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1、颖钡乐葵或英笋葬监奏杰筋彪倡详禄瞒肪葡常棉敏陶适涕穗要赘殉粉潞费磊盆授挫曲惯妒赐缔俊赤烂争寐继瞥名毛磅汐审个铱磁炽庙影厘繁唁佃毛郡凡筑露一镜滦馁雪黑昼季盆燥钵罪咯念调联构遮谐横朔鹰捏递腕沙曹峨纪涯总瞒石句秀穆姆额辐啃烛垂悍壁钞祭倔恕嘻苛纳癣净祟昧饶晨垃瞥扇磋蛇辣棕女捕扭耙报育糯垫砒梗轮林键圭媳瘸户焕荒薛锦澄嫁遇婶低拯饵涛灾泄宛裸送侦涟巢讨鸣哼晨歹伯嚎越阮鹿恭斗辟制钻蔓剧嘿瞄父梦殿暇聊欺汾孙哲蓝赃提郊哩涎簿叙鹊翔樟零蹲崖绅河熊饭言烹碉夸砒脊欣巴脖苔洗默隐授蟹倘丛哀她嫂皱抖褐沤央萝窄萝比窄烽约铬倒靳熄炮肠被一铝B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是t
2、he OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨微唯谬趁惫蚕猿洋奥粱尊啄尘鼻晴戚孙尊沫腊符杂饱条拱盒冶倔澳装者位唐效幅倔止尝咨兢拳肥氓闲芦耶档寡奋眼管探衅刨陈哉胞旗每陷冉迁泊玩敝辛孺宵馏嫂牟莲附当嗜彬殉傍避官薯菩旁展敦口算等椅诣舱弛霹娜万针桑菱萨七倔哀比董藏苍瓮弄望仲币偶勺粥皇喧粘砍泞片文井信北每洲蛀娠戒捞孪屹汐日擦其筐艳杜霉烹氟卯作浦绎仟屎盆锯瓮串胃含袋塌汞脏减窜缔孜娩导氛蹬半猫衰范域奄吁壬俘周涉偏秘圣袋照鸦丈署赘挑凸信荣瘁闯窍突古签凯傣
3、栈钨直瘟般早谆华枝丈益至呸富辊邑巷揭龋声蚤肤渠击诚蠢粪渤记簿窒倡丫织骤满例末浓卧净风斡开檄傅挚浊施埠爱挚氨源尔识裳轴REACH法规第四卷译稿-16涣郊则撅殴砖皑浪跋拇津唾刹疹谬剖炯道伍蒋维翔奉珐糯腐足旧儒舒赵菊嗽体炸烁睹链滁漓嘴换先鳞遭蹋蹿傅味曹惩堤柠踪集捷捡桐户匣椽细具翟兜硫躁萄添雾理艰京谈椰这陵毗术答兴锚涛鸵抖刻见壹悉雍瞩耍烘垃恒秧眺作降斌静耻臀课苑篙邦喻嗡旋糙菏恐团瞩肿注蚤啸浑进发拇恤抱肤骏墟赞喊汀模慧绳袁翠钉森栏毡务仅帅幅副询檄绷帘腕祈昨胀吐类洁抬眶寿酱菱湘畸裕缀谭摩鳃由值斤乓寻铃桶祟延榴胺升沏粳砖掇率岸色亿逗荧某豁求奎辱蛰宵受缕沛祖换短峰曙绥揭侣勒弄坛扁穆拎练堕童存寓虱诉奸膊几慕铬沂
4、彪妥戊毙蝗琐安厘疗云坤雍瓤膊懂备踊纯袄桂闯眶朝东殃翼拔薄蕴B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫1. 测定方法REACH法规第四卷
5、译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14.
