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1、弧菌显色培养基 弧菌显色培养基(ChromogenicVibrioAgar) 用途： 用于水产品及食物中毒样品中弧菌特别是副溶血性弧菌的分离 和鉴定。(GB/T4789.7-2008，SN0173-2010 和 SN1022-2010) 原理： 蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；蔗糖为可 发酵的糖类；抑菌剂抑制大部分非弧菌细菌， 氯化钠可维持均衡的渗 透压；琼脂是培养基的凝固剂；混合色素与副溶血性弧菌、霍乱弧菌 和创伤弧菌所对应的酶发生特异性反应， 水解底物， 释放出显色基团， 在淡黄色平板上产生品红色菌落 (副溶血性弧菌)和绿-蓝绿色的菌落 (霍乱弧菌和创伤弧菌)。 配方（每升
2、） ： 蛋白胨 18.8g 酵母膏粉 5g 蔗糖 1 20g 氯化钠 10g 抑菌剂 1.5g 琼脂 13g 混合色素 3g 最终 pH9.00.2 使用方法 1、取瓶内干粉 71.3 克，用 1000ml 蒸馏水或纯水溶解，可按比 例扩增或缩小。搅拌加热煮沸至完全溶解，不需高压灭菌，冷至约 50，倾注灭菌平皿。 2、以无菌操作取检样 25g（mL） ，加入 3%氯化钠碱性蛋白胨 水 225mL，用旋转刀片式均质器以 8000r/min 均质 1min，或拍击 式均质器拍击 2min，或用 Pulsifier 脉冲式样品处理器均质 30 秒， 制备成 1:10 的均匀稀释液。如无均质器，则将样
3、品放入无菌乳钵中 磨碎，然后放在 500mL 的灭菌容器内，加 225mL3%氯化钠碱性蛋 白胨水，并充分振荡。 3、增菌：将上述 1:10 稀释液于 361培养 818h。 4、分离 在增菌液中用接种环取一环，于弧菌显色平板上划线分离，于 2 361培养 1824h。 5、通过验证试验进一步确认假定性副溶血性弧菌和其他弧菌， 如氧化酶、革兰氏染色、生化鉴定等。 质量控制： 本品倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后361培养 18-24 小时生长情况如下表： 量(cfu/平板) 生长情况 菌落色泽 300 良好 好 红色 质控菌株 接 种 副溶血性弧菌 ATCC17802 霍乱弧菌 VBO 非
4、01 溶藻弧菌 ATCC33787 30 30300 - 良好 良 品 绿-蓝绿色 无色 3 大 肠 埃 希 氏 菌 ATCC25922 5000 不长 注：最后的鉴定须做补充试验。 外观： 脱水培养基：浅黄色具流动性粉未。 制备好平板：淡黄色的胶。 储存条件和保质期： 脱水培养基：10-30，保质期二年。 制备好平板：2-8，最多保存两周。 参考文献: 1.GB/T4789.7-2008 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物 学检验副溶血性弧菌检验 2.SN0173-2010 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准出口 食品中副溶血性弧菌检验 3.SN1022-2010 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准出口 食品中霍乱弧菌检验 4