《妇产科学专业毕业论文[精品论文]同型半胱氨酸所致大鼠仔鼠先天性心脏病与PAX-8基因表达的研究.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《妇产科学专业毕业论文[精品论文]同型半胱氨酸所致大鼠仔鼠先天性心脏病与PAX-8基因表达的研究.doc（42页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、妇产科学专业毕业论文 精品论文 同型半胱氨酸所致大鼠仔鼠先天性心脏病与PAX-8基因表达的研究关键词：先天性心脏病 同型半胱氨酸 PAX-8基因 基因表达 动物模型摘要：目的：通过同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨Hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，CHD）PAX-8基因表达的关系及叶酸（Folic Acid，FA）、VitB12对Hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法：40只S-D孕鼠随机分为四组：高剂量Hcy建模组（A组）、低剂量Hcy建模组（B组）、高剂量Hcy+（
2、FA+VitB12）干预组（C组）及对照组（D组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy：A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d，C组自确定妊娠起，按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例，非CHD仔鼠心脏各15例，D组非CHD仔鼠心脏15例，提取RNA，应用real time PCR检测PAX-8 m
3、RNA在仔鼠心脏的表达情况；同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较，p值均<0.01；A、B、C三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用FA+Vit B12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、
4、8.77及0.74，A、B、C三组之间两两比较，p值均>0.05；A、B、C三组分别与D组比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较： B组>A组，A组>C组，p值均<0.01，B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8m
5、RNA表达比较，p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达，且与Hcy剂量呈负相关，PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。
6、 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性，孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数，降低Hcy的胚胎毒性。正文内容 目的：通过同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨Hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，CHD）PAX-8基因表达的关系及叶酸（Folic Acid，FA）、VitB12对Hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法：40只S-D孕鼠随机分为四组：高剂量Hcy建模组（A组）、低剂量Hcy建模组（B组）、高剂量Hcy+（FA+VitB12）干预组（C组）及对照组（D组），每组各1
7、0只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy：A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d，C组自确定妊娠起，按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例，非CHD仔鼠心脏各15例，D组非CHD仔鼠心脏15例，提取RNA，应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况；同时选取A、B、C三组VSD仔鼠
8、心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较，p值均<0.01；A、B、C三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用FA+Vit B12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，A、B、C三组之间两两比较，p值均&am
9、p;gt;0.05；A、B、C三组分别与D组比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较： B组>A组，A组>C组，p值均<0.01，B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较，p值均>0.05。VSD仔鼠心
10、肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达，且与Hcy剂量呈负相关，PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性，孕期FA与VitB12干预
11、可增加平均胎产数，降低Hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨Hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，CHD）PAX-8基因表达的关系及叶酸（Folic Acid，FA）、VitB12对Hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法：40只S-D孕鼠随机分为四组：高剂量Hcy建模组（A组）、低剂量Hcy建模组（B组）、高剂量Hcy+（FA+VitB12）干预组（C组）及对照组（D组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy：A组2 Hc
12、y2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d，C组自确定妊娠起，按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例，非CHD仔鼠心脏各15例，D组非CHD仔鼠心脏15例，提取RNA，应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况；同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例，5甲醛固
13、定，石蜡包埋，应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较，p值均<0.01；A、B、C三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用FA+Vit B12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，A、B、C三组之间两两比较，p值均>0.05；A、B、C三组分别与D组比较，p值均<
14、;0.01，提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较： B组>A组，A组>C组，p值均<0.01，B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较，p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关，r=0
15、.949，p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达，且与Hcy剂量呈负相关，PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性，孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数，降低Hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（Hom
16、ocysteine，Hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨Hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，CHD）PAX-8基因表达的关系及叶酸（Folic Acid，FA）、VitB12对Hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法：40只S-D孕鼠随机分为四组：高剂量Hcy建模组（A组）、低剂量Hcy建模组（B组）、高剂量Hcy+（FA+VitB12）干预组（C组）及对照组（D组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy：A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy
17、2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d，C组自确定妊娠起，按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例，非CHD仔鼠心脏各15例，D组非CHD仔鼠心脏15例，提取RNA，应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况；同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结
18、果：1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较，p值均<0.01；A、B、C三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用FA+Vit B12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，A、B、C三组之间两两比较，p值均>0.05；A、B、C三组分别与D组比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mR
19、NA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较： B组>A组，A组>C组，p值均<0.01，B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较，p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C
20、、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达，且与Hcy剂量呈负相关，PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性，孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数，降低Hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，
21、探讨Hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，CHD）PAX-8基因表达的关系及叶酸（Folic Acid，FA）、VitB12对Hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法：40只S-D孕鼠随机分为四组：高剂量Hcy建模组（A组）、低剂量Hcy建模组（B组）、高剂量Hcy+（FA+VitB12）干预组（C组）及对照组（D组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy：A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d，C组自确定
22、妊娠起，按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例，非CHD仔鼠心脏各15例，D组非CHD仔鼠心脏15例，提取RNA，应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况；同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、
23、11.56只及13.56只，A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较，p值均<0.01；A、B、C三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用FA+Vit B12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，A、B、C三组之间两两比较，p值均>0.05；A、B、C三组分别与D组比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：PAX-8 mR
24、NA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较： B组>A组，A组>C组，p值均<0.01，B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较，p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠，p值均&
