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1、实验三刺激和骨骼肌收缩反应的关系一、实验目的1、学习肌肉实验的电刺激方法及肌肉收缩的记录方法2、观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系3、观察骨骼肌单收缩的过程4、分析骨骼肌单收缩的3个时期5、了解骨骼肌收缩的总和现象，观察不同频率的阈上刺激引起肌肉收缩形式的改变二、实验原理腓肠肌由许多肌纤维组成，当刺激支配腓肠肌的坐骨神经时，不同的刺激强 度会引起肌肉的不同反应。当刺激强度过小时，不引起肌肉发生收缩反应，此时 的刺激为阈下刺激。当全部肌纤维同时收缩时，即出现最大的收缩反应，即使再 增大刺激强度，肌肉收缩的力量也不再随之加大。可以引起肌肉发生最大收缩反 应的最小刺激强度为最适刺激强度。肌组织对于一个
2、阈上强度的刺激发生一次迅 速的收缩反应，称为单收缩。单收缩分为 3个时期：潜伏期、收缩期和舒张期。 两个同等强度的阈上刺激，相继作用于神经-肌肉标本，如果刺激间隔大于单收 缩的时程，肌肉则出现两个分离的单收缩；如果刺激间隔小于单收缩的时程，则 出现两个收缩反应的重叠，称为收缩的总和。当同等强度的连续阈上刺激作用于 标本时，则出现多个收缩反应的叠加，称为强直收缩。当后一收缩发生在前一收 缩的舒张期时，称为不完全强直收缩。后一收缩发生在前一收缩的收缩期时， 各 自的收缩完全融合，肌肉处于持续的收缩状态，此为完全强直收缩。三、动物与器材蟾蜍、常用手术器械、计算机采集系统、张力传感器、双针型刺激电极、
3、支 架、试管夹、培养皿、任氏液、棉线。四、方法与步骤1、制备蟾蜍神经一肌肉标本取蛙一只，用自来水冲洗干净。左手握住蛙，用食指压住其头部前端使头前俯，右手持粗剪刀在颅骨后方剪断脊柱。然后左手握蛙后肢，用拇指压住骶骨.使其头与前肢自然下垂，右手持粗剪刀，沿脊往两侧剪除蛙的一切内脏及头部，注意不要伤及坐骨神经干。向下剥掉全部后肢的皮肤。然后将标本放在盛有任氏液 的培养皿中：注意用力要均匀，手不可接触标本。分离坐骨神经，剪断跟腱，游离腓肠肌至膝关节，对跟腱进行结扎，制成蟾蜍神经一肌肉标本。2、实验仪器用品的准备打开计算机采集系统，连接张力传感器与刺激输出。将标本固定在蜡盘上，腓肠肌肌腱上的扎线与张力传
4、感器的应变梁相连。调节好扎线的张力，不可过松 或过紧，以使肌肉自然拉平为宜（保证肌肉一旦收缩，即可牵动张力传感器应变 梁）。坐骨神经搭在刺激电极上。3、计算机采集系统的准备A. 打开chart软件，在set up下拉菜单中点击trigger ，在对话框中选择channel2，stop 项选择 fixed duration 2s ，post-trigger 0.5s， slope选择“正 / 负”，level 0.2v。B. 刺激参数设置。在 set up 下拉菜单中选isolated simulus ，对话框中选continues ， beep, range 中选 0.5Hz，pulse du
5、ration选 2.56ms 。C. 将样品速率调至100/s，低通10Hz,灵敏度5mvD. 将电流先调至10mA当，点start，观察标本反应。逐渐调整电流，找到阈值和最适刺激强度4、整理实验记录，清理实验台面清理桌面，清洗实验器械和培养皿。五、实验结果1 肌肉收缩阈值17 ：I2：ER9 26:I 鱼说 Window图1刺激强度与峰值的关系由图可知：肌肉收缩阈值：32卩A2 肌肉的单收缩潜伏期：2.00s2.03s收缩期：2.03s2.28s峰值：2.11s舒张期：2.28sCMfeitrVlFfliDSV图2肌肉的单收缩3 肌肉的强直收缩5口2口口: 1712口 弓1 05刺激频率/Hz峰值/mV25.55185.800109.0802010.0622511.580表肌肉收缩与刺激频率的关系六、注意事项1. 每次刺激之后让标本有相同的休息时间，（0.51分钟），并给标本滴加任氏 液保护标本。2. 实验过程中，不要改变刺激强度。3. 实验过程中，保持扎线角度不变。