中药药理学实验课教案.docx

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1、实验一 附子炮制前后致小鼠中毒死亡的情况比较实验目的:用小鼠死亡数观察附子炮制前后毒性的不同实验原理: 附子的有毒成份主要是乌头碱。它的性质不稳定,经长时间用水浸泡和加热煎煮炮制,都可使乌头碱水解成毒性较小的苯甲酰乌头胺和乌头胺。生附子中乌头碱含量高,经过炮制后乌头碱含量减少,毒性也降低,引起动物中毒死亡的剂量就比生附子大得多。实验器材:小鼠笼(或罐)、电子天平、注射器(1ml),小鼠灌胃针头。药品:生附子和熟附子水煎液1g/1ml、苦味酸。材料:小白鼠。体重18-22g,雌雄不拘。实验方法1,取4只小白鼠,称重,用苦味酸标记后随机分为两组,分别0.2ml/10g的生附子和炮制后的附子水煎液灌

2、胃。30min后观察两组小鼠中毒症状和死亡数有无不同。2,生附子灌服后约20min动物出现腹部收缩,身体摇摆,步态不稳和不安静等现象;30min左右可能死亡。而炮制附子水煎液灌服后则无此中毒现象。观察结果并记录。实验结果:分组数量性别体重给药剂量结果生附子制附子思考题:1. 中药炮制后对临床有何指导意义2. 为预防附子中毒,应如何降低其毒性延胡索炮制前后镇痛作用的影响实验目的:通过醋酸扭体法观察延胡索炮制前后镇痛作用的变化实验原理:延胡索的醇制浸膏、醋制浸膏、散剂等均有明显镇痛作用。延胡索乙素镇痛作用最强,丑素次之,甲素较弱。延胡索乙素为镇痛主要有效成分,其镇痛作用较吗啡弱但优于复方阿司匹林,

3、对钝痛的作用优于锐痛。与吗啡等麻醉性镇痛药相比副作用少而安全,没有成瘾性。镇痛时对呼吸没有明显抑制,也无便秘等副作用。生品中游离生物碱难溶于水,煎液中有效成分低,醋制后生物碱成盐,易溶于水,镇痛作用增强。左旋四氢巴马汀是一个多巴胺受体阻断剂,其镇痛作用机制可能与阻断脑内多巴胺D1受体,使纹状体亮氨酸脑啡肽含量增加有关。实验方法:取4只小白鼠,称重,用苦味酸标记后随机分为两组,分别0.2ml/10g的生延胡索和炮制后的延胡索水煎液灌胃。45分钟后分别腹腔注射0.7冰醋酸溶液。15min后观察小鼠们15分钟内扭体的次数。实验结果:分组动物数性别体重给药剂量冰醋酸量扭体次数生延胡索制延胡索思考题:1

4、. 炮制后延胡索镇痛作用增强的原因实验二:生大黄制大黄对小肠运动的影响实验目的:观察泻下药大黄、制大黄对小白鼠肠蠕动的影响以及它们的药理研究。实验原理:大黄的主要成分为蒽醌衍生物及二蒽酮类衍生物,大黄为泻下药的代表,临床发现病人大量服用大黄后会产生继发性便秘,在中医治疗中,常以芒硝、厚朴、枳实等配伍应用,以减轻此副作用 。现代研究表明,是因为大黄同时含有泻下作用的蒽苷及止泻作用的鞣质所致,蒽苷泻下作用强而作用时间较短,鞣质止泻作用强度较弱而作用时间长,大黄不同炮制品的致泻强度亦不同,生大黄的致泻强度高于熟大黄(九蒸九晒品、热压一次品及热压三次品)和制大黄酒(或醋)炒后泻下效力降低30%左右。有

5、研究表明,大黄煎煮时间越长,致泻作用愈小,以热水浸50以下减压浓缩为好。实验步骤:取体重202g相近的小白鼠8只,随机均分为2组,每组4只,用苦味酸做标记。分别用上述3种炭末液0.2ml/10g体重灌胃。给药30min后脱颈椎处死,切开腹腔分离肠系膜,剪取上端至幽门,下端至回盲肠的肠管,置于托盘上。轻轻将小肠拉成直线,测量肠管长度作为“小肠总长度”,从幽门至炭末前沿的距离作为“炭末在肠内推进距离”,取各组小鼠平均值,用公式计算炭末推进百分率。 炭末推进率=炭末在肠内推进距离(cm)小肠全长(cm)100%实验结果:分组数量给药剂量肠全场推进距离推进率生大黄制大黄思考题:1.大黄泻下的主要成分及

6、机制 2.大黄炮制前后化学成分有何变化实验三:猪苓泽泻对家兔的利尿作用实验目的:学校导尿法,观察猪苓泽泻的利尿作用实验原理:猪苓味甘、淡、性平,归肾、膀胱经,具有利尿渗湿作用,且作用于黄芪、玉米须、木通、淡竹叶等。主治小便不利、水肿、泄泻、淋浊、带下。实验研究表明猪苓的利尿作用与抑制肾小管对水、电解质的重吸收有关,但其利尿特点及分子生物学机制尚不明确。 研究发现,其为利尿药,也有降血压的作用,可医治肾性水肿、心脏性水肿、烦热口渴、小便不利、泻痢及其他新陈代谢障碍等。猪苓提取物对肾结石大鼠实验表明: 猪苓具有明显促进肾排泄Na+、k+、cl-,而抑制尿ca+排泄及抑制尿草酸钙结晶的生长与聚集作用

