三年高考2017-2019高考生物真题分项汇编专题14生物技术实践含解析2.pdf

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1、专题 14 生物技术实践专题 14 生物技术实践 1 （2019北京卷3）（2019北京卷3） 筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。 接种培养后， 若细菌能分解淀粉， 培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图），实验结果见下表。 菌种 菌落直径：C（mm）透明圈直径：H（mm）H/C 细菌5.111.22.2 细菌8.113.01.6 有关本实验的叙述，错误的是 A培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质 B筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布 C以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外 DH/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异 【答案】C 【解析】 【分析】该选择培养

2、基上的唯一碳源是淀粉，只有能利用淀粉的微生物才能存活，微生物分解淀粉后， 会产生透明圈。 【详解】培养基一般含有碳源、氮源、水、无机盐和生长因子等成分，A 正确；筛选淀粉分解菌时，需 要对菌液进行一系列的梯度稀释，再将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基上进行培养，B 正确； 由题意可知，两种菌均会产生透明圈，说明两种菌均可以产生淀粉酶并分泌到细胞外分解淀粉，C 错误 ； H/C 越大，说明该淀粉分解菌分解淀粉的能力越强，D 正确。因此，本题答案选 C。 2（2019江苏卷9）（2019江苏卷9）下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是 A利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵 B家

3、庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵 C果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反 D毛霉主要通过产生脂肪酶、蛋白酶和纤维素酶参与腐乳发酵 【答案】B 【解析】 【分析】 制作果酒的酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型，制作酸奶的乳酸菌属于厌氧菌，只能在无氧条件下繁 殖，制作果醋的醋酸菌的代谢类型是异养需养型；腐乳是用豆腐发酵制成，多种微生物参与发酵，其中 起主要作用的是毛霉。毛霉是一种丝状真菌具发达的白色菌丝。毛霉等微生物产生的以蛋白酶为主各种 酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。 【详解】乳酸菌是一种严格的厌氧菌，有氧气存在时，其发

4、酵会受到抑制，因此利用乳酸菌制作酸奶的 过程中，应一致处于密闭状态，否则会导致发酵失败，A 错误；家庭制作果酒、果醋与腐乳过程中所用 的菌种均来源于自然环境， 有多种微生物参与发酵过程， 因此均不是纯种发酵， B 正确 ； 果醋制作过程中， 醋酸菌有氧呼吸产生二氧化碳和水，二氧化碳溶于水形成碳酸，随着二氧化碳浓度的增加，溶液的 pH 逐渐降低；果酒制作过程中，酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳与酒精，二氧化碳溶于水形成碳酸，随着二 氧化碳浓度的增加，溶液的 pH 逐渐降低，因此果酒、果醋制作过程中溶液的 pH 都是逐渐降低，C 错误 ； 毛霉主要通过产生脂肪酶、蛋白酶参与腐乳发酵，D 错误。 3（20

5、19江苏卷10）（2019江苏卷10）下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述，错误的是 A用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量相近 BDNA析出过程中，搅拌操作要轻柔以防DNA断裂 C预冷的乙醇可用来进一步纯化粗提的DNA D用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行水浴加热 【答案】A 【解析】 【分析】DNA 粗提取选材的标准：DNA 含量高，并且材料易得由于哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞 核和细胞器，因此不采用哺乳动物的血液。 DNA 粗提取和鉴定的原理： 1、DNA 的溶解性：DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度 NaCl 溶液中溶解度 不同（DNA 在 0.14 mol/L 的氯化钠中溶解度最

6、低） ；DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒 精。 2、DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。3、DNA 的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA 遇二苯胺会被染成 蓝色。 【详解】兔属于哺乳动物，其红细胞没有细胞核及各种细胞器，提取不到 DNA，而鸡属于鸟类，其红细 胞内含有细胞核与各种细胞器，DNA 含量较多，A 错误；DNA 分子从细胞中被释放出来且除去蛋白后是非 常容易断裂的,如果太过剧烈的搅拌， DNA 链可能会被破环， 因此轻柔搅拌的目的是为了获得较完整的 DNA 分子，B 正确；在冷的 95%酒精溶液中 DNA 的溶解度最低，DNA 的沉淀量最大。如果用热的 95%酒精会

