茂名地区霍乱弧菌流行菌型及其耐药性研究.pdf

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1、8 4 8 【文章编号】1 6 7 2 3 6 1 9 ( 2 0 0 8 ) 0 8 0 8 4 8 0 2 J o u r n a lo fT r o p i c a lM e d i c i n eV 0 1 8N o 8A u g 2 0 0 8 疾病预防控制论著 2 0 0 7 年茂名地区霍乱弧菌流行菌型及其耐药性研究 廖国东1 ，麦充志1 ，许桂锋1 ，何展1 ，龙彩云1 ，陈家图1 ，张力- ，李柏生z ( 1 茂名市疾病预防控制中心，茂名5 2 5 0 0 0 ；2 广东省疾病预防控制中心，广州5 1 0 3 0 0 ) 【摘要】目的掌握茂名地区霍乱弧菌的流行菌型及其耐药性，为

2、霍乱的防控T 作提供参考。方法采集 霍乱日常监测标本和霍乱疫情标本，参照霍乱防治手册( 第5 版) 进行霍乱弧菌的分离培养和菌型鉴定， 并利用伞自动微牛物鉴定仪对获得的霍乱弧菌菌株进行临床常用的2 0 种抗菌药物的药敏分析。结果 共采集 各类标本3 3 4 份，检出1 2 株0 1 群埃尔托型( E lT o r ) 霍乱弧菌稻叶型流行株( 1d ) 。1 2 株霍乱弧菌对2 0 种药物 的敏感度完全一致，其中敏感抗生素有菌必治、庆大霉素等1 1 种，占5 5 ( 1 1 2 0 ) ；中敏抗生素有氨苄青霉素等 8 种，r 与4 0 ( 8 2 0 ) ；1 0 0 耐药的抗生素为复方新诺明i

3、 种，占5 ( 1 2 0 ) 。结论2 0 0 7 年茂名地霍乱弧菌的 流行菌型为0 l 群埃尔托犁( E lT o r ) 霍乱弧菌稻叶型流行株( 1d ) ；该流行菌型的菌株除对1 种抗生素( 复方新 诺明) 耐药外，对其余大多数抗生素均敏感( 或中敏) ，没有出现多重耐药菌株。 【关键词】霍乱弧菌；耐药性；抗牛素；流行菌型 中图分类号：R 3 7 8 3文献标识码：A S t u d yo nE p i d e m i cI s o l a t e sa n dA n t i b i o t i cR e s i s t a n c eo fV i b r i oc h o l e r

4、 a e i nM a o m i n gA r e ai n2 0 0 7 L I A OG u o - d o n g ，M A IC h o n g - z h i ，X UG u i f e n g ，H EZ h a n ，L O N GC a i y u n ， C H E NJ i a t u ，Z H A N GL i ，L IB a i s h e n g ( C e n t e rf o rD i s e a s eC o n t r o lw t dP r e v e n t i o no fM a o m i n gC i t y ，G u a n g d o n g

5、，M a o m i n g5 2 5 0 0 0 ，C h i n a ) 【A b s t r a c t 】 O b j e c t i v e T os t u d yt h ee p i d e m i ci s o l a t e sa n da n t i b i o t i cr e s i s t a n c eo fV i b r i oc h o l e r ai nM a o m i n g A r e a ，a n dp r o v i d et h e r e f e r e n c e sf o rp r e v e n t i o na n dc o n t r

6、 o lo fc h o l e r a M e t h o d S a m p l e sw e r ec o l l e c t e df r o mt h e g e n e r a ls u r v e i l l a n c ea n de p i d e m i cs i t u a t i o no fc h o l e r a B a c t e r i a ls t r a i n sw e r ei s o l a t e da c c o r d i n gt ot h e M a n u a lf o r t h eP r e v e n t i o na n dC o

7、 n t r o lo fC h o l e r a ”( v e r s i o n5 ) T h eV i b r i oc h o l e r a ei s o l a t e sw e r et e s t e df o rt h e i rr e s i s t a n c et o2 0 d i f f e r e n tc o m m o na n t i b i o t i c su s i n gt h ea u t o m a t i cm i c r o o r g a n i s mi d e n t i f i c a t i o nm a c h i n e R e

