《1023控制菌检查用培养基适用性检查标准操作规程.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《1023控制菌检查用培养基适用性检查标准操作规程.doc（27页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、控制菌检查用培养基适用性检查标准操作规程 SOP-QC1023文件名称：控制菌检查用培养基适用性检查标准操作规程文件编码：SOP-QC-1023版本号：00起草人:日 期:审核人:日 期:批准人:日 期:生效日期年 月 日页码第1页，共25页颁发部门:质量部分发范围: 质量部、质控部、档案室目的：规范控制菌检查用培养基适用性检查的标准操作程序。范围：本标准适用于控制菌检查用培养基适用性检查的操作程序。责任：质控部微生物检验人员负责执行，质控部负责人监督实施。正文：1 概述：培养基质量是影响微生物检验结果的重要环节，控制菌检查用培养基可能由于其促生长能力、指示能力、抑制能力的差异，对菌落颜色、形
2、态等指标存在较大差异，影响结果判断的客观性。2 培养基适用性检查的范围：2010年版中国药典规定微生物检查中成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基适用性检查。3 试验用菌株 大肠埃希菌CMCC(B)44102 金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003 乙型副伤寒沙门菌CMCC(B)500944 试验用培养基4.1 菌液制备用培养基 营养肉汤培养基4.2 适用性检查培养基胆盐乳糖培养基MUG培养基曙红亚甲蓝琼脂（麦康凯琼脂）胆盐乳糖发酵培养基乳糖发酵培养基营养肉汤培养基四硫磺酸钠亮绿培养基胆盐硫乳琼脂（沙门、志贺属琼脂）4.3 4.2中培养基的对照培养基4.4 上述培养基在配制
3、过程中不可高压灭菌只能加热煮沸灭菌的有2种：胆盐硫乳琼脂培养基，沙门、志贺属培养基。4.5 上述培养基在配制过程中需要添加试剂的有1种：四硫磺酸钠亮绿培养基。5 试验用稀释剂 0.9%无菌氯化钠溶液6 试验用仪器设备6.1 恒温培养箱（3035）、霉菌培养箱（2328）、蒸汽压力灭菌器、净化工作台、电热干燥箱、恒温水浴锅、振荡器、电冰箱、天平6.2 锥形瓶、培养皿（9cm）、量筒、试管及塞、吸管（1ml分度0.01，10ml分度0.1）6.3 接种环、乙醇灯、乙醇棉球或碘伏棉球、火柴、记号笔、灭菌镊子、不锈钢药匙、白瓷盘。7 适用性检查操作步骤：7.1 菌液的制备 取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌
4、、 乙型副伤寒沙门菌的新鲜培养物少许，接种至10ml营养肉汤培养基中，置3035培养1824h，取均匀培养物1ml，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍递增稀释成每1ml含菌10100cfu的菌悬液备用。7.2 菌液的计数（每种菌液制备2个平皿）在做对照试验的同时，取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的菌液、乙型副伤寒沙门菌的菌液1ml（10100cfu）用营养琼脂注皿或平板涂布，3035培养48h，计数。7.3 适用性检查7.3.1 胆盐乳糖培养基 新鲜配制100ml/瓶的对照胆盐乳糖培养基3瓶，121灭菌15min，备用。 分别接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌各1瓶，接种1ml菌液（不大于100cfu），