25、amp;lt;0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达，且与Hcy剂量呈负相关，PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性，孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数，降低Hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨Hcy与先天性心脏病（congenital heart defec
26、t，CHD）PAX-8基因表达的关系及叶酸（Folic Acid，FA）、VitB12对Hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法：40只S-D孕鼠随机分为四组：高剂量Hcy建模组（A组）、低剂量Hcy建模组（B组）、高剂量Hcy+（FA+VitB12）干预组（C组）及对照组（D组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy：A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d，C组自确定妊娠起，按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d
27、给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例，非CHD仔鼠心脏各15例，D组非CHD仔鼠心脏15例，提取RNA，应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况；同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较，p
28、值均<0.01；A、B、C三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用FA+Vit B12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，A、B、C三组之间两两比较，p值均>0.05；A、B、C三组分别与D组比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠，p值均&l
29、t;0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较： B组>A组，A组>C组，p值均<0.01，B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较，p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心
30、脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达，且与Hcy剂量呈负相关，PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性，孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数，降低Hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨Hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，CHD）PAX-8基因表达的关系及叶酸（Folic Acid，FA
31、）、VitB12对Hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法：40只S-D孕鼠随机分为四组：高剂量Hcy建模组（A组）、低剂量Hcy建模组（B组）、高剂量Hcy+（FA+VitB12）干预组（C组）及对照组（D组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy：A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d，C组自确定妊娠起，按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜
32、下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例，非CHD仔鼠心脏各15例，D组非CHD仔鼠心脏15例，提取RNA，应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况；同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较，p值均<0.01；A、B、C三组平均产仔数之间两两比较，p
33、值均<0.01，提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用FA+Vit B12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，A、B、C三组之间两两比较，p值均>0.05；A、B、C三组分别与D组比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表
34、达比较： B组>A组，A组>C组，p值均<0.01，B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较，p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非CHD仔鼠
35、心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达，且与Hcy剂量呈负相关，PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性，孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数，降低Hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨Hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，CHD）PAX-8基因表达的关系及叶酸（Folic Acid，FA）、VitB12对Hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨CHD发
36、生的病因。 方法：40只S-D孕鼠随机分为四组：高剂量Hcy建模组（A组）、低剂量Hcy建模组（B组）、高剂量Hcy+（FA+VitB12）干预组（C组）及对照组（D组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy：A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d，C组自确定妊娠起，按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各
37、5例，非CHD仔鼠心脏各15例，D组非CHD仔鼠心脏15例，提取RNA，应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况；同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较，p值均<0.01；A、B、C三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少，通
38、过对孕鼠用FA+Vit B12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，A、B、C三组之间两两比较，p值均>0.05；A、B、C三组分别与D组比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较： B组>A组，A组>C组，p值均&
39、amp;lt;0.01，B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较，p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1
40、、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达，且与Hcy剂量呈负相关，PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性，孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数，降低Hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨Hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，CHD）PAX-8基因表达的关系及叶酸（Folic Acid，FA）、VitB12对Hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法：40只S-D孕鼠随机分为四组：高剂量Hcy建模组（A
41、组）、低剂量Hcy建模组（B组）、高剂量Hcy+（FA+VitB12）干预组（C组）及对照组（D组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy：A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d，C组自确定妊娠起，按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例，非CHD仔鼠心脏各15例，D组非CHD仔鼠心脏15例，提取RNA
42、，应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况；同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较，p值均<0.01；A、B、C三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用FA+Vit B12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C
43、、D四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，A、B、C三组之间两两比较，p值均>0.05；A、B、C三组分别与D组比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较： B组>A组，A组>C组，p值均<0.01，B组与C组比较p>0.05。A、
44、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较，p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达，且与Hcy剂量呈负相
45、关，PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性，孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数，降低Hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨Hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，CHD）PAX-8基因表达的关系及叶酸（Folic Acid，FA）、VitB12对Hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法：40只S-D孕鼠随机分为四组：高剂量Hcy建模组（A组）、低剂量Hcy建模组（B组）、高剂量Hcy+（FA+VitB12）
46、干预组（C组）及对照组（D组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy：A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d，C组自确定妊娠起，按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例，非CHD仔鼠心脏各15例，D组非CHD仔鼠心脏15例，提取RNA，应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表
47、达情况；同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较，p值均<0.01；A、B、C三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用FA+Vit B12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，
48、A、B、C三组之间两两比较，p值均>0.05；A、B、C三组分别与D组比较，p值均<0.01，提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较： B组>A组，A组>C组，p值均<0.01，B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较，p值
49、均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠，p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达，且与Hcy剂量呈负相关，PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性，孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数，降低Hcy的胚胎毒性。