8、 s d t 3 3 4s a m p l e sw e r e c o l l e c t e d A m o n gt h o s es a m p l e s ，1 2i s o l a t e so fO lg r o u po fE lT o rV i b r i oc h o l e r a es e r ot y p el n a b al dw a sd e t e c t e d T h ea n t i b i o t i cr e s i s t a n c eo f1 2i s o l a t e st ot h e2 0k i n d sa n t i b i o t

9、 i cw a sc o m p l e t e l yc o n s i s t e n t A m o n gt h ea n t i b i o t i c s ， t h ei s o l a t e ss h o w e dt h eh i g h e s ts u s c e p t i b i l i t yt o1 1k i n d ss u c ha sC e f i r i a x o n e 。a n dG e n t a m i c i n w i t hp r o p o r t i o no f5 5 p e r c e n t ( 11 2 0 ) ，a n dm

10、 o d e r a t es u s c e p t i b i l i t yt o8k i n d ss u c ha sA m p i c i l l i n ，w i t hp r o p o r t i o no f4 0p e r c e n t ( 8 2 0 ) T h ei s o l a t e so n l ys h o w e d10 0 r e s i s t a n c et os u l f a m e t h o x a z o l e ，w i t hap r o p o r t i o no f5p e r c e n t ( 1 2 0 ) C o n

11、c l u s i o n T h ee p i d e m i ci s o l a t e so fV i b r i oc h o l e r a ew e r ei d e n t i f i e da s0 1g r o u po fE lT o rV i b r i oc h o l e r a es e r ot y p eI n a b al di n M a o m i n gA r e ai n2 0 0 7 T h e s ee p i d e m i ci s o l a t e sw e r es u s c e p t i b l e ( o rm o d e r

12、a t es u s c e p t i b l e ) t om o s to ft h e2 0 c o m m o n l yu s e da n t i b i o t i c s ，e x c e p ts u l f a m e t h o x a z o l e N oe p i d e m i ci s o l a t e ss h o w e dm u l t i p l er e s i s t a n c e st oa n t i b i o t i c s 【K e yw o r d s 】 V i b r i oc h o l e r a e ；a n t i b

13、i o t i cr e s i s t a n c e ；a n t i b i o t i c ；e p i d e m i ci s o l a t e s 霍乱是一种对人类危害严重的烈性肠道疾病，在我国 被列为甲类传染病，也是当今3 种国际检疫传染病中最严 重的1 种 1 - “。由于霍乱发病急、潜伏期短、病程重、传播速 度快，当发生霍乱流行时，如果控制不及时，会对人民群众 基金项目：茂名市2 0 0 8 年科技计划项目( N o 2 0 0 8 2 0 3 ) 。 作者简介：廖国东( 1 9 7 4 一) ，男，广东省茂名市人，医学学士，主管 技师。主要从事卫生微生物检验工作。 的健

14、康造成极大的危害。但近年来，南于霍乱弧菌流行菌 型的变迁以及耐药菌株的不断_ f 现，使部分抗菌药物的疗 效降低甚至无效【4 ，这给霍乱的防治工作带来了一定难度。 茂名市位于广东省西南部迂同的海岸线长2 2 0 多公里， 一直存在霍乱流行的危险，多年来也常有霍乱的暴发疫情 或散发个案出现 5 ，这对茂名市的经济建设和社会的和谐 发展带来了很大的制约。为掌握茂名地区霍乱弧菌的流行 菌型及其耐药性以有效地应对突发霍乱疫情、及时救治 万方数据 垫带医堂苤查2 鲤墨生墨月箜墨鲞箜蜴 霍乱病人、降低霍乱病人的死亡率和减少经济损失，我们 于2 0 0 7 年采集各种标本进行了霍乱弧菌的分离培养鉴定 和耐药

15、性研究，现将结果分析报道如下。 1 材料与方法 1 1标本来源 1 1 1 霍乱口常监测标本按照茂名市霍乱监测方案 的要求，在2 0 0 7 年1 1 2 月期间，共采集茂名地区腹泻门 诊病人粪便标本、海水及海产品等外环境标本( 含江河海 水系、海产品养殖场、饮食行业海产品保存水池水体和食 品等) 、生活及医院污水等标本2 7 8 份。 1 1 2 霍乱疫情标本2 0 0 7 年茂名地区共发生霍乱疫情 2 起，其中一起为食源性霍乱暴发疫情，共有1 0 人发病： 另一起为霍乱散发疫情，有1 人发病，另有1 人为无症 状带菌者。共采集上述霍乱疫情标本5 6 份( 含发病者及其 密切接触者粪便标本、