7、提 高 DNA 的溶解度,不能完全使 DNA 沉淀，C 正确；将析出的 DNA 溶解在 2 mol/L 的 NaCl 溶液中，加入二 苯胺试剂后需要水浴加热才会呈现蓝色，D 正确。 4（2019江苏卷13）（2019江苏卷13）下列关于加酶洗涤剂的叙述，错误的是 A加酶洗衣粉中一般都含有酸性脂肪酶 B用加酶洗涤剂能减少洗涤时间并节约用水 C含纤维素酶洗涤剂可以洗涤印花棉织物 D加酶洗衣粉中的蛋白酶是相对耐高温的 【答案】A 【解析】 【分析】 加酶洗衣粉指含有酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶。 其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。 【

8、详解】加酶洗衣粉中应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶，A 错误；加酶洗衣粉含 酶制剂，酶具有高效性，故可以节约洗涤时间，B 正确；棉织物的主要成分是纤维素，纤维素酶可以使 织物更蓬松，有利于洗去污渍，C 正确；科学家通过基因工程生产出了耐酸、耐碱、忍受表面活性剂和 较高温度的酶，制作加酶洗衣粉，D 正确。故选 A。 5（2019江苏卷19）（2019江苏卷19）下列关于产纤维素酶菌分离及运用的叙述，不合理的是 A筛选培养基中应含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养 B可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌 C在分离平板上长出的菌落需进一步确定其产纤维素酶的能力 D用产纤维素酶菌发

9、酵处理农作物秸秆可提高其饲用价值 【答案】A 【解析】 【分析】 纤维素酶是一种复合酶，包括 C1 酶、Cx 酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种 酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 【详解】应该用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌，只有纤维素分解菌能够存活，A 错误 ； 木材、秸秆中富含纤维素，故可以从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌，B 正确；用以纤维素 为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌后，为了确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素 酶的实验， C 正确 ； 用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆， 可以把纤维素分解成葡萄糖， 提高饲用价值， D 正确。故选

10、A。 6（2019江苏卷20）（2019江苏卷20）为探究矮牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力，某研究小组的实验过程如下图。 下列叙述正确的是 A过程获得的原生质体需悬浮在30%蔗糖溶液中 B过程需提高生长素的比例以促进芽的分化 C过程需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生 D原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性 【答案】D 【解析】 【分析】 由图可知，用纤维素酶和果胶酶处理得到原生质体的过程；再分化。 【详解】原生质体在 30%的蔗糖溶液中会失水皱缩，A 错误；诱导芽分化时，需要提高细胞分裂素的 比例，B 错误；可以表示诱导根的分化形成幼苗，此时细胞壁已经形成，C 错误；原生质体无细胞壁， 但

11、由于含有一整套的遗传物质，故具有全能性，D 正确。故选 D。 【点睛】植物组织培养时植物激素处理的不同处理：生长素与细胞分裂素比例适中时，有利于愈伤组织 的形成；生长素/细胞分裂素比例升高，利于根的分化；生长素/细胞分裂素比例降低，利于芽的分化。 7 （2018 北京卷4）（2018 北京卷4）以下高中生物学实验中，操作不正确的是 A在制作果酒的实验中，将葡萄汁液装满整个发酵装置 B鉴定 DNA 时，将粗提产物与二苯胺混合后进行沸水浴 C用苏丹染液染色，观察花生子叶细胞中的脂肪滴（颗粒） D用龙胆紫染液染色，观察洋葱根尖分生区细胞中的染色体 【答案】A 【解析】在制作果酒的实验中，葡萄汁液不能

12、装满发酵装置，要留出 1/3 的空间，A 错误；在 DNA 鉴定 实验中，DNA 遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色，B 正确；用苏丹染液可以把花生子叶细胞中的脂肪颗粒 染成橘黄色，C 正确；用龙胆紫染液能将细胞中的染色体染成深紫色，在洋葱根尖分生区细胞中能清晰 地观察到，D 正确。 8 （2018 江苏卷8）（2018 江苏卷8）花药离体培养是重要的育种手段。下图是某二倍体植物花药育种过程的示意图，下列 叙述正确的是 A为了防止微生物污染，过程所用的花药需在 70%乙醇中浸泡 30min B过程的培养基中需添加较高浓度的细胞分裂素以利于根的分化 C过程逐步分化的植株中可筛选获得纯合的二倍体 D过程

