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1、医院环境微生物监测,院感办 王玲 2013年11月,环境微生物监测存在的问题？,没有按时完成监测 未及时分析监测结果 监测方法不正确 不会判断结果 不合格者，未及时复测,空气,物表,手,监测对象及方法,主要内容,一、空气的消毒效果监测,一、空气的消毒效果监测方法,（一）采用洁净技术净化空气的房间（略） （二）未采用洁净技术净化空气的房间,空气净化效果的监测部门,WS/T368-2012医院空气净化管理规范规定： 监测部门：医院应对感染高风险部门如手术部（室）、产房、导管室、层流洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿室、母婴同室、血液透析中心、烧伤病房的空气净化与消毒质量进行
2、监测。,空气净化效果的监测频度,监测频度： 医院应对感染高风险部门每季度进行监测； 洁净手术部（室）及其他洁净场所新建与改建验收时以及更换高效过滤器后应进行监测； 遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时进行监测，并进行相应致病微生物的检测。,结果判定1、类环境细菌菌落总数标准,非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数4cfu/（15min直径9cm）,结果判定2 、类环境细菌菌落总数标准,儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、
3、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数4cfu/（5min直径9cm）。,（一）未采用洁净技术净化空气的房间的空气消毒效果监测,1、采样时间 在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。 2、准备物品 直径为9cm的普通营养琼脂平板,未采用洁净技术净化空气的房间的空气消毒效果监测,3、布点方法 室内面积30m2，设内、中、 外对角线3点，内、外点布点部位距墙壁1m处；室内面积30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。,未采用洁净技术净化空气的房间的空气消毒效果监测,室内面积30m2。 室内面积30m2。,未采用洁净技术净化空气的房间的空气消毒效果监测,
4、4、布点顺序 从房间最靠里的点开始布置，最后布 置门附近的点，然后人员撤出。收培养皿的顺序相 反，从门附近的培养皿开始收。 5、采样方法 将普通营养琼脂平板放在室内各采样 点处，采样高度为距离地面0.8m1.5m，采样时 将平板盖打开，扣放于平板边延，暴露5min，盖 好，做好标记，填写化验单立即送检。,未采用洁净技术净化空气的房间的空气消毒效果监测,6、检测方法 将送检平皿置36+-1 恒温箱培养48h，计数菌落数。 注意：采样前关闭好门窗，在无人走动的情况下，静止10分钟进行采样。,二、物体表面的消毒效果监测,物体表面的消毒效果监测,1、物品准备： （1）衣帽整齐、戴帽子口罩。 （2）准备
5、物品：采样化验单、55cm标准灭菌规格板、装有10ml含相应中和剂的无菌洗脱液的试管、无菌棉签、酒精灯、火柴、试管架、标记笔、无菌剪刀。,物体表面的消毒效果监测,2、采样要求 （1）采样时间：在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。 （2）根据物体表面是否规则，采取规格板或直接涂擦采样。 （3）门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。,物体表面的消毒效果监测,3、采样方法： （1）点燃酒精灯。 （2）用5cm5cm灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂抹各5次，并随之转动采样棉拭子，连续采样4个规格板面积，被采面积100c
6、m2，取全部表面；被采面积100cm2，取100cm2。剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。（注意采样过程中不能横跨无菌面）,用 5cm 5cm的灭菌标准规格板，放在被检物体表面,用棉签蘸取,在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次,5cm,横竖往返各五次,烧试管口,剪除手接触部分,烧试管口,物体表面的消毒效果监测,4、检测方法： 充分振荡采样管后，取不同稀释倍数的洗脱液1.0ML接种平皿，将冷却至4045 溶化营养琼脂培养基每皿倾注15ml 20ml，36 +-1 温箱培养48h，计数菌落数。,物体表面的消毒效果监测,5、计算方法： 物体表面菌落总数（
