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1、中国 地方病防治杂志 2 0 0 6 年第2 1 卷第2 M C h i n J C t rl . E n d - D i. 丝丝生坐卫匹匹 并 评 价 其 在 细 胞 生 物 学 中 的 作 用 极 其 重 要 5 1 3 . 2 甲 状腺肿瘤与血清超氧化物歧化 酶 甲状腺恶性肿瘤发病率在全身恶性肿瘤中发病率 不高. 约为1 %左右， 但 在头颈恶性肿瘤中期发病率却 居首位。目 前病因 仍不明 确， 多数学者认为与放射线 接触 及地方 性甲状 腺肿等因素有 关。因缺乏早期 诊断 指标， 临床上出现症状多属晚 期， 因 此探讨其发生、 发 展的原因及早期诊断的手段， 一直是研究的热门课题。 国
2、内外报道 Mn S O D在多种恶性肿瘤显示有意义的下 降， 而在良性病变中并不显示有意义的含量变化， 认为 可作为 恶性肿瘤的检测标志。 但文献甚少. 值得进 一步探讨。本研究通过对 3 3例甲状腺恶性肿瘤患者 T - S O D , M n S O D测定， 并与甲 状腺良 性病变患 者及正 常对照比较， 显示甲 状腺良、 恶性肿瘤患者抗氧化能力 均下降， 甲 状腺恶性肿瘤患者与正常人T 一 S O D , M n - S O D相比 有显著性差异， 随分期上升， T 一 S O D , M n S O D 活性降低， 提示甲状腺恶性肿瘤发生可能与超氧化物 损伤有关。M n S O D在甲
3、状腺良、 恶性两组间有显著性 差异( P 0 . 0 5 ) ， 提示早期诊断价值还须进一步 扩大病例研究观察。 参考文献 【 月朱广迎. 放射肿瘤学【 M . 北京 科学技术文献出版社， 2 0 0 1 . 2 O b e r l e y L W, B u e tt n e r G R . R o le o f s u p e ro x id e d is m u ta s e i n c a n c e r ; a r e v ie w . C a n c e r R e s , 1 9 7 9 , 3 9 ( 5 ) : 1 1 4 1 . 3 C h u n g m a n H o J
4、 , Z h e n g S , C o m h a i r S A, e t a l . D iff e ren ti a l e x - p ros s i o n o f m a n g a n e s e s u p e rox id e d i s m u t a s e a n d c a t a h s s e in l u n g c a n c e r J . C a n c e r R e s , 2 0 0 1 , 6 1 ( 2 3 ) :8 5 7 8一 8 5 8 5 . 4 D e l M a e s t e r R E A n a p p ro a c h to
5、 fr e e r a d ic a l s i n m e d i c i n e a n d b io l o g y . Ac t a P h y s io l S c a n d , 1 9 8 0, 4 9 2 ( S u p p l ) : 1 5 3 5 O b e r l e y L W. A n ic a n c e r t h e r a p y b y O v e r e x p re s s i o n o f s u p e r - o x id e d i s m u t me J . A n t io x id R e d o x S i g n a l , 2
6、0 0 1 , 3 ( 3 ) : 4 6 1 - 4 7 2 . 6 M a r k l u n d S L . D i s t r ib u t i o n o f C u Z n s u p e r o x i d e d is m u t a s e a n d M n s u p e xx id e d i s mu t a s e in h u ma n t is s u e s a n d e x tr a c e l lu l a r fl u id s . A r t a P h y s i o l S c a n d , 1 9 8 0 , 4 9 2 ( S u p p
