产KPC酶肺炎克雷伯菌中ESBL的检测.pdf

《产KPC酶肺炎克雷伯菌中ESBL的检测.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《产KPC酶肺炎克雷伯菌中ESBL的检测.pdf（4页珍藏版）》请在三一文库上搜索。

1、6 2 现代检验医学杂志第2 7 卷第3 期2 0 1 2 年5 月JM o dL a bM e d ，V 0 1 2 7 ，N o 3 ，M a y 2 0 1 2 产K P C 酶肺炎克雷伯菌中E S B L 的检测 严育忠，范惠清，陆燕春 ( 上海市浦东新区南汇中心医院复旦大学附属华山医院南汇分院检验科，上海2 0 1 3 0 0 ) 摘要：目的了解某医院产K P C 酶肺炎克雷伯茵中产E S B L 的情况，并建立一种有效的E S B L 表型检羽方法方法 收集8 2 株产K P C 酶的肺炎克雷伯茵，纸片扩散法进行药物敏感试验；P C R 和D N A 测序鉴定超广谱B I 酰胺酶基

2、因型； 脉冲场凝胶电泳进行同源性分析；C L S I 推荐的E S B L 表型确证试验、利用3 一氨基苯酚硼酸的改良E S B L 表型确证试验和 改良H o d g e 试验进行表型试验。结果含b l a E s B e 的产K P C 茵株对B _ 内酰胺类药物耐药率普遍高于单产K P C 茵株。E s B L 基因检出率为7 9 3 ，基因型以S H V 型和C T X - M 型为主。P F G E 显示菌株间的相似性系数9 4 。改良H o d g e 试 验均为阳性结果。E S B L 表型确证试验检出率低，改良E S B L 表型确证试验的裣出率与P C R 结果相符。结论 大

3、多数产 K P C 菌株含E S B L 基因，因此对B 内酰胺类药物具备了更强的耐药性。利用3 - 氨基苯酚硼酸的改良E S B L 表型确证试验 能有效地检测合并产K P C 菌株中E S B L 的表型。 关键词：肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶；超广谱8 内酰胺酶；表型试验；抑制剂 中图分类号：R 3 7 8 9 9 6 ；R 4 4 6 5 文献标志码：A 文章编号：1 6 7 1 7 4 1 4 ( 2 0 1 2 ) 0 3 0 6 2 0 4 d o i ：1 0 3 9 6 9 J i s s n 1 6 7 1 - 7 4 1 4 2 0 1 2 0 3 0 2 0 E S B LD

4、 e t e c t i o ni nK P C p r o d u c i n gK l e b s i e l l aP n e u m o n i a e Y A N Y u z h o n g ，F A NHu i q i n g ，L UY a n - c h u n ( D e p a r t m e n t0fC l i n i c a lL a b o r a t o r y ，N a n h u iC e n t r a lH o s p i t a l0fP u d o n g N a n h u i B r a n c h ，A f f i l i a t e dH u

5、a s h a nH o s p i t a lo fF u d a nU n i v e r s i t y ，S h a n g h a i2 0 1 3 0 0 ，C h i n a ) A b s t r a c t ：O b j e c t i v eT oi n v e s t i g a t et h ep r e s e n c eo fe x t e n d e d s p e c t r u m 卢- l a c t a m a s e s ( E S B L s ) i nK P C - p r o d u c i n gK l e b s i e l l a p n e

6、 u m o n i a es t r a i n si s o l a t e df r o mc l i n i ci nah o s p i t a l ，a n dt oe s t a b l i s ha ne f f e c t i v em e t h o do na n a l y z i n gE S B Lp h e n o t y p e s M e t h o d s8 2K P C - p r o d u c i n gKl e b s i e l l ap n e u m o n i a ei s o l a t e sw e r ec o l l e c t e

7、d A n t i b i o t i cs u s c e p t i b i l i t yt e s tw a sd e t e r m i n e db y K i r b y B a u e rd i s cd i f f u s i o nm e t h o d P C Ra n dD N As e q u e n c i n gw e r eu s e df o rt h ei d e n t i f i c a t i o no fE S B Lg e n o t y p e s H o m o l o g y w a sa n a l y z e db yP u l s e

8、d - f i e l dg e le l e c t r o p h o r e s i s ( P F G E ) E S B Lc o n f i r m a t o r yt e s t ，m o d i f i e dE S B Lc o n f i r m a t o r yt e s ti n c o r p o r a t i n g3 - a m i n o p h e n y l b o r o n i ca c i da n dM o d i f i e dH o d g et e s tw e r ep e r f o r m e dt od e t e c tp h