7、cfu/cm2） = 平均每皿菌落数洗脱液稀释倍数 采样面积（cm2） 小型物体表面的结果计算，用cfu/件表示。,物体表面的消毒效果监测,6、结果判定： (1) 洁净手术部、其它洁净场所，非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等；物体表面细菌菌落总数5cfu/cm2.,物体表面的消毒效果监测,(2)儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染性疾病科门诊及其病房等；物体表面细菌菌落总数10cfu/cm2.,物体表面的消毒效
8、果监测 注意事项,1、根据物品表面是否规则选用规格板或直接涂擦的 方法进行采样。 2、严格注意无菌操作，采样前采样者洗手戴帽子口罩。 3、强调采样前物品表面。 已经过消毒处理。 4、用棉签蘸取含相应中和剂的无菌洗脱液时，注意 不要将手指伸入试管中。（可适当倾斜试管）,物体表面的消毒效果监测 注意事项,5、避免采样时跨越采样区域，避免采样过程中污染。 6、一只棉签连续采样4个。 7、强调用充分浸湿棉签，在规格板内横竖往返涂擦 各5次。 8、采样过程中要转动棉签。 9、剪掉手接触的棉签。,三、医务人员手和皮肤消毒效果监测,医务人员手和皮肤消毒效果监测,1、物品准备： （1）衣帽整齐、戴帽子、口罩。
9、 （2）准备物品：采样化验单、装有10ml含相应中和剂的无菌洗脱液的试管、无菌棉签、酒精灯、火柴、试管架、标记笔、无菌剪刀。,医务人员手和皮肤消毒效果监测,2、采样时间： 洗手、手消毒后，在接触病人、从事诊疗活动前进行采样。,医务人员手和皮肤消毒效果监测,3、采样方法： （1）点燃酒精灯，打开无菌剪刀。 （2）手的采样：被检者五指并拢掌心向上，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液浸湿的的棉拭子1支在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次，涂擦过程中同时转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，做好标记，填写化验单，立即送检。,医务人员手和皮肤消毒效果监测,
10、（3）皮肤粘膜采样： 采样时间：按照产品使用说明规定的作用时间，达到消毒效果后及时采样。 采样方法：用5cm5cm灭菌规格板，放在被检皮肤处，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，再用酒精灯烧烤试管口及帽后盖好试管，做好标记，填写化验单，立即送检。 不规则的皮肤可用棉拭子直接涂擦采样。,医务人员手和皮肤消毒效果监测,4、检测方法： 将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次，用无菌吸管吸取1.0ML待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，平皿内加入已溶
11、化的4548 的营养琼脂15ml 18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置36 +-1 温箱培养48h，计数菌落数。 细菌菌落总数（cfu/cm2）= 平板上菌落数稀释倍数 采样面积,医务人员手消毒效果监测,5、结果判定： 卫生手消毒：检测细菌菌落总数应10cfu/cm2 外科手消毒：检测细菌菌落总数应5cfu/cm2。 皮肤消毒效果的判定标准遵循外科手消毒卫生标准。,医务人员手消毒效果监测 注意事项,1、严格注意无菌操作，采样前采样者洗手戴帽子、 口罩。 2、采样应强调采样前被检者已经过洗手和/或手消 毒，在接触病人、从事医疗活动前。 3、用棉签蘸取含相应中和剂的无菌洗脱液时，注 意不要将手指伸入试管中。（可适当倾斜试管） 4、采样按顺序进行，避免采样时跨越采样区域， 避免采样过程中污染。,医务人员手消毒效果监测 注意事项,5、对双手的指曲面进行采样。 6、强调用充分浸湿棉签，在双手的指曲面从指根到 指端往返涂擦2次。采样过程中要转动棉签。 7、剪掉手接触的棉签。,微生物监测化验单粘贴 注意事项：,1、结果正常 将化验单粘贴于微生物监测粘贴本备查。 2、结果超标 （1）及时查找原因 在超标化验单背面填写改进措施 签名后粘贴于微生物监测粘贴本备查。 （2）及时复测 复测合格 将复测化验单粘贴于微生物监测粘贴本备查。,谢谢！,