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1、 生物化学实验课程实验教学大纲一、课程代码： 08100094课程名称：生物化学实验二、实验类别：专业基础实验课程学分： 2三、实验总学时： 33开课学期：2011-2012 学年第一学期四、应开实验个数：11必开实验个数：11五、面向学科专业：生物科学六、实验成绩评定方法：考核（实际操作占20、实验报告占 50、技能考核占 30） 七、实验成绩占课程总成绩比例：100%八、实验教材或自编指导书：生物化学实验科学出版社九、实验室名称：生物化学实验室（一）课程简介：生物化学实验课程是生命科学教学中重要的基础课，主要围绕生物体的组成成分如：蛋白质， 核酸， 酶等生物大分子的基本性质等方面入手，帮助
2、学生掌握生物化学的基本实验方法和技能，包括层析、比色、电泳、生化物质的分离、制备、分析和鉴定及实验方法、操作技术和一些基本仪器的原理和使用，培养学生基本实验技能，提高综合分析问题的能力。（二）实验目的和要求：通过本课程的教学使学生了解和掌握现代生物科学研究对本课程的需求，了解生物化学技术的基本原理、 方法和技能，包括生物物质的性质鉴定、 含量测定、生化分离技术的分离原理（包括盐析、等电点分离技术、电泳技术、色谱技术等） 。通过学生的独立实验设计和实践， 训练学生分析问题和解决问题的能力及实际动手能力， 同时培养学生的创新思维及对生命科学探索的兴趣和爱好。要求学生课前预习，写好预习报告，实验过程
3、中仔细观察，认真记录，课后做实验报告。（三）实验项目列表：酵母 RNA 的分离及组分鉴定综合性3必开菜花中核酸的分离和鉴定设计性3必开唾液淀粉酶的性质综合性3必开（一）实验类型：综合性（二）实验目的：实验一生物化学实验基本知识 蛋白质及氨基酸的呈色反应学时： 3实验编号实验一实验二实验项目名称生物化学实验基本知识 蛋白质及氨基酸的呈色反应 蛋白质等电点测定和沉淀反应实验类型综合性实验学时3要求必开设计性3必开实验三纸层析法分离鉴定氨基酸综合性3必开实验四实验五实验六实验七醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白综合性3必开蛋白质的定量测定（紫外分光法）总氮量的测定 -微量凯氏定氮法综合性综合性33必开必开
4、实验八实验九实验十小麦萌发前后淀粉酶活力的比较设计性3必开实验十一维生素 C 的提取及定量测定综合性3必开1 了解实验室规则和常用生化仪器名称，掌握实验记录与实验报告的写法以及实验室一些基本知识，掌握缓冲溶液的配制方法，初步掌握一些仪器的正确操作。2 掌握鉴定蛋白质的原理和方法。（三）实验内容：蛋白质和氨基酸与一些显色剂反应呈现一定的颜色反应。（四）要求：通过实验了解蛋白质的一些颜色反应，掌握鉴定蛋白质的方法。（五）每组人数： 1 人（六）主要仪器设备及配套数：常规仪器25 套（七）所属实验室：生物化学实验室（一）实验类型：设计性（二）实验目的：实验二 蛋白质等电点测定和沉淀反应学时： 31
5、熟悉蛋白质的沉淀反应。2 进一步掌握蛋白质的有关性质3 了解蛋白质的两性解离性质。4 学习测定蛋白质等电点的一种方法。（三）实验内容：蛋白质的沉淀和变性，蛋白质的等电点的测定（四）要求：了解各种沉淀试剂使蛋白质沉淀的实质和区分可逆的盐析沉淀及不可逆的沉淀作用。掌握测定蛋白质等电点的方法。（五）每组人数： 1 人（六）主要仪器设备及配套数：常规仪器25 套（七）所属实验室：生物化学实验室（一）实验类型：综合性（二）实验目的：实验三 纸层析法分离鉴定氨基酸学时： 3了解并掌握氨基酸纸层析的原理和方法（三）实验内容：以滤纸为支持物， 样品在不同溶剂系统中分配系数不同，将各种氨基酸分离，并用茚三酮染色
6、，分析计算移动速率，鉴定氨基酸的种类。（四）要求：掌握氨基酸纸层析的实验原理，并鉴定混合液中的氨基酸组分。（五）每组人数： 1 人（六）主要仪器设备及配套数：常规仪器25 套（七）所属实验室：生物化学实验室实验四醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质学时： 3（一）实验类型：综合性（二）实验目的：掌握醋酸纤维薄膜电泳法分离蛋白质的原理和方法，了解电泳技术的一般原理（三）实验内容：以醋酸纤维薄膜为支持物进行电泳，血清中各种蛋白质在电场中移动速率不同，可利用电泳法将它们分离。（四）要求：掌握电泳分离血清蛋白质的方法（五）每组人数： 1 人（六）主要仪器设备及配套数：常规仪器25 套（七）所属实验室：生物