7、l ) : 1 9 . ( 收 稿日 期: 2 0 0 6 - 0 2 - 0 3 ) ( 编辑许卫东) 一种合成 C I T毒素的新方法 惠洋， 王绍萍， 孙树秋 【 摘要】 目 的 黄绿青霉素的合成。 方法 黄暗青霉茵接种于已高压灭菌的大米中混匀， 培养数日后， 将霉变大 米的乙醉提取液， 旋转燕干，溶于苯 ， 浓缩后得到的粗毒素在硅胶柱上层析， 依次用苯、 乙醚、 乙酸乙醋、 丙酮洗脱， 收集乙 酸乙醋部分浓缩,4放 置2 d 后结晶。结果 所得产物经高效液相色谱检测成分单一， 纯度高。 结论 用大米做培养 基产量高， 杂质少; 新的柱层析法易分离， 利结晶。 【 关键词1 黄绿青霉素;
8、 合成; 纯化 中图分类号: R 3 7 9文献标识码: A文章编号: 1 0 0 1 一1 8 8 9 ( 2 0 0 6 ) 0 2一 0 0 8 9一0 3 A n e w me t h o d o f C TT p r o d u c ti o n H U I Y a n g , WA N G S h a o 一 p i n g , S U N S it u 一 q i u ( I n s t it u t e o f K B D, H a r b in Me d i c a l U n i v e rs ity , Ha r b i n 1 5 0 0 8 1 , C h ia a
9、) t A b s t r a c t O b j e c t i v e T h e p ro d u c ti o n o f c i tr e o v i r id i n . Me t h o d s I n n o c u l a t e s t e ri li z e d r ice w i t h P e n ic i ll i u n C h a s e , - V ir i d e a n d m i x t h e m t o g e t h e r . C u l t iv a t e fo r s e v e r a l d a y s t h e n e x t in
10、 c t d te m o l d y ri c e w it h e t h a n o l . T h e e x t r a c t i s d i ss o lv e d w it h b e n - z e n e t h e n c o n c e n tr a te it a t 6 0 C. T h e c rud e t o x i n is a d d e d t o a S il i c a G e l c o l u me . T h e c o l u me i s e lu t e d s e q u e n t i a ll y w i th b e n z e
11、n e 一 e t h y l 一 e t h y l a c e t a te 一 a c e to n e . T h e e t h y l a c e t a te f r a c ti o n i s r e d u c e d i n v o l u m e , a n d t h e t o x i n c ry st a ll i z e d a f t e r 2 d a y s a t 4 Y : . R e s u l t , T h e p r o d u c t i o n i s p ro v e d s in g le a n d p u r e 场I I P L