9、e n o t y p e s R e s u l t s T h er e s i s t a n tr a t e w a sm o r es e r i o u si nK P C - p r o d u c i n gs t r a i n sh a r b o r i n gE S B Lg e n e st h a nt h a tn o th a r b o r i n g T h ed e t e c t i o nr a t eo fE S B Lg e n e s w a s7 9 3 ，a n dt h em a i ng e n o t y p e sw e r eS

10、H Va n dC T X - M I s o l a t e ss h o w e d 9 4 s i m i l a r i t yi nP F G Ep a t t e r n s T h eM o d i f i e dH o d g et e s t sw e r ea l lp o s i t i v e T h ed e t e c t i o nr a t ew a sh i g h e ri nm o d i f i e dE S B Lc o n f i r m a t o r yt e s t ，a n di tm a t c h e dt ot h e r e s u

11、l t so fP C R C o n c l u s i o nT h ep e r c e n t a g eo fh a r b o r i n gE S B Lg e n e si sh i g hi nK P C - p r o d u c i n gK l e b s i e l l ap n e u m o n i a ei s o l a t e s ，a n di tc o n t r i b u t e st ot h es e r i o u sr e s i s t a n c et op l a c t a m s T h eE S B Lp h e n o t y

12、p ei ns t r a i n sc o p r o d u c i n gK P Cc a nb ee f f e c t i v e l yd e t e c t e db ym o d i f i e dE S B Lc o n f i r m a t o r yt e s ti n c o r p o r a t i n g3 - a m i n o p h e n y l b o r o n i ca c i d 。 K e y w o r d s ：K l e b s i e l l ap n e u m o n i a ec a r b a p e n e m a s e ；

13、e x t e n d e d s p e c t r u mp - l a c t a m a s e ；p h e n o t y p i ct e s t ；i n h i b i t o r 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶( K l e b s i e l l ap n e u E S B L 而导致耐药性的加强 3 q 。因此我们对我 m o r l i a ec a r b a p e n e m a s e ，K P C ) 在本世纪初首先发院收集的8 2 株产K P C 的肺炎克雷伯菌同时产 现于美国分离到的一株肺炎克雷伯菌，目前有向全E S B L 的情况进行了分析。 球及整个肠杆菌

14、科传播的趋势 1 2 | ，对产K P C 细菌1 材料和方法 的研究已成为目前临床感染领域中的热点问题。 1 1 材料 产K P C 菌株可能对包括碳青霉烯类在内的几乎所 1 1 1 实验菌株和质控菌株：产K P C 临床菌 有的8 内酰胺类药物耐药，但是也有研究显示某些株：我院2 0 1 0 年1 月2 0 1 1 年6 月期间临床分离 菌株对头霉素类药物及头孢他啶的水解活性相对的8 2 株经P C R 扩增和D N A 测序确认含K P C - 2 较弱 2 3 。近两年相继有报道发现K P C 与超广谱型酶基因的肺炎克雷伯菌，剔除同一患者分离的重 口内酰胺酶( e x t e n d

15、e d s p e c t r u m 口一l a e t a m a s e ，E S 一复菌株。试验前对8 2 株菌株再次确认含有K P C B L ) 基因位于相同的质粒，产K P C 菌株常合并产基因。选择3 0 株经P C R 扩增和D N A 测序确认 * 基金项目：上海市浦东新区卫生局卫生科技发展专项基金资助( P W 2 0 1 1 A 一2 2 ) 。 作者简介：严育忠( 1 9 7 7 一) ，男，硕士研究生，主管技师，主要从事临床微生物检验及细菌耐药性研究，E - m a i l ：s a y h i 7 7 h o t m a i l c o i n 。 万方数据 现代

16、检验医学杂志第2 7 卷第3 期2 0 1 2 年5 月JM o dL a bM e d ，V 0 1 2 7 ，N o 3 ，M a y Z O l 2 6 3 的单产E S B L 菌株为对照，其中肺炎克雷伯菌1 8 株，大肠埃希菌1 2 株。对照组E S B L 基因型包括 2 1 株C T X - M 型和9 株S H V 型。质控菌株：药 敏质控菌株为大肠埃希菌A T C C2 5 9 2 2 和大肠埃 希菌A T C C3 5 2 1 8 ；E S B L 阳性对照菌株为肺炎克 雷伯菌A T C C7 0 0 6 0 3 。 1 1 2抗菌药物：头孢噻肟( C T X ) ，头孢他