5、另一瓶不接种菌做空白对照，被检培养基同法操作。于3035培养18h；被检培养基与对照培养基比较，被检培养基中的试验菌应生长良好，表现为液体培养基变浑浊；培养48h，空白培养瓶和接种金黄色葡萄球菌的培养瓶应不得浑浊。7.3.2 MUG培养基新鲜配制5ml/支的对照MUG培养基，121灭菌15min，备用。取3支，接种大肠埃希菌2支，接种菌液0.2ml（不大于100cfu），另一支不接种菌做空白对照，于3035培养5小时，在366nm紫外光灯下观察结果；被检培养基同法操作；空白培养管应不得浑浊，且366nm出观察无荧光；与对照培养基比较，被检培养基中试验菌应生长良好，表现为液体培养基变浑浊，366
6、nm出应呈现荧光。若荧光不明显，则可延长至24小时观察。7.3.3 曙红亚甲蓝琼脂培养基（EMB）新鲜配制对照EMB琼脂培养基，121灭菌15min，冷却至60倾注平皿，35培养箱预培8h后备用。取5个无菌EMB平板，分别涂布大肠埃希菌和乙型副伤寒沙门菌各2皿，每皿接种菌液0.1ml（含菌50100cfu），另一平皿不接种菌做空白对照，涂布均匀后于3035倒置培养18h；被检培养基同法操作。被检菌落大小、形态特征及颜色应与对照培养基的菌落一致；培养24h，空白板应无菌落生长。7.3.4 麦康凯琼脂培养基新鲜配制对照麦康凯琼脂培养基，121灭菌15min，冷却至60倾注平皿，35培养箱预培8h后
7、备用。取5个无菌麦康凯琼脂平板，分别涂布大肠埃希菌和乙型副伤寒沙门菌各2皿，每皿接种菌液0.1ml（含菌50100cfu），另一平皿不接种菌做空白对照，涂布均匀后于3035倒置培养18h；被检培养基同法操作。被检菌落大小、形态特征及颜色应与对照培养基的菌落一致；培养24h，空白板应无菌落生长。7.3.5 乳糖胆盐发酵培养基新鲜配制10ml/支的对照乳糖胆盐发酵培养基，121灭菌15min，备用。取5支，分别接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌各2支，接种菌液1ml（不大于100cfu），另一支不接种菌做空白对照，于3035培养18小时；被检培养基同法操作；与对照培养基比较，被检培养基中试验菌生长良好
8、，表现为液体培养基变色、浑浊，且有导管中应有明显的产气现象；培养24h，空白培养管和接种金黄色葡萄球菌的培养管应不得变色浑浊。7.3.6 乳糖发酵培养基新鲜配制10ml/支的对照乳糖发酵培养基，121灭菌15min，备用。取3支，分别接种大肠埃希菌2支，接种菌液1ml（不大于100cfu），另一支不接种菌做空白对照，于3035培养18小时；被检培养基同法操作；与对照培养基比较，被检培养基中试验菌生长良好，表现为液体培养基变色、浑浊，且有导管中应有明显的产气现象；培养24h，空白培养管应不得变色、不得浑浊。7.3.7 营养肉汤培养基 新鲜配制100ml/瓶的对照营养肉汤培养基3瓶，121灭菌15
9、min，备用。 接种乙型副伤寒沙门菌2瓶，接种1ml菌液（不大于100cfu），另一瓶不接种菌做空白对照，于3035培养18h；被检培养基同法操作；与对照培养基比较，被检培养基中的试验菌应生长良好，表现为液体培养基变浑浊；培养48h，空白培养瓶应不得浑浊。7.3.8 四硫磺酸钠亮绿培养基（TTB）新鲜配制10ml/支的对照TTB培养基基础，121灭菌15min，备用。临用前，无菌操作加入0.2ml碘试液和0.1ml亮绿试液。取5支，分别接种乙型副伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌各2支，接种菌液1ml（不大于100cfu），另一支不接种菌做空白对照，于3035培养18小时；被检培养基同法操作；与对照培