12、 C . C o n c lu s io n s R i c e a s c u l tu r e c a n g e t h i g h e r y ie l d a n d f e w e r i m p u - r it y ; th e cr e w m e t h o d o f c o l u m n c h ro m a t o g r a p h y is e a s i e r t o s e p a r a te a n d b e n e f i t c r y s t a l li z a t io n . Ke y ir o r d s I C i tr e o v
13、i ri d i n ; P r o d u c t i o n; P u r if ic a t i o n 作老羊 位: 哈尔滨医 科大学大骨节病研究所( 哈尔滨 1 5 0 0 8 1 ) 作 者简介 : 惠 洋( 1 9 7 9一 ) . 女 在读硕 士研 究生 黄绿青霉素( c i tr e o v i r i d in , C f f ) 主 要是黄绿青霉菌 ( P e n i c l h u m C i t r o e 一 V i r l d e ) 产生的具有生物活性的代 中国地方病防治杂志 2 0 0 6 年第2 1 卷第2 期C h i n J C tr l E n d e
14、 m D i e V o l . 2 1 N o . 2 2 0 0 6 谢产物， 业已证明 c r r 是一种具有心脏血管毒性、 神经 毒性、 遗传毒性的真菌毒素D 1 。关于c r r 与人类健康 关系的 研究主 要有2 0 世纪5 0 年代的 黄变米中 毒和与 心脏病型脚气病( c a r d i a c b e r i b e r i ) 关系的研究=。在 克山 病病因 研究过程中， 我国学者依据大量的流行病 学事实， 首次提出C I T 是导致克山 病的可疑病因 3 目 前c r r 毒素的 毒理及致病机制的研 究都受到了毒素 的来源和价格的限制， 本文的目的就是介绍一种实用 的C
15、I T毒素的合成方法. 以供今后研究之需。 1 . 3 . 6 黄绿青霉素的检测H y p e r s i l S iO , 不锈钢柱 ( 4 . 6 x 1 5 0 m m , 5 p ,m ) ; 紫外检测波长为3 8 8 nn; 流动 相为乙酸乙醋:正己烷( 7 : 3 , V / V ) ; 流量为0 . 5 m l/ m i n ; 柱温室温。 材料与方法 2 结果 2 . ， 黄 绿青 霉素色谱图 图1 所示为c r r 标准品色谱图， 为双峰图 谱; 图 2 所示为合成的黄绿青霉素的色谱图， 图 谱显示合成 的毒素峰形和保留时间与标准品一致， 纯度较高。 _ _ _ 一 上 又
16、一 捆撇知知加朋姗撇脚翔绷以侧 1 . 1 仪器 旋转蒸发仪， 净化工作台， 恒温培养箱， 手提式压 力锅， 日 本岛津s p c 一 1 O A v p 液相色 谱仪， U V 一 V I S 检 测器， 浙江大学 智能 信息工程研究所产色谱工 作站。 1 . 2试剂 C I T标准品购自S I G M A公司; 黄暗青霉菌( P e n i - c ill i u m c i t r e o n ig r u m D i e r c k x ) 购自 中科院菌种保藏中 心; 苯、 乙醚、 乙酸乙醋、 正己 烷、 丙酮和乙醇分别购自 哈 尔滨市化工试剂厂、 上海化学试剂厂、 天津市 博迪化
17、工有限公司、 哈尔滨市医药公司化学试剂批发站; 硅 胶、 琼 脂粉分别购自 上海化工生物工程有限公司和北 京奥博星生物技术有限责任公司。 1 . 3 方法 1 . 3 . 1 培养基的 制备称取: N a N 0 3 3 g , K 2 H P 0 3 1 g , K C 1 0 . 5 g , M g S O , 0 . 5 g , F e S 0 , 0 . O l g ， 蔗糖3 0 g ， 琼脂 1 6 g , 溶于1 O O O m l 水， 调整p H值至7 . 。 后， 高压灭菌。 1 . 3 . 2 黄暗青霉菌的培养在无菌操作台内， 将黄 暗 青霉菌( P . c i t re