13、应将炼苗后的植株移栽到含有蔗糖和多种植物激素的基质上 【答案】C 【解析】 植物组织培养过程应该在无菌的条件下进行， 因此过程所用的花药需在 70%乙醇中浸泡 10min， 以防止杂菌污染，A 错误；过程的培养基中需添加比值适中的细胞分裂素和生长素，以利于形成愈伤 组织， B 错误 ； 过程得到的植株是经过花药离体培养和秋水仙素处理的， 因此可筛选获得纯合的二倍体， C 正确；过程获得的植株可以进行光合作用了，因此培养基中不需要加入蔗糖，D 错误。 9 （2018 江苏卷14）（2018 江苏卷14）下列关于酵母细胞固定化实验的叙述，正确的是 A用温水使海藻酸钠迅速溶解，待其冷却到室温后用于包

14、埋细胞 B进行包埋时，用于悬浮细胞的 CaCl2溶液浓度要适宜 C注射器（或滴管）出口应尽量贴近液面以保证凝胶珠成为球状 D包埋酵母细胞的凝胶珠为淡黄色半透明状，并具有一定的弹性 【答案】D 【解析】在酵母细胞固定化实验中，应该用小火、间断加热的方式使海藻酸钠缓慢溶解，A 错误；将混 合液用注射器缓慢滴加到 CaCl2溶液进行固定化酵母细胞，CaCl2的作用是使海藻酸钠形成凝胶珠，B 错 误；注射器（或滴管）出口应与液面保持适当的距离，以保证凝胶珠成为球状，C 错误；包埋酵母细胞 的凝胶珠为淡黄色半透明状，并具有一定的弹性，D 正确。 10 （2018 江苏卷16）（2018 江苏卷16）某高

15、校采用如图所示的发酵罐进行葡萄酒主发酵过程的研究，下列叙述错误的是 A夏季生产果酒时，常需对罐体进行降温处理 B乙醇为挥发性物质，故发酵过程中空气的进气量不宜太大 C正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压 D可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵 【答案】B 【解析】根据以上分析已知，果酒发酵的适宜温度为 18-25，因此夏季生产果酒时，常需对罐体进 行降温处理，A 正确；乙醇是酵母菌无氧呼吸的产物，因此分解过程中不需要通入空气，B 错误；无氧 呼吸产生了二氧化碳，但是没有消耗氧气，因此发酵罐中的气压不会低于大气压，C 正确；葡萄酒发酵 的原料是糖类，因此可以通过监测发酵过程中残

16、余糖的浓度来决定何时终止发酵，D 正确。 11 （2018 江苏卷17）（2018 江苏卷17）关于还原糖、蛋白质和 DNA 的鉴定实验，下列叙述正确的是 A在甘蔗茎的组织样液中加入双缩脲试剂，温水浴后液体由蓝色变成砖红色 B在大豆种子匀浆液中加入斐林试剂，液体由蓝色变成紫色 C提取 DNA 时，在切碎的洋葱中加入适量洗涤剂和食盐，充分研磨，过滤并弃去滤液 D将 DNA 粗提物溶解在 2mol/LNaCl 溶液中，加入二苯胺试剂，沸水浴后液体由无色变成蓝色 【答案】D 【解析】甘蔗茎的组织样液富含蔗糖，而蔗糖属于非还原糖，且不能用斐林试剂检测，A 错误；大豆种 子中富含蛋白质，先后加入双缩脲试

17、剂 A 液和 B 液摇匀后，液体由蓝色变为紫色，B 错误 ； 提取 DNA 时， 在切碎的洋葱中加入适量的洗涤剂和食盐，充分研磨，过滤并弃去滤纸上的粘稠物，留下滤液，C 错误 ； 将 DNA 粗提物溶解在 2mol/LNaCl 溶液中，加入二苯胺试剂并水浴加热，溶液由无色变为蓝色，D 正确。 12 （2018 江苏卷21）（2018 江苏卷21）下列关于加酶洗衣粉的叙述，错误的是 A洗衣粉中添加的酶通常是由微生物发酵生产而来 B洗衣粉中的蛋白酶通常会将添加的其他酶迅速分解 C在 50热水中用加酶洗衣粉洗衣时，其中的酶会迅速失活 D加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，不会影响其中酶的活性 【答案】BC