10、养基比较，被检培养基中试验菌生长良好，表现为液体培养基上清浑浊；培养24h，空白培养管和接种金黄色葡萄球菌的培养管应不得浑浊。7.3.9 胆盐硫乳琼脂培养基（DHL）新鲜配制对照DHL琼脂培养基，加热充分溶解，冷却至60倾注平皿，35培养箱预培8h后备用。取3个无菌DHL琼脂平板，涂布接种乙型副伤寒沙门菌2皿，每皿接种菌液0.1ml（含菌50100cfu），另一平板不接种菌做空白对照，涂布均匀后于3035倒置培养18h；被检培养基同法操作。被检菌落大小、形态特征及颜色应与对照培养基上的菌落一致；培养48h，空白平板应无菌落生长。7.3.10 沙门、志贺属琼脂培养基（SS）新鲜配制对照SS琼脂培
11、养基，加热充分溶解，冷却至60倾注平皿，35培养箱预培8h后备用。取3个无菌SS琼脂平板，涂布接种乙型副伤寒沙门菌2皿，每皿接种菌液0.1ml（含菌50100cfu），另一平板不接种菌做空白对照，涂布均匀后于3035倒置培养18h；被检培养基同法操作。被检菌落大小、形态特征及颜色应与对照培养基上的菌落一致；培养48h，空白平板应无菌落生长。8 附件： 附件1：胆盐乳糖培养基适用性检查记录/报告书（SOP-QC-1023-R-01） 附件2：MUG培养基适用性检查记录/报告书（SOP-QC-1023-R-02） 附件3：曙红亚甲蓝琼脂适用性检查记录/报告书（SOP-QC-1023-R-03） 附
12、件4：麦康凯琼脂适用性检查记录/报告书（SOP-QC-1023-R-04） 附件5：胆盐乳糖发酵培养基适用性检查记录/报告书（SOP-QC-1023-R-05） 附件6：乳糖发酵培养基适用性检查记录/报告书（SOP-QC-1023-R-06） 附件7：营养肉汤培养基适用性检查记录/报告书（SOP-QC-1023-R-07） 附件8：四硫磺酸钠亮绿培养基适用性检查记录/报告书（SOP-QC-1023-R-08） 附件9：胆盐硫乳琼脂适用性检查记录/报告书（SOP-QC-1023-R-09） 附件10：沙门、志贺属琼脂适用性检查记录/报告书（SOP-QC-1023-R-10）9 变更历史版本号变更
13、控制号更改内容生效日期 附件1：胆盐乳糖培养基适用性检查记录/报告书SOP-QC-1023-R-01检验编号：培养基名称规格批号生产单位配制批号 培养基被检品g/瓶对照品g/袋检验日期 年 月 日 检验人报告日期 年 月 日复核人检验依据中国药典2010年版微生物限度检查法一、主要仪器设备恒温培养箱 DHP120 上海试验仪器厂二、菌液的制备：取备用菌种的新鲜培养物接种至10ml营养肉汤培养基中，置3035培养1824h，取均匀培养物1ml，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍递增稀释成每1ml含菌10100cfu的菌悬液备用。 其菌数在做对照试验的同时用营养琼脂注皿或平板涂布，经3035培养48h
14、培养后计数确定。试验用菌种菌种传代至菌种接种至稀释用溶液稀释级计数cfu/ml大肠埃希菌CMCC(B)44102第 代营养肉汤培养基0.9%无菌氯化钠溶液金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003第 代营养肉汤培养基0.9%无菌氯化钠溶液三、适用性检查：1 操作：1.1 新鲜配制100ml/瓶的对照胆盐乳糖培养基3瓶，121灭菌15min，备用。 1.2 分别接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌各1瓶，接种1ml菌液（不大于100cfu），另一瓶不接种菌做空白对照。1.3 被检培养基同法操作。1.4 标准规定：1.4.1 置3035培养18h；被检培养基与对照培养基比较，被检培养基中的试验菌应生长良好，