18、 o n i g r u m D i e r c k x ) 冻干粉制成悬液， 用白金耳沽取菌液接种在培养基上， 于2 5下培养 1 2 d o 菌落起初呈浅黄或黄白色， 后逐渐变深为灰绿 色， 基底呈现黄色。 1 . 3 . 3 黄暗 青霉菌 在粮食中的扩大培养 市售大米 加人4 0 %的水， 高压灭菌后， 将长满黄暗青霉菌的琼 脂， 接种于已高压灭菌的大米中 混匀， 先于2 5 培养 5 d ， 待肉 眼观察粮食发生绿色 霉变后， 再于1 5培养 1 4 d o 1 . 34 黄 绿青霉素 粗毒素的分离和提取 霉变的粮 食用无水乙 醇没过， 浸泡4h ， 纱布滤出提取液， 渣滓 再 于 无
19、水乙 醇中 浸泡过夜， 第2 d 过滤， 与第1 0 d 的滤液 合并 于 旋转蒸发仪内蒸干。将残留物溶于热苯， 6 0 真空浓缩， 即 得到 粗毒素。 1 . 3 . 5 黄绿青霉素的生成 提取的粗毒素用硅胶6 0 ( 9 . S c m , 1 7 c m ) 层析柱提纯: 活化的硅胶用苯浸泡填 柱， 依次 用苯、 乙醚、 乙 酸乙醋、 丙酮洗脱。 收集乙酸乙 酪部分浓缩， 置于40 C 2 d 结晶。 313 石了 ag lQll啥 玲n场 仿17川 巴 i n 间.i， 图 1 C I T标准品色谱图 渊咧洲翻川 色满阳 气 乙n 乙胎 托 冲 卜划 0 价 刽翌骂汁任川曰比F仁 在J
20、日斟 ,7i 7 n , n 图2 合成的黄绿青霉素的色谱图 2 . 2 产量与 纯度 比较三种培养基中黄绿青霉素的产量和纯度结果 ( 见表 1 ) 。 表I 不同培养基中黄绿青霉素含量( m g / k g ) 培养基温度 ( )湿度 c 件 产量纯度 ( %) 玉 米 大 米 面 粉 1 5-2 5 1 5 1 5 加人3 0 %水 加入 4 0 % 水 加人40%水 9 7 . 5 5 2 5 6 . 7 0 7. 8 3 8 0 . 6 5 9 1 . 7 3 7 3 . 5 8 3讨论 本次 合成黄绿青霉毒素采用大米为天然培养基。 根据N a i to 报道， 同 一菌株在相同培养条
21、件下， 其毒素 产量在大米中 最高， 其次是谷物和小麦。实验证明大 米培养基结构较为松散， 使真菌有更大的生长空间， 且 杂质较少， 利于提纯。 本文的合成方法在参考文献 4 方法的基础上进 中 国 地方 病 防 治杂 志 2 0 0 6 年 第2 1 卷 第2 期 C h in 1 C tr l E n d e ar D i s V o l . 2 1 N o . 2 2 0 0 6 行了 改进 。原 方法将粗毒 素在正己烷:丙酮( 、 :v , 1 :1 ) 层析液中展开， 得到六个条带， 收集第五条带即 为C I T 毒素。 该方法层析所得条带不易区分， 收集有 一定难度， 且所得数量受
22、限。本研究采用分步骤洗脱 的 柱层析法， 操作简便， 毒素较为纯净， 产量高。 有研究表明 黄绿青霉毒素对紫外线敏感， 经紫外 线照射2 h 毒素大部分会被破坏; 另外， 黄绿青霉素在 某些化学试剂中存在光化学反应， 可形成异黄绿青霉 素t 5 1 。长 期保存在有机试剂中的C I T 标准品的 色谱图 与本文合成的黄绿 青霉素的色谱图的峰形和 保留 时间 相一致， 怀疑紧靠 C I T双峰前的两个杂峰为 C IT在提 取过程中有少部分结构发生变化形成的产物， 其是否 具有毒性尚有待研究。 参考 文献 R ic h ar d I . C o l e . P e n i c i ll i u m
23、 I T o x in s M . H a n d b o o k o f to x ic f un g a l m e t a b o l it e s , 1 9 8 1 . 8 7 6 . B r i a n M c K in n e y . B e ri b e r i S y n d ro m e J c a r d i o my o p a t h i e s , 3 8 0一3 8 4 o f t h e 杨建伯， 杨秋慧.克山病病因研究 J . 中国地方病学杂 志，2 0 0 2 , 1 9 ( 5 ) ; 3 5 0一 3 5 5 . Y o s h io U e n o .
