临床微生物SOP-志贺菌属检验标准操作规程.doc

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1、XXX医院检验科微生物实验室志贺菌属检验标准操作规程编号:MYCH/ 版本:第1版 第0次修改页数:第 4 页 共 4 页志贺菌属检验标准操作规程1.概述志贺菌属分为4个群(种):A群为痢疾志贺菌,B群为福氏志贺菌,C群为鲍氏志贺菌D群为宋内志贺菌。2.标本类型 粪便、肛拭子标本。3.鉴定3.1 形态与染色 革兰阴性杆菌。3.2培养特性 在麦康凯琼脂平板上35培养1824小时,形成无色透明的无色小菌落。在SS琼脂平板上呈无色透明或半透明的较小菌落。3.3 生化反应 氧化酶试验阴性,发酵葡萄糖、甘露醇,不发酵乳糖、蔗糖,TSI为K/A,甲基红和硝酸盐还原试验阳性,动力、VP、枸橼酸盐、脲酶、H2

2、S和醋酸盐试验均阴性。3.4鉴定要点 3.4.1 本菌属特征 在SS琼脂平板上为无色透明或半透明的小菌落,TSI为K/A,发酵葡萄糖,不发酵乳糖,无动力、脲酶、H2S试验均阴性。符合上述特性者,可通过血清凝集试验作出诊断。如血清不凝集,应进一步鉴别。3.4.2 志贺菌属种间鉴别见下表。志贺菌属种间鉴别的关键性试验(阳性%)菌名半乳糖苷酶鸟氨酸甘露醇乳糖福氏志贺菌10951痢疾志贺菌30000鲍氏志贺菌102971宋内志贺菌9098992*注:“*”为迟反应。3.5操作步骤3. 5.1 观察菌落特征,挑取可疑菌落,做TSI试验参见三糖铁试验标准操作规程。3.5.2 血清学鉴定 参见志贺菌血清学检

3、测标准操作规程。3.5.3 鉴定 从SS琮脂平板上挑取纯菌落,用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。4.药敏参见抗菌药物敏感试验标准操作规程。5.质量控制参见质量管理程序。6.检验结果解释与分析6.1一般志贺菌不进入血液,所以只取粪便和肛拭标本作培养。本菌大多数菌株对氯霉毒素、链霉素、氨苄西林耐药,多数菌株对卡那霉素、庆大霉素敏感。7临床意义志贺菌属引起细菌性痢疾,表现为腹痛、发热、大量水样便,12日后转为少量腹泻(有里急后重现象),便中含有多量的血、黏液和白细胞。临床主要有两种类型:急性细菌性痢疾,又分典型和不典型两种,后者症状不典型,容易造成误诊和漏诊;慢性细菌性痢疾,常因急性菌痢治疗

4、不彻底,造成反复发作、迁延不愈,病程超过2个月以上视为慢性菌痢。8.鉴定流程 粪便或肛拭子 分离培养(SS、MAC) 增菌培养(GN肉汤) 菌落观察:SS平板上呈无色、透明或半透明较小菌落 初步鉴定:TSI,KIA/MIU 血清鉴定 仪器或手工细菌鉴定 志贺菌属参考文献1 中国合格评定国家认可委员会CNAS - GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南20082 周庭银编著临床微生物学诊断与图解第二版上海:上海科学技术出版社,20073 叶应妩,王毓三,申子瑜主编全国临床检验操作规程第三版南京:东南大学出版社,20064 Murray PR. Manual O/F Clinical Microbilogy.9thed. Washington:ASM Press, 20075 IS0 15189:2007医学实验室一质量和能力认可准则2007编写人签名复审人签名审批人签名生效日期姓 名:XX编写日期:2011-05姓 名:XXX复审日期:2011-06姓 名:XXX批准日期:2011-062011-07

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