《产生生物表面活性剂细菌的筛选以生物表面活性剂结构的.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《产生生物表面活性剂细菌的筛选以生物表面活性剂结构的.pdf（2页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、产生生物表面活性剂细菌的筛选以及生物表面活性剂结构的解产生生物表面活性剂细菌的筛选以及生物表面活性剂结构的解 析析 生物表面活性剂是由微生物代谢产生的结构多样的表面活性剂,其中脂肽和 糖脂是两类最重要的生物表面活性剂。本文根据生物表面活性剂的特性,建立了 一种高效快速准确的筛选产生物表面活性剂细菌方法。 并从油藏产出液中分离细菌,应用本文中建立的方法筛选出代谢产生生物表 面活性剂的细菌,按照分子生物学的方法鉴定了细菌种属,并分析了代谢产生生 物表面活性剂的结构。生物表面活性剂在酸性条件下溶解度会降低。 通过酶标仪检测发酵液与酸反应后浊度的变化,确立了生物表面活性剂与酸 反应的条件：三氯乙酸作为
2、反应酸,用量 100L；发酵液用量 50gL；反应时间 30min 从油藏产出液中分离到 307 株单菌,按照生物表面活性剂与酸反应的条件 进行检测,筛选出目标微生物。 通过薄层色谱(TLC)和电喷雾质谱(ESI-MS)的方法 分析发现其中有 8 株菌代谢产生脂肽,11 株菌代谢产生鼠李糖脂。 通过 16SrDNA 的方法鉴定菌种,代谢产脂肽的细菌分别为苍白杆菌 (Ochrobactrum sp)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),代谢产鼠李糖脂的细 菌为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。结合 GC-MS 和 MS/MS 的方法,解 析苍白杆菌代谢
3、产生的脂肽结构： 脂肽的脂肪酸部分包含 iso C13、 anteiso C13、 isoC14、nC14、isoC15、anteisoC15、isoC16、和 nC16-羟基脂肪酸,脂肽的 氨基酸部分都是由缬氨酸、亮氨酸、天门氨酸和谷氨酸组成；且含 iso C13、 anteiso C13、isoC14、nC14、isoC15 和 anteiso C15的脂肽的氨基酸序列都是 N-Glu-Leu-Leu-Val-Asp-Leu-Leu-C,其结构与 surfactin 结构一致。 枯草芽孢杆菌代谢产生的脂肽的组成与苍白杆菌代谢产生的脂肽组成类似。 铜绿假单胞菌产生的糖脂是单鼠李糖脂 RhaC8C10、单鼠李糖脂 RhaC10C10 和双 鼠李糖脂 RhaRhaC10C10 的混合物。 建立的生物表面活性剂产生细菌的筛选方法可行。 本文首次报道苍白杆菌也 能够代谢产生脂肽,丰富了产脂肽微生物种类的信息。 而且从胜利油田高温油藏沾 3 区块中同时筛选到了能够产脂肽和糖脂的细 菌,丰富了高温油藏产生物表面活性剂微生物多样性的认识。