15、表现为液体培养基变浑浊；1.4.2 置3035培养48h，空白培养瓶和接种金黄色葡萄球菌的培养瓶应不得浑浊。2 检查结果记录：瓶号菌液名称接种菌液量培养温度（）培养时间培养结果对照1大肠埃希菌浑浊未见浑浊对照2金黄色葡萄球菌浑浊未见浑浊对照3空白浑浊未见浑浊被检1大肠埃希菌浑浊未见浑浊被检2金黄色葡萄球菌浑浊未见浑浊被检3空白浑浊未见浑浊标准规定被检培养基与对照培养基比较，被检培养基中的试验菌应生长良好，表现为液体培养基变浑浊；空白培养瓶和接种金黄色葡萄球菌的培养瓶应不得浑浊。结论被检培养基符合规定。被检培养基不符合规定。四、检查报告：本品按照中国药典2010年版微生物限度检查法进行适用性检查
16、检验，结果符合规定不符合规定。第 27 页 共 27 页附件2：MUG培养基适用性检查记录/报告书SOP-QC-1023-R-02检验编号：培养基名称规格批号生产单位配制批号MUG 培养基被检品g/瓶对照品g/袋检验日期 年 月 日 检验人报告日期 年 月 日复核人检验依据中国药典2010年版微生物限度检查法一、主要仪器设备恒温培养箱 DHP120 上海试验仪器厂二、菌液的制备：取备用菌种的新鲜培养物接种至10ml营养肉汤培养基中，置3035培养1824h，取均匀培养物1ml，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍递增稀释成每1ml含菌10100cfu的菌悬液备用。 其菌数在做对照试验的同时用营养琼脂
17、注皿或平板涂布，经3035培养48h培养后计数确定。试验用菌种菌种传代至菌种接种至稀释用溶液稀释级计数cfu/ml大肠埃希菌CMCC(B)44102第 代营养肉汤培养基0.9%无菌氯化钠溶液三、适用性检查：1 操作：1.1 新鲜配制5ml/支的对照MUG培养基3支，121灭菌15min，备用。 1.2 接种大肠埃希菌2支，接种0.2ml菌液（不大于100cfu），另一支不接种菌做空白对照。1.3 被检培养基同法操作。1.4 标准规定：1.4.1 置3035培养5h；空白培养基应不得浑浊，且366nm处观察无荧光。被检培养基与对照培养基比较，被检培养基中的试验菌应生长良好，表现为液体培养基变浑浊
18、，366nm处应呈现荧光；1.4.2 若荧光不明显，则延长培养时间至24h，观察。2 检查结果记录：瓶号菌液名称接种菌液量培养温度（）培养时间培养结果对照1大肠埃希菌浑浊 不浑浊366nm呈现荧光366nm无荧光对照2大肠埃希菌浑浊 不浑浊366nm呈现荧光366nm无荧光对照3空白浑浊 不浑浊366nm呈现荧光366nm无荧光被检1大肠埃希菌浑浊 不浑浊366nm呈现荧光366nm无荧光被检2大肠埃希菌浑浊 不浑浊366nm呈现荧光366nm无荧光被检3空白浑浊 不浑浊366nm呈现荧光366nm无荧光标准规定空白培养基应不得浑浊，且366nm处观察无荧光。被检培养基与对照培养基比较，被检培
19、养基中的试验菌应生长良好，表现为液体培养基变浑浊，366nm处应呈现荧光；结论被检培养基符合规定。被检培养基不符合规定。四、检查报告：本品按照中国药典2010年版微生物限度检查法进行适用性检查检验，结果符合规定不符合规定。附件3：曙红亚甲蓝琼脂培养基适用性检查记录/报告书SOP-QC-1023-R-03检验编号：培养基名称规格批号生产单位配制批号曙红亚甲蓝琼脂培养基被检品g/瓶对照品g/袋检验日期 年 月 日 检验人报告日期 年 月 日复核人检验依据中国药典2010年版微生物限度检查法一、主要仪器设备恒温培养箱 DHP120 上海试验仪器厂二、菌液的制备：取备用菌种的新鲜培养物接种至10ml营
