掌握蛋白质鉴定的特征反应;3 掌握还原性糖的鉴定方法。教学重点:掌握通过调节溶液体系的 pH 值利用等电点分离蛋白质。教学难点:蛋白质和还原性糖鉴定反应的操作及其现象观察教学时数: 4 学时一、实验目的、掌握分离蛋白质和糖的原理和操作方法;、掌握蛋白质的定性鉴定方法;、了解乳糖的一些性质。二、实验原理牛奶的主要成分是水、蛋白质、脂肪、糖和矿物质,其中,蛋白质主要是酪蛋白,而糖主要是乳糖。蛋白质在等电点时溶解度最小,当把牛奶的值调到4.8 时 (酪蛋白的等电点),酪蛋白便沉淀出来。酪蛋白不溶于乙醇和

2、乙醚,可用乙醇和乙醚来洗去其中的脂肪。乳糖不溶于乙醇在滤去酪蛋白的清液中加入乙醇时,乳糖会结晶出来。三、实验步骤、酪蛋白与乳糖的提取 g 奶粉与 80 mL 40 温水调配均匀, 以 10% 乙酸调节 pH=4.7(用精密 pH 试纸测试 ),-可编辑修改 -。静置冷却,抽滤。滤饼用6mL水洗涤,滤液合并到前一滤液中。滤饼依次用6mL95% 乙醇, 6mL 乙醚洗涤,滤液弃去。滤饼即为酪蛋白,晾干称重。在水溶液中加入2.5g 碳酸钙粉,搅拌均匀后加热至沸,过滤除去沉淀,在滤液中加入1 2 粒沸石, 加热浓缩至8ml 左右,加入 10ml 95% 乙醇(注意离开火焰)和少量活性炭,搅拌均匀后在水

3、浴上加热至沸腾,趁热过滤, 滤液必须澄清, 加塞放置过夜, 乳糖结晶析出,抽滤,用 95% 乙醇洗涤产品,晾干称重。、酪蛋白的性质缩二脲反应取 10ml酪蛋白溶液,加入10%NaOH溶液 2ml 后,滴入1%CuSO4溶液 1ml 。振荡试管,观察现象(溶液呈蓝紫色)。蛋黄颜色反应取 10ml酪蛋白溶液,加入浓硝酸2ml后加热,观察现象(有黄色沉淀生成)。再加入10%NaOH溶液 2ml ,有何变化 ?(沉淀为橘黄色 )3 、乳糖的性质Fehling反应 ehling试剂 A 和各 3mL, 混匀,加热至沸后加入0.5mL5% 乳糖溶液,观察现象。Tollen 反应在 2mLTollen试剂中加入0.5mL5% 乳糖溶液,在80 中加热,观察现象 ( 有银镜生成 )。四、实验结果品名性状产量收率-可编辑修改 -。五、问题与讨论、本实验中是如何将蛋白质和糖分开的?、用乙醇和乙醚洗涤时主要除去的是哪类物质?、加入碳酸钙粉末有什么作用?-可编辑修改 -。THANKS !致力为企业和个人提供合同协议,策划案计划书, 学习课件等等打造全网一站式需求欢迎您的下载,资料仅供参考-可编辑修改 -

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