18、D 【解析】加酶洗衣粉中加入的酶多是微生物发酵产生的,其本质与生物体内的酶无明显差异，A 正确； 洗衣粉中的蛋白酶通常不会将添加的其他酶迅速分解，这是因为加酶洗衣粉中的酶经过了特殊的化学 物质的包裹，使之与其他成分隔离，这些酶在遇水后，包裹层分解，酶才能发挥作用，B 错误；加酶洗 衣粉的 pH 值一般不大于 10，在水温 4560时，能充分发挥洗涤作用，因此在 50热水中用加酶洗 衣粉洗衣时， 其中的酶不会失活， C 错误 ； 加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存， 会导致其中酶的活性降低， D 错误。 13（2017江苏卷10）（2017江苏卷10）下列关于“腐乳的制作”的实验，叙述正确的是 A控制

19、发酵温度的主要目的是腐乳调味 B腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用 C毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉 D成品腐乳表面的粘性物质主要由细菌产生 【答案】B 【解析】温度通过影响酶的活性影响腐乳发酵，控制发酵的温度主要有利于毛霉等微生物的生长和腐 乳发酵，A错误；香辛料和料酒都能抑制微生物的生长，具有防腐作用，B正确；毛霉的主要作用是产 生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分解成小分子化合物，C错误；成品腐乳表面的黏性物质主要是毛 霉产生的，毛霉属于真菌，D错误。 【考点定位】腐乳的制作实验。 【名师点睛】本题主要考查腐乳制作的相关知识，要求学生理解腐乳制作的原理和具体操作过程。 14（2017江

20、苏卷12）（2017江苏卷12）固定化单宁酶应用于茶饮料加工，可消除其中的苦涩味。下列有关叙述正确的是 A在单宁酶纯化时可采用透析法去除杂蛋白 B化学结合法比吸附法对单宁酶活性影响更小 C温度、pH 和重金属离子都可能影响固定化单宁酶活性 D酶的高效性决定固定化单宁酶不会降解茶饮料中的有益成分 【答案】C 【解析】透析法是利用膜的选择透过性去除混合物中的小分子物质，不能去除杂蛋白，A 错误；物理吸 附法比化学结合法对单宁酶活性影响更小，B 错误；温度、pH 和重金属离子都会影响酶活性，C 正确； 酶的专一性决定了单宁酶不会降解茶饮料中的有益成分，D 错误。 【考点定位】固定化酶，酶的特性。 【

21、名师点睛】本题主要考查固定化酶的知识，要求学生理解固定化酶纯化的方法，明确温度、pH 和重 金属盐会影响酶的活性。 15（2017江苏卷17）（2017江苏卷17）为了探究一种新型碱性纤维素酶的去污效能，研究性学习小组进行了相关实验， 结果如下图。由图中实验结果能直接得出的结论是 A碱性纤维素酶对污布类型2的去污力最强 B不同类型洗衣粉影响碱性纤维素酶的去污力 C碱性纤维素酶对污布类型2、3的去污力不同 D加大酶用量可以显著提高洗衣粉的去污力 【答案】C 【解析】 20 U/L的碱性纤维素酶处理对污布类型1， 去污力为60%， 30 U/L的碱性纤维素酶处理污布类型2， 去污力约为80%，则单

22、位碱性纤维素酶对污布类型1去污力最强，A错误；由于污布类型不同，不能探究 不同类型的洗衣粉对碱性蛋白酶的去污力的影响，B错误；对污布类型2、3而言，都是Y型洗衣粉，30% 的酶用量，但去污力不同，说明碱性纤维素酶对污布类型2、3的去污力不同，C正确；该实验没有针对 同一类型的洗衣粉加大酶用量的探究，则不能判断加大酶用量是否提高洗衣粉的去污力，D错误。 【考点定位】碱性纤维素酶，实验分析。 【名师点睛】本题以碱性纤维素酶为背景考查实验分析，要求学生理解实验分析的两个基本原则：对 照原则和单一变量原则。 16（2017江苏卷20）（2017江苏卷20）下列关于“酵母细胞的固定化技术”实验的叙述，正