20、养肉汤培养基中，置3035培养1824h，取均匀培养物1ml，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍递增稀释成每1ml含菌50100cfu的菌悬液备用。 其菌数在做对照试验的同时用营养琼脂注皿或平板涂布，经3035培养48h培养后计数确定。试验用菌种菌种传代至菌种接种至稀释用溶液稀释级计数cfu/ml大肠埃希菌CMCC(B)44102第 代营养肉汤培养基0.9%无菌氯化钠溶液乙型副伤寒沙门菌CMCC(B)50094第 代营养肉汤培养基0.9%无菌氯化钠溶液三、适用性检查：1 操作：1.1 新鲜配制对照EMB琼脂培养基，121灭菌15min，冷却至60倾注平皿，35培养箱预培8h后备用。1.2 取5个无
21、菌EMB平板，分别涂布大肠埃希菌和乙型副伤寒沙门菌各2皿，每皿接种菌液0.1ml（含菌50100cfu），另一平皿不接种菌做空白对照，涂布均匀后于3035倒置培养18h；空白板培养24h。1.3 被检培养基同法操作。1.4 标准规定：1.4.1被检培养基菌落大小、形态特征及颜色应与对照培养基的菌落一致；1.4.2培养24h，空白板应无菌落生长。2 检查结果记录：培养温度： 培养时间：接种菌液平皿： 日 时 分 日 时 分 空白板： 日 时 分 日 时 分 试验菌株平皿号被检培养基对照培养基回收率%被检培养基与对照培养基菌落大小、形态、颜色比较大肠埃希菌1一致不一致2平均值乙型副伤寒沙门菌1一致
22、不一致2平均值空白有菌生长 无菌生长标准规定被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70%，且被检菌落大小、形态特征及颜色应与对照培养基的菌落一致；空白板应无菌落生长。结 论被检培养基符合规定。被检培养基不符合规定。四、检查报告：本品按照中国药典2010年版微生物限度检查法进行适用性检查检验，结果符合规定不符合规定。附件4：麦康凯琼脂培养基适用性检查记录/报告书SOP-QC-1023-R-04检验编号：培养基名称规格批号生产单位配制批号麦康凯琼脂培养基被检品g/瓶对照品g/袋检验日期 年 月 日 检验人报告日期 年 月 日复核人检验依据中国药典2010年版微生物限度检查法一、主
23、要仪器设备恒温培养箱 DHP120 上海试验仪器厂2、 大肠埃希菌CMCC(B)44102 第 代 乙型副伤寒沙门菌CMCC(B)50094 第 代三、菌液的制备：取备用菌种的新鲜培养物接种至10ml营养肉汤培养基中，置3035培养1824h，取均匀培养物1ml，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍递增稀释成每1ml含菌50100cfu的菌悬液备用。 其菌数在做对照试验的同时用营养琼脂注皿或平板涂布，经3035培养48h培养后计数确定。试验用菌种菌种传代至菌种接种至稀释用溶液稀释级计数cfu/ml大肠埃希菌CMCC(B)44102第 代营养肉汤培养基0.9%无菌氯化钠溶液乙型副伤寒沙门菌CMCC(B
24、)50094第 代营养肉汤培养基0.9%无菌氯化钠溶液四、适用性检查：1 操作：1.1 新鲜配制对照麦康凯琼脂培养基，121灭菌15min，冷却至60倾注平皿，35培养箱预培8h后备用。1.2 取5个无菌麦康凯琼脂平板，分别涂布大肠埃希菌和乙型副伤寒沙门菌各2皿，每皿接种菌液0.1ml（含菌50100cfu），另一平皿不接种菌做空白对照，涂布均匀后于3035倒置培养18h；1.3 被检培养基同法操作。1.4 标准规定：1.4.1 被检菌落大小、形态特征及颜色应与对照培养基的菌落一致；1.4.2 培养24h，空白板应无菌落生长。2 检查结果记录：培养温度： 培养时间：接种菌液平皿： 日 时 分
