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1、消毒与灭菌的效果监测,检验科 邵春红,医疗机构消毒技术规范,医疗机构消毒技术规范,1.消毒与灭菌的基本原则； 2.清洗与清洁，消毒与灭菌方法； 3.清洁、消毒与灭菌的效果监测。,院感相关标本,压力蒸汽灭菌,空气样本的采集,采样要求 提出选择室内消毒后或医疗活动之间进行空气标本的采样，或怀疑与医院感染暴发有关时采样，使用普通营养琼脂平板采样。（注意：采样前，关闭门、窗，在无人走动的情况下，静止10min后采样。） 采样高度（沉降法） 平板置距地面垂直高度0.8m1.5m处。,空气样本的采集,布点方法 室内面积30，设一条对角线上取3点采样，即中心一点，两端各距离墙1m处各取一点；室内面积30，设
2、东、南、西、北、中5点采样，其中东、南、西、北点距离墙1m。 采样方法 将直径9cm普通营养琼脂平板放置各采样点，将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露5min后盖上平皿盖及时送检。,空气样本的检测与报告,检测培养 将送检平皿置361恒温箱培养48h,计数菌落数，若怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的鉴定。 结果处理 计算所有平板菌落数，按公式换算结果。如临床科室要求培养致病菌， 则挑取可疑菌落进行鉴定。 计算公式：每个房间所有平板菌落总数/采样点/（皿暴露时间） 报告: 沉降法按平均每皿的菌落数报告：cfu/（皿暴露时间） 例如： 2cfu/(5min直径9cm平皿) 。,空气样本的结果判定
3、,.洁净手术部（室）和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数要求应遵循50333,.非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数cfu（直径平皿）。 .儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数 4cfu/(5min直径9cm平皿)。,物体表面标本的采集,采样时间 在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。,物体表面标本的采集,采样方法 用5cmx5cm灭菌规格板放在被
4、检物体表面，用浸有无菌生理盐水的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，被采表面100cm2，取全部表面；被采表面100cm2，取100cm2。剪去手接触部分，将拭子放入装有10ml物表采样液试管中送检。门把手等小型物体则利用棉拭子直接涂抹物体表面采样。采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。,物体表面标本的检测与报告,检测方法：充分震荡采样管后，取洗脱液1.0ml接种平皿，将冷至40-45的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml-20ml，37恒温箱培养48h,计数菌落数，怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。 计算公式：物体表面细
5、菌菌落数总数（cfu/cm2）=平板上菌落数采样液稀释倍数/采样面积。 报告方式：菌落数cfu/ cm2 小型物体表面的结果用cfu/件表示,物体表面标本的结果判定,1.洁净手术部、其他洁净场所，非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等；物体表面细菌菌落总数5cfu/ cm2。 2. 儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应室、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等，物体表面细菌菌落总数10cfu/ cm2,压力蒸汽灭菌效果的监测,标准指示菌株
6、：嗜热脂肪杆菌芽孢 采样方法： 将指示剂放置于标准试验包中，置于压力蒸汽灭菌器内最难灭菌的位置处，执行正常灭菌过程，完毕后将指示剂送检。,压力蒸汽灭菌效果的监测,检测方法：将指示菌片捏碎，放入56培养箱培养48h，观察结果。如指示菌片颜色为紫色，说明无嗜热脂肪杆菌生长；如指示剂颜色为黄色则说明有嗜热脂肪杆菌生长。 报告方式：“检出/未检出嗜热脂肪杆菌”。 结果判定：阳性对照组培养阳性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，试验组培养阳性，则灭菌不合格；同时应进一步鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或是污染所致。,皮肤表面标本的采集,采样时间 按照产品使用说明规定的作用时间，达到消毒
7、效果后及时采样。 采样方法 同物体表面标本，不规则的皮肤可用棉拭子直接涂擦采样。,医护人员手表面标本的采样,采样时间 在接触病人或从事医疗活动前进行采样。,医护人员手表面标本的采样,采样面积及方法 被检人五指并拢，用浸有无菌生理盐水的无菌拭子在 双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次，并随之转动采样棉拭子（一只手涂抹面积30cm2），剪去手接触部位，将拭子放入装有10ml物表采样液的试管中送检。,皮肤表面标本,检测方法 计算公式 同物体表面 报告方式 计算公式：物体表面细菌菌落数总数（cfu/cm2）=平板上菌落数采样液稀释倍数/采样面积。,皮肤表面标本的结果判断,结果判定： 皮肤消毒效果的判定
8、标准遵循WS/T313中外科手消毒卫生标准。 a)卫生手消毒，监测的细菌菌落总数应10cfu/cm2。 b)外科手消毒，监测的细菌菌落总数应5cfu/cm2。,消毒液的送检,采样要求 采集使用中的消毒剂。 采集方法 用无菌注射器抽取1ml被检样液，加入9ml消毒中和液，混匀。,消毒液的培养与报告,培养方法：同物体表面标本 计算公式：消毒液染菌量（CFU/mL）=平均每皿菌落数10稀释倍数 报告方式：菌落数CFU/ mL。 结果判断： 使用中灭菌用消毒液：无菌生长； 使用中皮肤黏膜消毒液染菌量10CFU/mL； 其他使用中消毒液染菌量 100CFU/mL。,清洁用品的采样,采样时间 消毒后、使用
9、前进行采样。 采样方法 布巾、地巾等物品可用无菌的方法剪取1cm3cm，直接投入10ml含相应中和剂的无菌生理盐水中，及时送检。,清洁用品的报告与结果判断,检测方法：将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次，取采样液检测致病菌。 报告方式：检出/未检出细菌或真菌，报告为“检出菌”。 结果判定： 未检出致病菌为消毒合格。,其他标本,内镜样本的采样 用10ml中和液反复冲洗镜后取回收液于试管中送检。 透析液的采样 用灭菌试管无菌操作采集透析液5ml送检。,内镜标本的检测与报告,培养方法：同物体表面标本，若临床要求培养致病菌，则收到标本后，取0.1ml均匀接种于普通琼脂培养基表面，放入35培养箱培养48h，观察结果。检出细菌时，则挑取可疑菌落进行鉴定。 计算公式：内镜细菌菌落总数（cfu/件）=平板上菌落的菌落数10 报告方式：“菌落数cfu/件”。,院感标本送检时间,空气培养标本：周一至周三 其他标本：周三上午,谢 谢,