实验一-紫外分光光度法测定苯甲酸.docx

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1、实验一 紫外分光光度法测定苯甲酸一、实验目的学习、了解紫外分光光度法原理了解紫外分光光度计的结构和使用方法 二、实验原理当辐射能(光)通过吸光物质时,物质的分子对辐射能选择性的吸收而得到的光谱称为分子吸收光谱。 分子吸收光谱的产生与物质的分子结构、物质所在状态、溶剂和溶液的 PH 等因素有关。分子吸收光谱的强度与吸光物质的浓度有关。 表示物质对光的吸收程度, 通常采用“吸光度”这一概念来量度。根据朗伯比尔定律,在一定的条件下,吸光物质的吸光度A与该物质的浓度C和液层厚度成正比。即 A= LC因此, 只要选择一定的波长测定溶液的吸光度, 即可求出该溶液浓度,这就是紫外可见分光光度计的基本原理。在

2、碱性条件下,苯甲酸形成苯甲酸盐,对紫外光有选择性吸收,其吸收光谱的最大吸收波长为 225nm 。因此,采用紫外分光光度计测定苯甲酸在225nm 处的吸收度就能进行定量分析。三、仪器与主要试剂TU-1810 紫外可见分光光度计1cm 石英比色皿0.1M 氢氧化钠溶液苯甲酸 (AR)四、实验步骤1 、 苯甲酸标准溶液的制备称取苯甲酸(105 烘干 )100mg, 用 0.1M 氢氧化钠溶液 100ml溶解后,转入1000ml 容量瓶中 ,用蒸馏水稀释至刻度.此溶液1ml 含0.1mg 苯甲酸 .2 、 制作苯甲酸吸收曲线,选择最大吸收波长 移取苯甲酸标准溶液4.00ml 于 50ml 容量瓶中,用

3、 0.01M 氢氧化钠溶液定容,摇匀 ,此溶液 1ml 含苯甲酸 8ug.以氘灯为光源,用 0.01M 氢氧化钠溶液作为参比 ,改变测量波长(从210-240nm) 测量 8ug/ml 苯甲酸的吸光度. 以波长为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制苯甲酸的紫外吸收曲线,并找出最大的吸收波长(是否是 225nm).3、样品的测定 取 10.00ml 苯甲酸样品 ,放入 50ml 容量瓶中 ,用 0.01M 氢氧化钠溶液定容,摇匀 . 在上述曲线中所找到的最大吸收波长作为入射光波长,以 0.01M氢氧化钠溶液作为参比 ,在上述相同条件下测出苯甲酸标准溶液(8ug/ml 苯甲酸)和稀释好的样品的吸光度,分别记录.五、分析结果计算计算样品液中苯甲酸的浓度C样/C标=人样/A标六、思考题1、比较 TU-1810 与 722S 型分光光度计机构有何异同点 ?2 、本实验为什么要使用石英比色皿?3 、使用紫外光源(氘灯 )应注意些什么?-可编辑修改-THANKS !致力为企业和个人提供合同协议, 策划案计划书,学习课件等等打造全网一站式需求欢迎您的下载,资料仅供参考 -可编辑修改-

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