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1、薄层色谱法测定苏丹红1. 试剂和仪器苏丹、苏丹、苏丹标准溶液，乙醚，正己烷，0.5%羧甲基纤维素钠水溶液，硅胶G，7.5cm*2.5cm玻璃板、毛细管、250mL广口试剂瓶、尺子和铅笔等。2. 苏丹、苏丹、苏丹标准溶液的配制（提前配制）分别称取苏丹、苏丹、苏丹各0.5mg，用乙醚溶解后用正己烷定容至50mL，相当于100g/mL的苏丹红。3. 展开剂的配制正己烷+乙醚+氯仿（体积比为7:1:0.5）4. 薄层板的制备（至少提前一天准备）取7.5cm*2.5cm左右的载玻片5片，洗净晾干。在50mL烧杯中，放置3g硅胶G，逐渐加入0.5%羧甲基纤维素钠水溶液8mL，调成均匀的糊状，用滴管吸取此糊
2、状物，涂于上述洁净的载玻片上，用手将带浆的玻片在玻璃板或水平的桌面上做上下轻微的颤动，并不时转动方向，制成薄厚均匀、表面光洁平整的薄层板，涂好硅胶G的薄层板置于水平的玻璃板上，在室温放置0.5h后，放入烘箱中，缓慢升温至110，恒温0.5h，取出，稍冷后置于干燥器中备用。5. 点样取1块用上述方法制好的薄层板。分别在距一端1cm处用铅笔轻轻划一横线作为起始线。取管口平整的毛细管插入样品溶液中，在一块板的起始线上点苏丹、苏丹、苏丹标准溶液和混合液4个样点。样点间距0.5-0.8cm。如果样点的颜色较浅，可重复点样，重复点样前必须待前次样点干燥后进行。样点直径不应超过2mm。6. 展开用正己烷+乙
3、醚+氯仿（体积比为7:1:0.5）作为展开剂，待样点干燥后，小心放入已加入展开剂的250mL广口瓶中进行展开。点样一端应浸入展开剂0.5cm。盖好瓶塞，观察展开剂前沿上升至离板的上端1cm处取出，尽快用铅笔在展开剂上升的前沿处划一记号，晾干后观察分离的 ，比较样点的Rf值的大小。7. 数据处理计算公式：比移值： Rf = R1/ R2R1：原点至样品斑点中心之间的距离，cmR2：原点至展开剂前沿的距离，cm相对比移值： Ris=Rf（i）/Rf（s）Rf（i）是试样至原点的距离，cmRf（s）是标样至原点的距离，cm数据结果记录表展开剂展开剂距离样品编号样品点距离比移值Rf样品成分8. 思考题（1） 在一定的操作条件下为什么可利用Rf值来鉴定化合物？（2） 在混合物薄层谱中，如何判定各组分在薄层上的位置？（3） 展开剂的高度若超过了点样线，对薄层色谱有何影响？