7、化学实验室实验五 蛋白质的定量测定（紫外吸收法）学时： 3（一）实验类型：综合性（二）实验目的：了解紫外吸收法测定蛋白质浓度的原理熟悉紫外分光光度计的使用（三）实验内容：本实验根据蛋白质组成中芳香族的氨基酸在紫外光280nm 波长处有最大吸收峰，一定浓度范围内其浓度与吸光度成正比，用紫外分光光度计通过比色法绘制标准曲线，测定溶液中蛋白质的浓度。（四）要求：掌握蛋白质的定量测定的方法，掌握紫外分光光度计的使用方法（五）每组人数： 4 人（六）主要仪器设备及配套数：T6 紫外可见分光光度计2 套（七）所属实验室：生物化学实验室（一）实验类型：综合性（二）实验目的：实验六 总氮量的测定 - 微量凯氏
8、定氮法学时： 3掌握凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理和方法学会使用凯氏定氮仪（三）实验内容：用凯氏定氮法测定样品中蛋白氮的含量，并进一步求得样品中蛋白质的含量。（四）要求：掌握凯氏定氮仪的使用方法，学会测定蛋白质含量的一种方法。（五）每组人数： 4 人（六）主要仪器设备及配套数：凯氏定氮仪6 套（七）所属实验室：生物化学实验室（一）实验类型：综合性（二）实验目的：实验七 酵母 RNA的分离及组分鉴定学时：3了解核酸的组分，并掌握鉴定核酸和测定RNA 含量的方法（三）实验内容：酵母核酸中 RNA 含量较多，在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使核糖核酸沉淀， 得到 RNA 粗制品，继而用苔黑酚法测定R
9、NA的含量（四）要求：掌握稀碱法提取酵母RNA的方法，掌握用苔黑酚法测定RNA 含量的方法。（五）每组人数： 4 人（六）主要仪器设备及配套数：TDZ5-WS台式离心机 2 套T6 紫外分光光度计2 套（七）所属实验室：生物化学实验室（一）实验类型：设计性（二）实验目的：实验八 菜花中核酸的分离和鉴定学时：3学习和掌握从菜花中分离核酸的原理和操作技术（三）实验内容：用冰冷的稀三氯醋酸和稀高氯酸溶液在低温下抽提菜花匀浆，以除去酸溶性小分子，再用有机溶剂抽提去掉脂溶性物质，最后用浓盐溶液和高氯酸分别提取DNA 和 RNA ，再进行定性和定量测定。（四）要求：自行设计实验并掌握从组织中分离核酸的方法
10、，并能进行定性定量测定。（五）每组人数： 4 人（六）主要仪器设备及配套数：TDZ5-WS台式离心机 2 台（七）所属实验室：生物化学实验室（一）实验类型：综合性（二）实验目的：实验九 唾液淀粉酶的性质学时： 3了解温度、 pH、激活剂及抑制剂对酶活力的影响学习测定酶的最适温度、最适pH 的方法（三）实验内容：本实验以唾液淀粉酶对淀粉及蔗糖的催化作用, 观察酶的专一性. 以淀粉及蔗糖的酶水解产物与 Benedict试剂的颜色反应观察淀粉酶, 蔗糖酶的专一性 . 由于有些物质可作为激活剂，能提高酶活性， 有些物质可作为抑制剂， 能降低酶活性， 也能影响淀粉被水解的程度。因此，通过与碘产生的颜色反
11、应判断淀粉被水解的程度，了解激活剂和抑制剂对酶促作用的影响。（四）要求：掌握酶的专一性，及温度、pH、激活剂及抑制剂对酶活力的影响（五）每组人数： 1 人（六）主要仪器设备及配套数：常规仪器25 套（七）所属实验室：生物化学实验室实验十 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较学时： 3（一）实验类型：设计性（二）实验目的：学习测定淀粉酶活力的方法了解小麦萌发前后淀粉酶活力的变化（三）实验内容：小麦发芽酶液提取酶活力测定酶活力计算（四）要求：自行设计实验测定小麦萌发前后淀粉酶的活力（五）每组人数： 1 人（六）主要仪器设备及配套数：常规仪器25 套（七）所属实验室：生物化学实验室（一）实验类型：综合性（二）实验目的：实验十一 维生素 C的提取及定量测定学时： 3掌握 2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C 的原理和方法（三）实验内容：从新鲜果蔬中提取维生素C，通过 2,6-二氯酚靛酚法滴定法结合公式计算维生素C 的含量 。（四）要求：掌握提取维生素 C 的方法及其鉴定其含量的方法（五）每组人数： 1 人（六）主要仪器设备及配套数：常规仪器25 套（七）所属实验室：生物化学实验室