16、疫情发生地及发病者家居外环境标 本) 。 1 2 分离培养及鉴定方法 参照霍乱防治手册( 第5 版) 进行分离培养，并选 取可疑菌落进行活菌动力镜检、革兰氏染色镜检、霍乱弧 菌微量生化试验、霍乱弧菌诊断血清玻片凝集试验。，分离 所得的霍乱弧菌菌株送广东省疾病预防控制巾心微生物 检验所进行噬菌体一生物分型和脉冲场凝胶电泳( P F G E ) 分子分型。 1 3 耐药性研究方法 采用美国德灵诊断产品有限公司M i c r o S c a n W a l k A w a y 9 6 型全自动微生物鉴定仪及其配套的药物敏 感测试板对分离所得的霍乱弧菌菌株进行耐药性研究。 1 4 仪器与试剂 碱性蛋白

17、胨水、4 号琼脂、T C B S 琼脂由北京陆桥技术 有限责任公司提供；0 l 群及0 1 3 9 群霍乱弧菌诊断血清由 中国药品生物制品检定所提供；霍乱弧菌微量生化试验管 由广东环凯微生物科技有限公司提供：M i c r o S c a n W a l k A w a y 9 6 型全自动微生物鉴定仪及药物敏感测试板 由美国德灵诊断产品有限公司提供；氧化酶试剂由法国生 物梅里埃公司提供；噬菌体生物分型和脉冲场凝胶电泳 ( P F G E ) 分子分型所用的试剂和设备均由广东省疾病预防 控制中心微生物检验所提供并完成。所有培养基及诊断试 剂均在有效期内按说明书使用。 2 结果 2 1 霍乱弧茵

18、检出情况 日常监测标本没有检出霍乱弧菌；两起霍乱疫情的标 本共分离出霍乱弧菌1 2 株，经鉴定均为0 l 群埃尔托型 ( E lT 0 r ) 霍乱弧菌稻叶型流行株( 1d ) 。 2 2 耐药性研究结果 对分离出的1 2 株霍乱弧菌菌株进行临床常用的2 0 种抗菌药物的耐药性研究，结果1 2 株菌株对2 0 种药物的 敏感度完全一致，其中敏感的抗生素有1 1 种，占5 5 ( 1 1 8 4 9 2 0 ) ，中敏的抗生素有8 种，占4 0 ( 8 2 0 ) ，1 0 0 耐药的抗 生素只有复方新诺明1 种，占5 ( 1 2 0 ，表1 ) 。 表11 2 株霍乱弧茵菌株的耐药性研究结果

19、T a b 1R e s u l to fa n t i b i o t i cr e s i s t a n c et e s tt o1 2i s o l a t e so f V b r oc h o l e r a e 抗生素敏善箐篆药抗生素篇药 复方新诺明0 01 2 头孢毗肟 1 2 00 菌必治1 200头孢西叮01 20 菌克单01 20头孢噻肟1 200 氨苄青霉素01 20妥布霉素1 200 青霉烷砜1 200丁胺K 那霉素01 20 阿莫西林0 1 2 0庆大霉素1 200 罗米沙星 1 2 0 0 氧哌嗪青霉素01 20 环丙氟哌酸 1 200他唑两林 O1 20 替卡

20、西林 01 20亚胺硫霉素 1 200 头孢唑林 1 200复达欣1 200 2 3 综合判定 综合J ：述结果可以判定，2 0 0 7 年茂名地区霍乱弧菌的 流行菌型为0 1 群埃尔托型( E 1T o r ) 霍乱弧菌稻叶型流行 株( 1d ) ；该流行菌株除对1 种抗生素( 复方新诺明) 耐药 外，对其余大多数抗生素均敏感( 或中敏) ，没有出现多重 耐药菌株。 3 讨论 人类历史上共发生了7 次霍乱世界大流行。其中前6 次是由0 1 群古典生物型霍乱弧菌引起的而第7 次是由 0 1 群埃尔托犁霍乱弧菌引起的，至今尚未停息m “。王晓萍 等蚓的研究资料也显示新的流行菌型将以稻叶型取代小