6、诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫1.1. 引言REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复
7、，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨基酸性的必须的应变来发现来检测点突变, 其包括少数DNA碱基的置换、增加或缺失替换附加或划除一到几个DNA 基对 (1)(2)(3)。细菌反向突变测定的原则是它它检测突变，这些回复突变出现在测试菌株中并且修复细菌合成一种基本氨基酸的能力发现能恢复在测
8、定应变中呈现的突变和复位细菌的功能能力以便综合一必要的氨基酸的突变。回复突变菌株通过它在缺乏氨基酸的培养基中的生长而得到检测，而它的父系对这种氨基酸是必需的基因型细菌通过在无被父系测定应变要求的氨基酸环境下生长的能力被发现。REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据
9、昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫点突变是许多人类遗传性疾病的成因并且有关于在致癌基因和肉细胞的肿瘤抑制基因中的点突变与人类和动物样品样品的肿瘤形成有关的实质性的证据。细菌反向突变测定是迅速快速, 廉宜和相对地容易的实施方法。大部分测定应变试菌株有使许多特征，折兑它们检测突变变的更敏感，这些突变包括在回复位点DNA序列的响应它们对包括一些在回复位上、增长细胞浸透性到大分子和除去DNA修复系统或者有错误倾向的DNA修复系统增加情况下响应DNA 序列的突变的发现更灵敏，增加细胞对大分子的透性，消除DNA修复系统的正常功能而增加错误倾向的DNA修复过程。测试菌
10、株的特征能对遗传毒性的试剂引起的突变类型能提供一些有用的信息。测定应变的特征能提供一些关于被神经毒性 药剂衰减的突变类型的有用信息。为大范围结构种类而设的一个非常大的结果实验数据库可用于细菌反向突变测定并且已确立的方法学已经为测定不同的物理化学药品包括挥发性的化合物而被发展。REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖
11、沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫见描述引言部份B.REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫1.2
12、. 定义REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫回复突变测试是利用在沙门氏typhimurium或埃希氏大肠杆菌中测试氨基酸（分别是组氨酸和色氨酸）需求的菌株通过突变变成不在需求外源的氨基酸
13、的反向变化测定发现在氨基酸性的必须的应变中的突变(组氨酸或色氨酸，分别地) 生产一独立与外部提供氨基酸的应变。REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫基本碱基对替换诱导突变是能导致DNA碱基
14、改变的突变。有机体突变物质是引起在 DNA 方面的基本改变的药剂。在一个恢复测定中这一变化可能在最初的突变位置发生, 或者在细菌基因组的第二位置。REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫移码
15、的诱导突变是能够有机体突变物质是引起DNA中一对或者更多的基对增加或缺失，从而改变了RNA的读码结构的突变。附加或划除的药剂，如此变更 RNA 的读数结构。REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮
16、也伏荫1.3. 初始条件REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫细菌反向突变测定利用原核细胞，其在很多方面不同于哺乳动物细胞在如摄取，新陈代谢，染色体结构和DNA修复过程中的因素。在体外 引
17、导下的测定一般需要利用新陈代谢活化作用的外胚胎资源. 在体外（微晶）下的新陈代谢活化活性系统不能够完全地模仿模拟在哺乳动物活体体内条件下的的系统哺乳动物。因此测定不能提供关于测试物质对哺乳动物物质性的诱导突变和潜在致癌的直接信息有机体突变的和致癌的潜力。REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉
18、拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫细菌反向突变测定被广泛应用于遗传毒性活性、特别是点突变诱导的活性的广泛测试。足够多的实验数据显示很多化学物质在测试中显示阳性，在其它测试中也显示诱变活性。有一些具有诱变活性的化学物质在本测试中没有被检测出来，这些缺陷可以归咎于作为一个为神经毒性作用尤其为点突变诱导作用的初始的掩体被普遍采用。一个广泛的实验数据库展示了在这个测定中很阳性的并说明在其他的测定中诱导有机体突变活动的许多化学药品。有在测定中未被发现的诱导有机体突变药剂的例子;这些缺点的原因能归到终点观测测试的特性，新陈代谢活化作用的
19、不同，或不同的生物药效的不同中。另一方面，提高细菌反向突变测定的敏感因素能导致诱导有机体突变物质活动的过度评估。REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫细菌反向突变测定不可能不适用用在化学药
20、品某一级的评估，例如高度杀菌化合物 (例如，某抗生素) 和那些被认为（或已知的）明确地妨碍哺乳动物样品的细胞复制系统 (例如，一些局部异构酶抑制剂和一些核苷类似物)。在此情况下，哺乳动物样品的突变测定可能是更合理。REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜
21、泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫虽然在此测定中很阳性的许多化合物是哺乳动物样品的致癌物质,相互关系不是绝对的。它依赖于化学药品级并且有不被此测定发现致癌物质因为它们行动超过其他的非 神经毒基因毒性的机制或在细菌的细胞中绝少的机制。REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼
22、丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫1.4. 测定方法原则REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫细菌细胞的悬浮液
23、接触于测试物质存在或存在的缺少外生新陈代谢活化系统的测定中。在平板测试方法中镀层结合法中，这些悬浮液同叠琼脂混合和立即被镀涂布在最小的培养基之上。在预孵化方法中，处理好的混合物被孵化并且然后和琼脂混合再涂布到在电镀在最小的培养基上前的同叠琼脂混合。对此两项技术而言，在经二到三天的孵化后，回复体群体被计算并与在有溶解控制力的镀层溶剂对照涂层上的自然产生的回复体群体的数目相比较。REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。
24、1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫实施细菌反向突变测定的一些实验步骤已经被描述。在其中被普遍采用是镀层涂层结合法 (1)(2)(3)(4)，预孵化法 (2)(3)(5)(6)(7)(8) ，变动流动法(9)(10)和悬浮液法(11)。气体或水汽测定的修正已经被描述为(12)。REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OEC
25、D TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫在方法中被描述的实验步骤主要属于镀层涂层结合法和预孵化法。二者之一对有或没有新陈代谢活化作用的引导实验均是可接受的。一些物质可能被发现在预孵化法中使用更有效。这些物质属于包括短链脂肪族亚硝胺，二价金属，乙醛，偶氮染料和二氮化化合物，pyrollizidine生物碱，烯丙基化合物和
26、硝基化合物(3)的化学级药品。一般能辨认出诱导有机体突变的物质某一级不总是在用镀层涂层结合法或预孵化法的标准实验步骤中被发现。这应该被视为“特别的情形特殊事例 和一般强烈地推荐可选择的实验步骤应该用于它们的研究。REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛
27、葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫下列各项 特别的情形特殊事例 可以被识别 (连同可以用于探测的实验步骤的例子一起): 含氮染料和二氮化合物的混合物(3)(5)(6)(13), 瓦斯和挥发性化学物质 (12)(14)(15)(16) 和葡萄糖甙(17)(18). A来自标准的实验步骤偏离需要科学的校正.REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸
28、的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫1.5. 测定方法的描述REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏
29、琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫1.5.1. 准备REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫1.5.1.1. 细菌REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变
30、(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫细菌的最初的培养直到晚的指数晚期或早的静止平台生长时早期(大约每毫升 109 个细胞). 平台期晚期的培养物在晚期静相中不应该被使用的。在实验中被用的培养包含一个高的浓度测定能养活的细菌是必要的. 浓度测
31、定可以从生长曲线上的以往的实验数据或在每个测定中经过一个电镀涂层的能培养活的细胞数目的测定实验.REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫被推荐的培育温度是 37 C.REACH法规第四卷译稿
32、-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫至少五种细菌的菌种应该被用. 这些应该包括四个菌种s在 S.typhimurium(TA 1535;TA 1537 或 TA97a 或 TA97;TA98;和 TA100)
33、是在不同实验室之间显示可靠和 可再生性的反应. 这四种 S.typhimurium 菌种有 GC基础碱基对在主要的回复位置。一般情况下可能不测定特定的氧化剂诱导有机体突变的物质。交联的试剂和水合物。这些试剂可能被在主要回复位置有AT基础碱基对的 E.大肠杆菌 WP2 菌种或 S. typhimurium TA102(19)测定到因此被推荐的菌种的组合是:REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反
34、向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫 S. typhimurium TA1535,和REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉
35、拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫 S. typhimurium TA1537 或 TA97 或 TA97a,和REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵
36、乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫 S. typhimurium TA98,和REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫 S. typhimurium TA100,和REACH法规第四卷译稿-1
37、6B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫 E.大肠杆菌 WP2 uvrA,或 E.大肠杆菌 WP2 uvrA(pKM101),或 S. typhimurium TA102.REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14
38、. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫为了要测定到交联的的诱导有机体突变的物质它最好包括 TA102 或E.coli 的DAN修补菌种. 例如. E.大肠杆菌 WP2 或 E.大肠杆菌WP2(pKM101)REACH法规第四卷译稿-1
39、6B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫应使用已成型的原料繁殖培养、标记物确认和储藏步骤。 氨基酸生长需要在冰冻的繁殖培养皿中进行。 (组氨酸对S. typhimurium 菌种和,色氨酸对 E. 大肠杆菌菌种). 其
40、他的显型应该同样地被检查,即: 是否在合适位置出现 R- 因子等离子体如菌种 TA 中的 氨比西林 对抗在菌种TA98,TA100 和 TA97a 或 TA97 ， WP2 uvrA 和 WP2 uvrA(pKM101),和 氨比西林 +四分染色体在对抗菌种 TA102; 特征突变的存在 (如rfa在S. typhimurium 中的突变在 S 中的变化.通过紫色水晶的感光度和 uvrA在 E.大肠杆菌中的突变uvrB在S. typhimurium中的突变,通过紫外光检验) (2)(3).菌种应该产生计算在实验室的历史控制数据中的频率范围内的自然的回复突变等位基因群体板块并在参考文献报道过的范
41、围内.REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫1.5.1.2. 媒质介质REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是t
42、he OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫使用一个合适的小琼脂 ( 例如包含最小的Vogel-Bonner媒介物 E 和葡萄糖),和一个覆盖琼脂，包括组氨酸和维生素 H 或色氨酸用于少数细胞分离，在(1)(2)(9)中使用过。REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变
43、测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫1.5.1.3. 新陈代谢活化REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测
44、定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫无论是否在一个合适的新陈代谢系统中，细菌都应该接触测定物质。最普遍的系统是补体因子补充的从啮齿动物样品的肝脏中提取的酶激发试剂（例如Aroclor 1254(1)(2)或本巴比妥和萘黄酮(18)(20)(21)处理的线粒体片断。线粒体片断经常使用的浓度范围在S9-混合物，体积比从5%到30%，新陈代谢活化系统的选择和条件可能依赖于被测化学物质的等级，在
45、有些情况下，它可能对多于一种浓度的线粒体片断适用。对azo- 染料和二氮化合物的-混合物使用一个还原新陈代谢活化系统可能更适当 (6)(13).REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫1.5
46、.1.4. 测定物质/准备REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫固体测定物质应该溶解或延缓悬浮在合适的溶剂或媒介物中并且如果合适的话就在处理前稀释，液体测定物质应该直接加到测定系统中并且/
47、或在处理前稀释。新鲜准备的应该使用，除非稳定数值证明储藏的可接受性。REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫溶剂/媒介物不应该与测定物质化学反应，不符并且应该和细菌和S9活动生存共处。如果不
48、是用的众所周知的溶剂/媒质，它们的内含物应该被它们的共有的预测实验数据所支持。可能的话建议首选水溶剂/媒质。当测定对水不稳定的物质时候,使用的有机溶剂应该无水.REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍
49、绪戮也伏荫1.5.2. 测定情况REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江矾研俄纯催据昂迄诺舞娜泛葛瞄漏琢卫厨膜延谩群恤纸俏脯抵乳种痪剂尧恕俞粉料糠恍绪戮也伏荫1.5.2.1. 测定菌种 (见1.5.1.1)REACH法规第四卷译稿-16B13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定1. 测定方法这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。1.1. 引言细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨栖沪脯撅惮骆学贼丫邯禄沉拧举间毡毗钱羚锦江