25、日 时 分 空白板： 日 时 分 日 时 分 试验菌株平皿号被检培养基对照培养基回收率%被检培养基与对照培养基菌落大小、形态、颜色比较大肠埃希菌1一致不一致2平均值乙型副伤寒沙门菌1一致不一致2平均值空白有菌生长 无菌生长标准规定被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70%，且被检菌落大小、形态特征及颜色应与对照培养基的菌落一致；空白板应无菌落生长。结 论被检培养基符合规定。被检培养基不符合规定。四、检查报告：本品按照中国药典2010年版微生物限度检查法进行适用性检查检验，结果符合规定不符合规定。附件5：乳糖胆盐发酵培养基适用性检查记录/报告书SOP-QC-1023-R-05
26、检验编号：培养基名称规格批号生产单位配制批号 乳糖胆盐发酵培养基被检品g/瓶对照品g/袋检验日期 年 月 日 检验人报告日期 年 月 日复核人检验依据中国药典2010年版微生物限度检查法一、主要仪器设备恒温培养箱 DHP120 上海试验仪器厂二、菌液的制备：取备用菌种的新鲜培养物接种至10ml营养肉汤培养基中，置3035培养1824h，取均匀培养物1ml，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍递增稀释成每1ml含菌10100cfu的菌悬液备用。 其菌数在做对照试验的同时用营养琼脂注皿或平板涂布，经3035培养48h培养后计数确定。试验用菌种菌种传代至菌种接种至稀释用溶液稀释级计数cfu/ml大肠埃希菌
27、CMCC(B)44102第 代营养肉汤培养基0.9%无菌氯化钠溶液金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003第 代营养肉汤培养基0.9%无菌氯化钠溶液三、适用性检查：1操作：1.1 新鲜配制10ml/支的对照乳糖胆盐发酵培养基，121灭菌15min，备用。1.2 取5支，分别接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌各2支，接种菌液1ml（不大于100cfu），另一支不接种菌做空白对照，于3035培养18小时；1.3 被检培养基同法操作；1.4 标准规定：1.4.1 与对照培养基比较，被检培养基中试验菌生长良好，表现为液体培养基变色、浑浊，且有导管中应有明显的产气现象；1.4.2 培养24h，空白培养管和接种
28、金黄色葡萄球菌的培养管应不得变色浑浊。2 检查结果记录：培养温度： 培养时间：接种大肠埃希菌培养管： 日 时 分 日 时 分 接种金黄色葡萄球菌培养管： 日 时 分 日 时 分 空白培养管： 日 时 分 日 时 分瓶号菌液名称接种菌液量培养结果对照1大肠埃希菌变色、浑浊、产气未见变色、浑浊、产气对照2金黄色葡萄球菌变色、浑浊、产气未见变色、浑浊、产气对照3空白变色、浑浊、产气未见变色、浑浊、产气被检1大肠埃希菌变色、浑浊、产气未见变色、浑浊、产气被检2金黄色葡萄球菌变色、浑浊、产气未见变色、浑浊、产气被检3空白变色、浑浊、产气未见变色、浑浊、产气标准规定与对照培养基比较，被检培养基中试验菌生长
29、良好，表现为液体培养基变色、浑浊，且有导管中应有明显的产气现象；空白培养管和接种金黄色葡萄球菌的培养管应不得变色浑浊。结论被检培养基符合规定。被检培养基不符合规定。四、检查报告：本品按照中国药典2010年版微生物限度检查法进行适用性检查检验，结果符合规定不符合规定。附件6：乳糖发酵培养基适用性检查记录/报告书SOP-QC-1023-R-06检验编号：培养基名称规格批号生产单位配制批号 乳糖发酵培养基被检品g/瓶对照品g/袋检验日期 年 月 日 检验人报告日期 年 月 日复核人检验依据中国药典2010年版微生物限度检查法一、主要仪器设备恒温培养箱 DHP120 上海试验仪器厂二、菌液的制备：取备