21、川型。，茂名市属于沿海多雨地区也是霍乱的多发地【引从 茂名地区2 0 0 7 年检出的1 2 株霍乱弧菌看来。2 0 0 7 年茂名 地区霍乱弧菌的流行菌型为0 1 群埃尔托型( E 1T o r ) 霍乱 弧菌稻叶型流行株( 1d ) ，这也正好印证了上述霍乱的流 行形势 4 ” 。这应引起有关部门的重视。 对1 2 株霍乱弧菌菌株的耐药性研究资料显示2 0 0 7 年茂名地区的霍乱弧菌的流行菌株对大多数抗生素均敏 感( 菌必治、庆大霉素、青霉烷砜、罗米沙星、环丙氟哌酸、 头孢唑林、头孢吡肟、头孢噻肟、妥布霉素、亚胺硫霉素、复 达欣) 或中敏( 菌克单、氨苄青霉素、阿莫西林、替卡西林、 头孢

22、西叮、丁胺卡那霉素、氧哌嗪青霉素、他唑西林) ，仅对 复方新诺明产生1 0 0 耐药。且没有出现多重耐药菌株。这 对茂名地区的霍乱防治T 作是一个极为有利的条件同时 也提示有关部门在应对霍乱疫情时，对病例进行治疗或对 密切接触者进行预防性服药时应首先考虑选用菌必治、庆 大霉素等敏感药物而不应选用复方新诺明。这样才能及时 有效地控制疫情。 ( 致谢：感谢广东省疾病预防控制中心微生物检验所的大力 支持和指导! ) ( 下转第8 4 7 页) 万方数据 热带医学杂志2 0 0 8 年8 月第8 卷第8 期 库区将发生生态环境变化。在最高蓄水位和洪水淹没线以 下可逐渐形成边滩；在库区支流入口可逐渐形成

23、冲击洲， 形成适官钉螺生长、发育、繁殖的累积性淤积洲滩。 三峡水库修建过程中，国家投入巨资建立防护林带 加之成库后的水流减缓，水土流失减轻，库岸植被发生变 化；库区水体面积大大增加，气温将会下降土壤湿度上 升地理气候环境将向有利于钉螺孳生的方向转变，库区 大小灌溉沟渠将成为适合钉螺孳生的场地。 三峡库区上游的四川和下游的湖北、湖南等均为血吸 虫病流行区。有血吸虫病流行区县1 0 0 余个钉螺面积约 1 2 00 0 0 万平方米，且近年钉螺面积在不断扩大。已有调查 5 】 表明，钉螺可随植物的迁移而远距离扩散库区环境绿化， 植树造林，种植果树，水产养殖等，从流行区引人花草、树 苗等，极有可能带

24、入钉螺。水上航运。也有可能将钉螺从下 游带入库区。 研究表明，三峡成库后的生态环境适宜钉螺孳生，库 区存在钉螺扩散的因素一旦输入钉螺极可能成为血吸 虫病传播的中间宿主。 3 2 传染源输入 我国近年血吸虫病疫情显示不少地区 H 现新疫 区，新感染病例大量存在，库区存在血吸虫病病例输入。每 年至流行区打工近百万农民也有可能感染血吸虫带回库 区，从流行区来库区旅游和打工的流动人员存在潜在传染 源。库区发展畜牧业，从流行区引进猪、马、牛、羊等极可 能输入牲畜传染源。 综上所述，三峡库区生态环境变化存在血吸虫病流行 的潜在危险。 3 3 防治对策 三峡工程是世界瞩目的大型水利工程。成库后的卫生 问题，