23、确的是 A活化酵母时，将适量干酵母与蒸馏水混合并搅拌成糊状 B配制CaCl2 溶液时，需要边小火加热边搅拌 C将海藻酸钠溶液滴加到CaCl2 溶液时，凝胶珠成形后应即刻取出 D海藻酸钠溶液浓度过高时凝胶珠呈白色，过低时凝胶珠易呈蝌蚪状 【答案】A 【解析】活化酵母时，将适量干酵母与蒸馏水混合，并搅拌成糊状，A 正确；配制 CaCl2溶液时，不需 进行加热，B 错误；CaCl2溶液使酵母细胞可以形成稳定的结构，固定在凝胶珠中，需要一段时间，时 间不宜过短或过长，C 错误；海藻酸钠溶液浓度过低时凝胶珠呈白色，过高时凝胶珠易呈蝌蚪状，D 错误。 【考点定位】固定化酵母细胞。 【名师点睛】本题主要考查

24、酵母细胞的固定化，要求学生理解酵母细胞固定化的过程以及异常情况。 17（2017江苏卷25）（2017江苏卷25）下图是探究果酒与果醋发酵的装置示意图。下列相关叙述正确的是 A改变通入气体种类，可以研究呼吸作用类型对发酵的影响 B果酒发酵中期通入氮气，酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸 C果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关 D气体入口与气体出口可以交换使用 【答案】ABC 【解析】酵母菌是兼性厌氧菌，可进行有氧呼吸和无氧呼吸，通入氧气后，酵母菌进行有氧呼吸，通 入其他气体，酵母菌进行无氧呼吸，故改变通入气体种类，可以研究呼吸作用类型对发酵的影响，A正 确；果酒发酵中期通入氮气，装置中氧气减少

25、，使酵母菌从有氧呼吸转变为无氧呼吸，B正确；温度影 响酶的活性，则果醋的发酵周期与实验设定的温度有密切关系，C正确；气体入口管通入液面以下，气 体出口管在液面以上，不能交换使用，D错误。 【考点定位】果酒的制作，果醋的制作。 【名师点睛】本题主要考查果酒和果醋的制作，要求学生理解酵母菌属于兼性厌氧菌，既能进行有氧 呼吸，又能进行无氧呼吸。 18（2019 全国卷37）（2019 全国卷37） 已知一种有机物X（仅含有C、H两种元素）不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤 中能高效降解X的细菌（目标菌）。 号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X（5 g/L）。 号培养基：氯化钠（5

26、 g/L），硝酸铵（3 g/L），其他无机盐（适量），X（15 g/L）。 号培养基：氯化钠（5 g/L），硝酸铵（3 g/L），其他无机盐（适量）。X（45 g/L）。 回答下列问题。 （1）在号培养基中，为微生物提供氮源的是_。、号培养基中为微生物提供碳源的有 机物是_。 （2）若将土壤悬浮液接种在号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会_， 其原因是_。 （3） 号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基， 若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数， 接种时，应采用的方法是_。 （4）假设从号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下， 丙酮酸

27、可为该菌的生长提供_和_。 【答案】 （1）牛肉膏、蛋白胨 X （2）下降 不能降解 X 的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解 X 的细菌能够增殖 （3）稀释涂布平板法 （4）能量 合成其他物质的原料 【解析】 【分析】 1、选择培养基的概念：在微生物学中，将允许特定微生物种类生长，同时抑制或阻止其他种类微生物 生长的培养基，称为选择培养基，选择培养基必须是固体培养基，本题中选择培养基中的唯一碳源是 有机物 X，这样能分解 X 的微生物能够从该有机物获得碳源，其他微生物由于无法获得碳源而不能 生存。 2、常用的接种微生物的方法有稀释涂布平板法和平板划线法，稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的 梯度

28、稀释，然后将不同稀释度的菌液涂布到固体琼脂培养基上，进行培养，在稀释度足够高的菌液里， 将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，获得由单个细胞繁殖而来的菌落，微生物的计数通常采用 稀释涂布平板法。 【详解】 （1）氮源是微生物生长需要的一类营养物质，是含氮化合物，可为微生物的生长提供氮元素， 牛肉膏、蛋白胨来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质，因此在 1 号培养基中，可为 微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白胨。碳源也是微生物生长所需要的一类营养物质，可为微生物的生 长提供碳元素，而有机物均含碳元素，II、III 号培养基均含有有机物 X，因此，II、III 号培养基为 微生物的生长提供碳源