30、用菌种的新鲜培养物接种至10ml营养肉汤培养基中，置3035培养1824h，取均匀培养物1ml，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍递增稀释成每1ml含菌10100cfu的菌悬液备用。 其菌数在做对照试验的同时用营养琼脂注皿或平板涂布，经3035培养48h培养后计数确定。试验用菌种菌种传代至菌种接种至稀释用溶液稀释级计数cfu/ml大肠埃希菌CMCC(B)44102第 代营养肉汤培养基0.9%无菌氯化钠溶液3、 适用性检查：1 操作：1.1 新鲜配制10ml/支的对照乳糖发酵培养基，121灭菌15min，备用。1.2 取3支，分别接种大肠埃希菌2支，接种菌液1ml（不大于100cfu），另一支不接种
31、菌做空白对照，于3035培养18小时；1.3 被检培养基同法操作；1.4 标准规定：1.4.1 与对照培养基比较，被检培养基中试验菌生长良好，表现为液体培养基变色、浑浊，且有导管中应有明显的产气现象；1.4.2 培养24h，空白培养管应不得变色、不得浑浊。2 检查结果记录：培养温度： 培养时间：接种大肠埃希菌培养管： 日 时 分 日 时 分 空白培养管： 日 时 分 日 时 分瓶号菌液名称接种菌液量培养结果对照1大肠埃希菌变色、浑浊、产气未见变色、浑浊、产气对照2 大肠埃希菌变色、浑浊、产气未见变色、浑浊、产气对照3空白变色、浑浊、产气未见变色、浑浊、产气被检1大肠埃希菌变色、浑浊、产气未见变
32、色、浑浊、产气被检2 大肠埃希菌变色、浑浊、产气未见变色、浑浊、产气被检3空白变色、浑浊、产气未见变色、浑浊、产气标准规定与对照培养基比较，被检培养基中试验菌生长良好，表现为液体培养基变色、浑浊，且有导管中应有明显的产气现象；空白培养管应不得变色、不得浑浊。结论被检培养基符合规定。被检培养基不符合规定。四、检查报告：本品按照中国药典2010年版微生物限度检查法进行适用性检查检验，结果符合规定不符合规定。附件7：营养肉汤培养基适用性检查记录/报告书SOP-QC-1023-R-07检验编号：培养基名称规格批号生产单位配制批号 营养肉汤培养基被检品g/瓶对照品g/袋检验日期 年 月 日 检验人报告日
33、期 年 月 日复核人检验依据中国药典2010年版微生物限度检查法一、主要仪器设备恒温培养箱 DHP120 上海试验仪器厂二、菌液的制备：取备用菌种的新鲜培养物接种至10ml营养肉汤培养基中，置3035培养1824h，取均匀培养物1ml，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍递增稀释成每1ml含菌10100cfu的菌悬液备用。 其菌数在做对照试验的同时用营养琼脂注皿或平板涂布，经3035培养48h培养后计数确定。试验用菌种菌种传代至菌种接种至稀释用溶液稀释级计数cfu/ml乙型副伤寒沙门菌CMCC(B)50094第 代营养肉汤培养基0.9%无菌氯化钠溶液4、 适用性检查：1 操作：1.1 新鲜配制100
34、ml/瓶的对照营养肉汤培养基3瓶，121灭菌15min，备用。 1.2 接种乙型副伤寒沙门菌2瓶，接种1ml菌液（不大于100cfu），另一瓶不接种菌做空白对照，于3035培养18h；1.3 被检培养基同法操作；1.4 标准规定：1.4.1 与对照培养基比较，被检培养基中的试验菌应生长良好，表现为液体培养基变浑浊；1.4.2 培养48h，空白培养瓶应不得浑浊。2 检查结果记录：培养温度： 培养时间：接种乙型副伤寒沙门菌培养管： 日 时 分 日 时 分 空白培养管： 日 时 分 日 时 分瓶号菌液名称接种菌液量培养结果对照1乙型副伤寒沙门菌浑浊未见浑浊对照2 乙型副伤寒沙门菌 浑浊未见浑浊对照3