24、 M y c o t o x i n s , C it r e o v ir i d in f rom P e n i c i ll i u m C i - tr e o 一 v i r id e B io u r g e M . 1 9 7 4 , 2 9 1 一 3 0 0 . 孟昭赫， 张国柱， 宋圃菊， 等. 真菌毒素研究进展 M . 人 民卫生出版社， 1 9 7 9 , 1 ; 4 6 5 . ( 收稿日 期; 2 0 0 5 - 1 2 - 1 0 ) ( 编辑翟俊民) ljz川叫阎 细菌培养在医院感染中的作用 吴迪， ， 卢彬， ， 张玉春2 中图分类号: R 1 1 7文献标
25、识码; A文章编号: 1 0 0 1一 工 8 8 9 ( 2 0 0 6 ) 0 2- 0 0 9 1 - 0 1 医院感染是指患者在医院诊治期间获得的感染， 又称医院 获得性感染。是关系到病人、 医护人员人身安全的大事， 也是 全球性问题。随着科学的发展， 观念的更新， 人们生活水平的 提高， 对医院环境、 设施、 质量的要求越来越高。因此， 如何预 防和控制院内感染， 是当前急待解决的问题。 1 资料与方法 表1 医院改善前后细菌数( c f u / m ) 监测对照表 W 4 科 疗 消毒 前 消毒后 改养前改善后U P值改省前改善 后U P值 区91 6 ， . 1 病房的基本情况
26、旧 楼5 0 年代初建， 设施陈旧， 房间脱皮， 个别房间甚至发 霉。新楼房间标准化、 宾馆化， 并设立了高级病房， 室内整洁干 爽， 环境优雅， 空气良好。 12 样品采集 环境改善后 对门诊病房每日紫外线灯照射2 次， 每次3 0 m i n ， 每周用过氧乙酸熏蒸2 次， 每次3 0 m i n 。采用普通琼脂培 养基、 平板沉降法， 在房间的空气中 暴露1 0 m in , 然后置3 7 C培 养箱4 8 h ， 观察结果， 计算出 每立方米细菌数。 妇科 疗区 计生 门诊 妇科 门诊 婴儿室 分 娩室 供 应室 1 3 . 0 9 0 . 0 1 8 . 8 1 0 . 01 9 .
27、 1 5 0 . 0 1 1 5. 2 1 0 . 0 1 6 . 归0 . 0 1 7 . 7 1 0 . 0 1 8 . 7 4 0 . 0 1 6 . 4 4 2 . 1 0 4 . 7 2 6 . 7 2 8 . 0 7 4. 8 7 4. 51 0 . 01 0 . 0 5 0. 0 1 0. 0 1 0. 01 0 . 0 1 ,0 . 0 1 158眼1551553950107 295202250298150112184 435320340312195201324 585624825362388588 注: (P 。0 1 有显著差异。 ) 2结 果 环境改善前后在同等条件下监测
28、病房、 门诊等细菌数， 结 果差异显著 见表 1 3讨 论 空气是一种重要的疾病传播媒介、 目前世界上有4 0多种 主 要传染病. 经空气传播的就有 1 4 种。美国疾病控制中心一 作者单位 t . 吉林省吉林市妇产医院( 吉林1 3 2 0 0 1 ) 浮 . 公主岭市 杨 大城子 镇医院 项调查表明， 空气中 游离细菌数在8 。 。 一 2 0 0 0 dl . 时就有发 生疾病的危险， 所以空气细菌学监测， 是我国多年来进行院内 感染监控的主要措施之一。根据世界卫生组织推荐评价医院 各类用途房间的空气细菌数的量， 我国 卫生部做出 相应的 标准 量，手术室、 产房、 婴儿室、 供应室的无
29、菌区， 细菌数 2 0 0 c fu / 耐， 治疗室、 急救室、 化验室及各类普通病房等， 细菌数 5 0 0 c f . / 扩。 在环境改善前经消毒后基本达标， 改善后每日 消毒前 就基本达标， 控制了院内感染。 要搞好病房的床单、 被褥、 床头柜、 门把手、 处置台等卫生 定期对消毒液进行浓度监侧 o医护人员的手每天都接触产妇 和婴儿， 因此要重视手卫生， 清洁后要用流水反复冲洗并用定 期消毒的毛巾擦手， 杜绝用白大衣擦手以免造成二次污染。空 气消毒效果在环境监测中合 格率较低， 因 此注意紫外线灯管的 灰尘， 紫外线灯使用时间， 认真做好登 记。 ( 收稿日 期: 2 0 0 6 - 0 2 一 1 8 ) ( 编辑张爱君)