29、的均为有机物 X。 （2）由于 II 号培养基含有的碳源只有有机物 X，因此若将土壤悬浮液接种在 II 号液体培养基中，培 养一段时间后，不能降解 X 的细菌由于无法获得碳源而无法增殖导致其比例减少。 （3）微生物的接种方法很多，最常用的有平板划线法与稀释涂布平板法，由于稀释涂布平板法中，稀 释度足够高的菌液经涂布培养后，在培养基表面形成的一个菌落是由菌液中的一个活菌繁殖而来，所 以常用来进行微生物的计数。 （4）丙酮酸参与有氧呼吸的第二阶段，能被分解产生能量，且丙酮酸可作为许多物质合成的中间产物， 因此其可为微生物的生长提供能量和合成其他物质的原料。 【点睛】选择培养基能选择特定的微生物。微

30、生物的接种方法有多种，其中稀释涂布平板法常用来进 行微生物的计数。微生物的营养物质有水、碳源、氮源、无机盐等。 19（2019 全国卷 II37）（2019 全国卷 II37）物质 W 是一种含氮有机物，会污染土壤。W 在培养基中达到一定量时培养基表 现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解 W 的细菌（目标菌） 。回答下列问题。 （1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是_。 （2） 在从土壤中分离目标菌的过程中， 发现培养基上甲、 乙两种细菌都能生长并形成菌落 （如图所示） 。 如果要得到目标菌，应该选择_菌落进一步纯化，选择的依据是_。 （3）土壤中的某些微生物可以利用

31、空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利 用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即_。 （4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E） 。为了比较酶E 与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。 在含有一定浓度W的固体培养基上， A处滴加酶E的缓冲液， B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液， C处滴加_，三处滴加量相同。 一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明_；若A、B处形成的 透明圈直径大小相近，说明_。 【答案】 （1）W （2）乙 乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解 W

32、（3）将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为 氮源 （4）缓冲液 缓冲液不能降解 W 酶 E 与天然酶降解 W 的能力相近 【解析】 【分析】筛选培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或对某些化学、物理因素的抗性而设计的， 能选择性地区分这种微生物的培养基。利用选择培养基，可使混合菌群中的目标菌种变成优势种群， 从而提高该种微生物的筛选效率。 【详解】 （1）该研究小组的目标菌是能够降解物质 W 的细菌，而物质 W 是一种含氮有机物，故可作筛 选培养基中的氮源。 （2）研究小组的目标菌，是能够降解物质 W 的细菌，培养基中乙菌落的周围出现透明圈，说

33、明乙菌落 能够降解物质 W，故乙菌落为该小组的目标细菌。 （3）目标菌能够利用空气中的氮气作为氮源，故选用的筛选培养基不添加氮源，能够在无氮源的培养 基上生存的细菌便是目的细菌，故实验操作为 ： 将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长， 则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源。 （4） C 处作为空白对照， 要排除作为溶剂的缓冲液对实验可能造成的影响， 故需要在 C 处滴加缓冲液， 且保持滴加量相同；培养基中的透明圈表示物质 W 被降解的情况，若 C 处不出现透明圈，则说明缓 冲液不能降解物质 W；若 A、B 处形成的透明圈直径大小相近，说明物质 W 被降解的程度相近，即酶 E 与天

34、然酶降解物质 W 的能力相近。 【点睛】本题考查筛选培养基的配置和使用，针对不同要求的目标菌种，选择不同物质配制不同筛选 作用的培养基。并且要求学生理解识别目标菌种筛选的现象，判断筛选结果。 20（2019 全国卷 III37）（2019 全国卷 III37）回答下列与细菌培养相关的问题。 （1）在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是_（填“蛋白 胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH， 其原因是_。硝化细菌在没有碳源的培养基上_（填“能够”或“不能”）生长，原 因是_。 （2）用平板培养细菌时一般需要将平板_（填“倒置”或“正

35、置”）。 （3）单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分 不同种的微生物，原因是_。 （4）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过_处理，这种处理可以杀死丢弃物中所 有的微生物。 【答案】 （1）蛋白胨 不同细菌生长繁殖所需的最适 pH 不同 能够 硝化细菌可以利用空气中的 CO2作为碳源 （2）倒置 （3）在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征 （4）灭菌 【解析】 【分析】1、微生物培养基的营养构成：各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源 和无机盐；不同培养基还要满足不同微生物对 pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 2