25、尤其是血吸虫病，引起了全社会的关注。为防止血吸 虫病的流行提出以下建议。 3 3 1 建立库区血吸虫病监测体系开展三峡库区流动 8 4 7 人V I 血吸虫病监测，及时发现和治疗传染源。设立监测点， 定期纵向监测钉螺，及时发现，并采取相应处理措施。 3 3 2 库区畜牧业管理库区从流行区引进猪、马、牛、羊 等牲畜，应建立检疫制度，对养殖场进行卫生学评价及时 发现动物宿主，清除传染源，规范管理，进行粪便无害化处 理。 3 3 3 建立植物与相关工业原料引进的管理与检疫造 纸厂等从流行区采购的原料，园林场引进的花草树木。应 建立检疫制度，防止钉螺带入库区。 3 3 4 开展防治培训和健康教育对基层

26、防治人员进行 专业培训，及时发现疫情，并采取相应控制措施。在库区群 众巾开展健康教育，增强自我保护意识。预防血吸虫病的 发生和流行。 参考文献 f 1 魏凤华，王汝波，徐兴建，等三峡建坝后血吸虫病传播危 险因素研究T 库区生态环境变化对钉螺孳生町能性研究 J 中国血吸虫病防治杂志，2 0 0 7 ，1 9 ( 2 ) ：8 l 一8 6 2 中华人民共和国卫生部疾病控制司编血吸虫病防治手册 M ，第3 版上海科技出版，2 0 0 0 ：3 6 3 7 3 郑江，辜学广，徐承隆，等三峡建坝生态环境改变与血吸虫 传播关系的研究 J 热带医学杂志，2 0 0 1 ，1 ( 1 ) ：1 1 2 1

27、1 6 4 徐兴建，魏风华，蔡顺祥，等三峡库区可能传播血吸虫病的 危险因素及其防制对策 J 中国地方病学杂志，2 0 0 4 ，2 5 ( 7 ) ：5 5 9 5 6 4 5 张孝仁，姚孝明，黄腊光对造纸厂购进芦苇夹带钉螺的调 查 J 中国血吸虫病防治杂志，1 9 9 5 ，7 ( 2 ) ：1 2 1 6 郑江关于我国血吸虫病防治的策略问题 J 热带医学 杂志，2 0 0 6 ，6 ( 1 2 ) ：1 2 3 7 1 2 3 9 7 魏风华，王汝波，徐兴建，等血吸虫病和钉螺输入三峡库区 的途径与方式调查 J 中国血吸虫病防治杂志，2 0 0 4 ，1 6 ( 2 ) ： 1 1 8 一1

28、 2 1 ( 收稿日期：2 0 0 8 0 2 2 3 ；修回日期：2 0 0 8 0 4 0 9 ) j L j 止址址4 L 址j I L j 止，址址址址址址J I L j 也j L J L - L J 止址址l L 址驰龇屯l L I L j 止址址4 L 一| L 址屯4 上j 止J I L 址4 上- 止她J - L ( 上接第8 4 9 页) 参考文献 1 高守一霍乱防治手册 M 第5 版北京：中华人民共和国 卫生部，1 9 9 9 ：4 2 7 9 2 龚震宇，龚训良，杨小平2 0 0 5 年世界霍乱流行概况 J 疾病监测，2 0 0 7 ，2 2 ( 7 ) ：5 0 3 5

29、 0 4 3 林海江，姜庆五，王伟炳霍乱的流行现状和防制 J 上海 预防医学杂志，2 0 0 7 ，1 9 ( 7 ) ：3 6 1 3 6 2 4 梁贤芳，梁大斌中国霍乱流行菌株的耐药性变化分析 J 中 国热带医学2 0 0 1 ，1 ( 2 ) ：1 3 2 1 3 4 5 陈伟文，李波，刘美珍一起霍乱疫情的调查 J 应用预防 医学。2 0 0 6 。1 2 ( s 1 ) ：4 0 4 1 6 王晓萍，郭维植，詹銮峰，等2 0 0 5 年福建省霍乱弧菌流 行菌型特征分析 J 中国卫生检验杂志，2 0 0 7 ，1 7 ( 1 I ) ： 1 9 6 5 一1 9 6 7 7 罗兴建，肖邦忠，张静秋，等重庆市2 0 0 2 年霍乱流行特 征分析 J 热带医学杂志，2 0 0 6 ，6 ( 5 ) ：5 8 2 5 8 4 ( 收稿日期：2 0 0 8 0 3 1 2 ；修回日期：2 0 0 8 0 5 2 8 ) 万方数据