35、空白浑浊未见浑浊被检1 乙型副伤寒沙门菌浑浊未见浑浊被检2 乙型副伤寒沙门菌浑浊未见浑浊被检3空白浑浊未见浑浊标准规定与对照培养基比较，被检培养基中试验菌生长良好，表现为液体培养基变浑浊；空白培养管应不得浑浊。结论被检培养基符合规定。被检培养基不符合规定。四、检查报告：本品按照中国药典2010年版微生物限度检查法进行适用性检查检验，结果符合规定不符合规定。附件8：四硫磺酸钠亮绿培养基适用性检查记录/报告书SOP-QC-1023-R-08检验编号：培养基名称规格批号生产单位配制批号四硫磺酸钠亮绿培养基被检品g/瓶对照品g/袋检验日期 年 月 日 检验人报告日期 年 月 日复核人检验依据中国药典2
36、010年版微生物限度检查法一、主要仪器设备恒温培养箱 DHP120 上海试验仪器厂二、菌液的制备：取备用菌种的新鲜培养物接种至10ml营养肉汤培养基中，置3035培养1824h，取均匀培养物1ml，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍递增稀释成每1ml含菌10100cfu的菌悬液备用。 其菌数在做对照试验的同时用营养琼脂注皿或平板涂布，经3035培养48h培养后计数确定。试验用菌种菌种传代至菌种接种至稀释用溶液稀释级计数cfu/ml乙型副伤寒沙门菌CMCC(B)50094第 代营养肉汤培养基0.9%无菌氯化钠溶液金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003第 代营养肉汤培养基0.9%无菌氯化钠溶液三、适用
37、性检查：1操作：1.1 新鲜配制10ml/支的对照TTB培养基基础，121灭菌15min，备用。1.2 临用前，无菌操作加入0.2ml碘试液和0.1ml亮绿试液。1.3 取5支，分别接种乙型副伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌各2支，接种菌液1ml（不大于100cfu），另一支不接种菌做空白对照，于3035培养18小时；1.4 被检培养基同法操作；1.5 标准规定：1.5.1与对照培养基比较，被检培养基中试验菌生长良好，表现为液体培养基上清浑浊；1.5.2培养24h，空白培养管和接种金黄色葡萄球菌的培养管应不得浑浊。2 检查结果记录：培养温度： 培养时间：接种乙型副伤寒沙门菌培养管： 日 时 分 日
38、时 分 接种金黄色葡萄球菌培养管： 日 时 分 日 时 分 空白培养管： 日 时 分 日 时 分瓶号菌液名称接种菌液量培养结果对照1 乙型副伤寒沙门菌上清浑浊上清未见浑浊对照2金黄色葡萄球菌上清浑浊上清未见浑浊对照3空白上清浑浊上清未见浑浊被检1乙型副伤寒沙门菌上清浑浊上清未见浑浊被检2金黄色葡萄球菌上清浑浊上清未见浑浊被检3空白上清浑浊上清未见浑浊标准规定与对照培养基比较，被检培养基中试验菌生长良好，表现为液体培养基上清浑浊；空白培养管和接种金黄色葡萄球菌的培养管应不得浑浊。结论被检培养基符合规定。被检培养基不符合规定。四、检查报告：本品按照中国药典2010年版微生物限度检查法进行适用性检查检验，结果符合规定不符合规定。附件9：胆盐硫乳琼脂培养基适用性检查记录/报告书SOP-QC-1023-R-09检验编号：培养基名称规格批号生产单位配制批号胆盐硫乳琼脂培养基被检品g/瓶对照品g/袋检验日期 年 月 日 检验人报告日期 年 月 日复核人检验依据中国药典2010年版微生物限度检查法一、主要仪器设备恒温培养箱 DHP120 上海试验仪器厂二、菌液的制备：取备用菌种的新鲜培养物接种至10ml营养肉汤培养基中，置3035培养1824h，取均匀培养物1m