36、、配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项：倒平板的温 度一般 50左右适宜，温度过高会烫手， 过低培养基又会凝固；平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的 水珠落入培养基，造成污染。 【详解】 （1）葡萄糖只能为细菌提供碳源，硝酸钠为细菌提供无机盐，而蛋白胨既可以为细菌碳源， 也可以为细菌提供氮源；由于不同的细菌生长繁殖的最适宜 pH 是不同的，因此制备培养基时要根据所 培养的细菌的不同来调节培养基的 pH；硝化细菌属于化能自养型微生物，其可以利用氨氧化释放的能 量将空气中的二氧化碳固定为有机物，因此硝化细菌可以在无碳培养基中生长。 （2）用平板培养细菌时，一般需要将平

37、板倒置培养，以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 （3）由于每一大类微生物都有其独特的细胞形态，因而其菌落形态特征也各异，因此根据菌落的形态、 大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物。 （4）有些使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境。 【点睛】解答本题的关键是识记微生物培养基的成分、培育条件、培养过程以及注意事项，能够根据 不同微生物的代谢类型判断其所需营养成分的种类，进而结合题干要求分析答题。 21 （2019 浙江 4 月选考32）（2019 浙江 4 月选考32）回答下列（一）小题： （一）回答与果胶和果胶酶有关的问题： （1）通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物

38、，其原因除水果中果胶含量较高外，还因为_。 （2）为了获得高产果胶酶微生物的单菌落，通常对分离或诱变后的微生物悬液进行_。 （3）在某种果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量，其主要原因是果胶酶水解果胶使_。果 汁生产中的残渣果皮等用于果胶生产，通常将其提取液浓缩后再加入_。使之形成絮状物， 然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。 （4）常用固定化果胶酶处理含果胶的污水，其主要优点有_和可连续处理等。在建立和优化固定 化果胶酶处理工艺时，除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外， 还需考虑的主要有_和_。 【答案】 （一） （1）腐烂的水果中含产果胶酶的微生物较多

39、 （2）涂布分离（或划线分离） （3）水果组织软化疏松及细胞受损 95%乙醇 （4）提高果胶酶的稳定性 固定化的方法 固定化所用的介质 【解析】 【分析】 （一）果胶是植物细胞壁的主要成分，果胶起着将植物细胞粘合在一起的作用，去掉果胶，就会使植 物组织变得松散；果胶不溶于乙醇，是鉴别果胶的一种简易方法。 【详解】 （一） （1）腐烂的水果通常细胞壁被分解较多，所以含有能产生果胶酶的微生物较多； （2）获取单菌落的方式有划线分离法和涂布分离法两种，本题中两种方式均可； （3）果胶酶的作用是水解果胶，果胶位于植物细胞壁中，故水解果胶会使得水果组织软化疏松及使细 胞受损；果胶不溶于酒精，故提取回收果

40、胶需要使用 95%乙醇，使果胶形成絮状物回收； （4）固定化的果胶酶在处理含果胶的污水时，可提高果胶酶的稳定性并可连续处理；在建立和优化固 定化果胶酶处理工艺时，除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外， 还需考虑的因素有固定化的方法和固定化所用的介质。 22 （2018 全国卷37）（2018 全国卷37）回答下列与酵母菌有关的问题： （1）分离培养酵母菌通常使用_（填“牛肉膏蛋白胨” “MS”或“麦芽汁琼脂” ）培养基， 该培养基应采用_灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上，培养一段时间后会观察到 菌落，菌落的含义是_。 （2） 酵母菌液体培养时， 若通入氧气，

41、 可促进_（填 “菌体快速增殖” 、 “乙醇产生” 或 “乳 酸产生” ） ； 若进行厌氧培养， 可促进_（填 “菌体快速增殖” 、 “乙醇产生” 或 “乳酸产生” ） 。 （3） 制作面包时， 为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌， 酵母菌引起面包松软的原因是_ _。 【答案】 （1）麦芽汁琼脂 高压蒸汽 由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体 （2）菌体快速增殖 乙醇产生 （3）酵母菌分解葡萄糖会产生 CO2，CO2使面包松软 【解析】 （1）麦芽汁琼脂培养基的碳氮比较高，而且含糖量高，更适合酵母菌；该培养基应采用高压 蒸汽灭菌法灭菌；若将酵母菌划线接种在平板上，培养一段时间后可