7、,同时其肾脏骨桥蛋白(OPN) mRNA的表达也得到抑制,表现出明显的利尿和抑制尿结石形成作用,并具有明显的肾功能保护作用。研究发现,猪苓含钾量不高(30mg) ,亦不稀释血液,其利尿作用可能是由于抑制了肾小管对电解质和水的重吸收。泽泻性寒,味甘、淡,归肾、膀胱经。具有利水渗湿、泄热之功效。用于小便不利、水肿胀满、泄泻、尿少、痰饮、眩晕、热淋涩痛等症。泽泻有明显的利尿作用,这与其含有大量的钾盐有关。泽泻可用于小便不利、水肿胀满、泄泻尿少、痰饮眩晕、热淋涩痛、高脂血症、泽泻含三萜类化合物及甾醇、生物碱、苷类、黄酮、有机酸、氨基酸、多糖、挥发油等成分。研究发现,泽泻对人及家兔均有利尿作用,可使健康

8、人尿量增加63%,尿中排钠、尿素量也增加,而泽泻经甲醇、苯和丙酮提取的组分T 10mg/kg给药可使猫和兔的血压下降。实验步骤:取一只家兔称重,固定,耳缘静脉注射生理盐水10ml/kg,固定在手术台上,插导尿管,排空膀胱内尿液,收集510min内尿液两次,一只家兔灌胃猪苓泽泻水煎液,另一只灌胃等量的生理盐水,30min后收集30min的尿液。实验结果:分组数量给药剂量30min尿量60min尿量猪苓泽泻生理盐水思考题:1. 影响中药利尿的因素有哪些?2. 猪苓利尿作用机制3. 泽泻利尿作用机制实验四 三七对小鼠出血时间和凝血时间的影响实验目的:学习玻片法测定出血时间及凝血时间的测定,观察三七缩

9、短出血时间的作用实验原理:三七具有良好的止血功效,能明显缩短出血和凝血时间。 研究表明,三七的止血成分主要为三七素(Dencichine)。三七素能促使血小板聚集、变形,释放ADP、血小板因子和钙离子等物质而达到止血作用。三七中含有的三七皂苷与人参皂苷均对ADP诱导的家兔血小板聚集有明显抑制作用,且表现出剂量反应模式。在同等剂量下三七总皂苷与人参总皂苷的作用没有明显差转自http:/异。三七皂苷表现出对血浆凝血因子与血小板聚集性均有抑制作用。且在对血小板聚集的抑制方面,三七皂苷与人参皂苷的作用相当。人参三醇型皂苷具有溶血作用,人参二醇型皂苷的溶血活性很低。因此,三七具有活血化瘀的功效!实验步骤

10、:取4只小白鼠,称重,用苦味酸标记后随机分为两组,分别0.2ml/10g的三七和等量的生理盐水灌胃。30min后剪去小鼠尾端尾巴3mm左右,每隔30秒用滤纸轻轻吸除尾巴上的血,直至血流自然停止。然后45min左右,眼球取血滴于再玻片上两滴。计时,每隔30秒用针头轻佻,直至有血丝出现,马上挑另一只予以验证。即为凝血时间。实验结果:分组动物数给药量出血时间凝血时间生理盐水三七水煎液思考题:1. 三七及三七伤药片对凝血时间有何影响,此作用临床意义何在?2. 测定凝血时间有何临床意义?实验五 桔梗对小鼠的祛痰作用实验目的:学习酚红从呼吸道分泌法,观察桔梗对小鼠的祛痰作用实验原理:指示剂酚红自小鼠腹腔注

11、射并经腹腔吸收后,可部分地由支气管黏液腺分泌入气道,有祛痰作用的药物在使支气管分泌液增加的同时,其由呼吸道粘膜排出的酚红也随之增多。因而可从药物对气管内酚红排泌量的影响来观察其祛痰作用。酚红在碱性溶液中呈红色,将气管放入定量的生理盐水中,加碳酸氢钠使其显色,用比色法,分光光度计,测出酚红的排泌量。从而得到药物的祛痰作用。实验步骤:取小鼠 4 只,随机分为对照组和桔梗水煎液组,按 20ml/kg,体重,灌胃给药 30min 后。对照组给同体积生理盐水。由腹腔注射酚红溶液0.5ml/只。30min 后颈椎脱臼处死小鼠,剥去气管周围组织,剪下自甲状软骨至气管分支处的一段气管,放进盛有 3ml 生理盐

12、水的试管中,再加入 0.1ml 碳酸氢钠溶液。比较生理盐水组和桔梗组的液体颜色。实验结果:组别动物数给药剂量酚红排泌量生理盐水桔梗煎液思考题:1.桔梗祛痰作用的机制?实验六 人参对小鼠游泳时间的影响实验目的:了解人参对小鼠游泳时间的影响,掌握疲劳作用药物的常用筛选方法实验原理:人参能促进人体对糖原和三磷酸腺苷等能量物质的合理利用,并使剧烈运动时产生的乳酸转化为丙酮酸进入三羧酸循环,为机体提供更多的能量,减轻体力运动时的疲劳。本实验以小鼠游泳时间为指标观察人参的抗疲劳作用。实验步骤:玻璃缸内加水,水深20cm,水温保持在200.5。取4只小鼠,雌雄不限,称重,用苦味酸标记,随机分为两组。给药组每只灌胃人参水煎液0.25ml/10g,对照组每只灌胃等容量的生理盐水,给药后30min分别放入玻璃缸内游泳,立即计时并注意观察,当小鼠头部沉入水中10s不能浮出水面者即为体力耗竭,停止计时,记录小鼠游泳时间。与对照组比较并进行统计学处理。分别算出两组的平均游泳时间实验结果:组别动物数给药量游泳时间生理盐水人参煎液思考题:1.为什么人参可以抗疲劳?2.影响小鼠游泳时间的因素有哪些?

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