42、观察到由一个细胞繁殖而来的肉 眼可见的子细胞群体，这就是菌落。 （2）酵母菌液体培养时，若通入氧气，进行有氧呼吸产生 H2O 和 CO2，释放能量多，细胞增殖快 ； 若进 行无氧培养，进行无氧呼吸，产生酒精和 CO2，释放能量少，增殖慢。 （3）制作面包时，在面粉中添加一定量的酵母菌，因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖，产生二氧化碳， 二氧化碳是气体，遇热膨胀而形成小孔，使得面包松软多孔。 23 （2018 海南卷30）（2018 海南卷30）葡萄酒是葡萄汁经酵母菌发酵而成的。酿制葡萄酒的两个简易装置如图所示。 回答下列问题： （1）试管中的 X 溶液有助于维持甲装置的瓶中气压相对稳定，与乙装置相

43、比，用甲装置酿制葡萄酒的 优点是_（答出两点即可） 。 （2）葡萄汁装入甲装置时，要留有约 1/3 的空间，这种做法的目的是_ （答出两点即可） 。 （3） 某同学若用乙装置进行发酵， 并设置两个不同处理组 （乙 A 和乙 B） ， 乙 A 装置中保留一定量的氧气， 乙 B 装置中没有氧气。在其他条件相同且适宜的情况下，测得一段时间内乙 A 和乙 B 中酒精含量 的变化趋势及乙 A 中氧气含量的变化趋势如曲线图所示。 图中曲线、依次表示_、_、_ 含量的变化趋势。 （4）从细胞呼吸类型看，酵母菌属于_生物；从同化作用的类型看，酵母 菌属于_（填“自养”或“异养” ）生物。 【答案】 （1）不需

44、要开盖放气；避免了因开盖引起的杂菌污染 （2）为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气；防止发酵旺盛时汁液溢出 （3）乙 A 中的氧气 乙 B 中的酒精 乙 A 中的酒精 （4）兼性厌氧 异养 【解析】 （1）试管中的 X 溶液有助于维持甲装置的瓶中气压相对稳定，与乙装置相比，用甲装置酿制 葡萄酒的优点是不需要开盖放气；避免了因开盖引起的杂菌污染。 （2）葡萄汁装入甲装置时，要留有约 1/3 的空间，这种做法的目的是为酵母菌大量繁殖提供适量的氧 气；防止发酵旺盛时汁液溢出。 （3）分析题意可知，图中曲线、依次表示乙 A 中的氧气、乙 B 中的酒精、乙 A 中的酒精含量 的变化趋势。 （4）从细胞呼吸类型

45、看，酵母菌属于兼性厌氧生物；从同化作用的类型看，酵母菌属于异养生物。 24 （2018 全国卷37）（2018 全国卷37）在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列 问题： （1）在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具_（填“可以”或“不可以” ）放入干热灭菌箱中 进行干热灭菌。 （2） 牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法， 与煮沸消毒法相比， 这两种方法的优点是_ _。 （3） 密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒， 其原因是紫外线能_， 在照射前， 适量喷洒_ _，可强化消毒效果。 （4）水厂供应的自来水通常是经过_（填“氯气” “乙醇”或“高锰酸钾”

46、）消毒的。 （5）某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的 原因是_。 【答案】 （1）可以 （2）在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少 （3）破坏 DNA 结构 消毒液 （4）氯气 （5）未将锅内冷空气排尽 【解析】 （1）能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等可以放 入干热灭菌箱中进行干热灭菌。 （2） 煮沸消毒法即在 100 时煮沸 56 min 可以杀死微生物细胞和一部分芽孢 ； 巴氏消毒法即在 7075 时煮 30 min 或在 80 时煮 15 min，可以杀死微生物，并且保证营养物质不被破坏。因此，与

47、煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高温瞬时消毒法的优点是达到消毒目的的同时，营 养物质损失较少。 （3）因紫外线能破坏 DNA 结构，所以密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒。在照射前，适量喷洒 消毒液，可强化消毒效果。 （4）通常乙醇消毒是 75%的酒精，有气味，影响水质，不适宜消毒自来水；高锰酸钾本身有颜色，消 毒后溶液呈紫红色，无法使用；因此水厂供应的自来水通常是经过氯气消毒的。 （5）采用高压蒸汽灭菌时，锅内的水加热煮沸，将其中原有的冷空气彻底排除后才能将锅密闭。如果 未将锅内冷空气排尽，则会出现压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度的现象。 25 （2018 全国卷37）（2018 全国卷37）将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出 液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水