17、啶 ( C A Z ) ，氨曲南( A T M ) ，头孢吡肟( F E P ) ，头孢西 丁( F O X ) ，头孢替坦( C T T ) ，亚胺培南( I M P ) ，美罗 培南( M E M ) ，厄他培南( E T P ) 和头孢噻肟克拉维 酸( C T X C A ) ，头孢他啶克拉维酸( C A Z C A ) 均 为O x o i d 公司商品。 1 1 3 仪器与试剂：V i t e k 2C o m p a c t 自动化系统 鉴定( 法国梅里埃公司) ；T a K a R aP C RT h e r m a l C y c l e rD i c e ( 日本T a K

18、a R a 公司) ；电泳槽，C H E F - M a p p e rX A 型脉冲电泳仪，凝胶成像系统及F i n g e r p r i n t i n gI I 软件和加热仪等( 美国B I O - R A D 公 司) ；溶菌酶、P F G E 琼脂和引物由上海生工生物工 程有限公司合成，蛋白酶K ，X b aI 酶和低溶点琼 脂购自P r o m e g a 公司，P C R 扩增试剂盒购自大连 宝生物工程有限公司。3 一氨基苯酚硼酸( B A ) 为 S i g m a 公司商品。 1 - 2 方法 1 2 1药物敏感性测定：纸片扩散法检测所有菌 株对常用9 种p 内酰胺类药物抗

19、菌药物的敏感性， 分别以大肠埃希菌A T C C2 5 9 2 2 和A T C C3 5 2 1 8 为质控菌株，实验操作与结果判断均按美国临床实 验室标准化协会( c l i n i c a la n dl a b o r a t o r ys t a n d a r d s i n s t i t u t e ，C L S I ) 标准 6 执行。 1 2 2E S B L 和K P C 基因的P C R 扩增试验和 D N A 测序：煮沸法提取细菌D N A 模板，检测E S - B L s 基因，所需的引物序列和P C R 反应条件按参 考文献E 7 7 进行。P C R 扩增产物经

20、1 2g d l 琼脂 糖凝胶电泳，凝胶成像系统观察结果并照相。同时 送上海生工生物工程有限公司，双脱氧链末端终止 法测序，结果经美国国立生物技术信息中心( n a t i o n a lc e n t e rf o rb i o t e c h n 0 1 0 9 yi n f o r m a t i o n ) B L A S T 比对。 1 2 3 脉冲场凝胶电泳( p u l s e d - f i e l dg e le l e c t r o - p h o r e s i s ，P F G E ) ：P F G E 按文献 8 推荐的 P u l s e n e t 操作规程进行

21、，P F G E 图谱参照T e n o v e r 等 9 的肉眼判定标准结合F i n g e r p r i n t i n g 软件 的U P G M A 方法进行分析，并以D i c e 系数计算相 似值：大多数与流行病学相关的带型大小和数量 相近的菌株被认为是同一菌株( 主流型) ，称为A 型；由于突变、插入、缺失或倒置的遗传改变在电 泳带型上与主要表型有3 个或3 个以下差别的菌 株被认为是主要型中的亚型；带型中有4 或4 个 以上不同之处不能用1 次或2 次遗传变化解释的， 被认为是不同的菌株，分别称为B ，C 和D 型等。 同一型的各亚型被认为在基因上有相关性，而不同 型的菌

22、株被认为在流行病学上无相关性。 1 2 4 E S B L 表型确证试验和改良H o d g e 试验： 参照C L S I 中相关方法进行实验操作与结果判断， E S B L 表型确证试验( 下称C L S I 法) 为纸片扩散 法 5 。 1 2 5 改良E S B L 表型确证试验( 下称改良法) ： 纸片制备：B A1 2 0m g 溶解于1 5m l 的二甲亚 砜中，再加1 。5m l 蒸馏水，配成4 0m g m l 溶液。 1 0 弘1 的上述B A 溶液分别滴加于C A Z ，C T X 的单 药和含克拉维酸( C A ) 的复合纸片，制成含抑制剂 的复合纸片C A Z B A

23、 ，C T X B A ，C A Z C A B A ， C T X C A B A 。实验操作与结果判断：同C L S I 法 6 ，含抑制剂的复合纸片干燥3 0m i n 后，在6 0 m i n 内使用。 2 结果 2 1药物敏感性试验8 2 株产K P C 酶肺炎克雷 伯菌以含或不含E S B L 基因分成两组，对9 种p 内 酰胺类药物的耐药率详见表1 。除两组细菌对头 孢噻肟和氨曲南耐药率接近或相等外，含E S B L 基 因组细菌耐药率普遍高于不含E S B L 基因组细菌， 且差异有统计学意义( P O 0 0 1 ) 。 表1吼阳性与飙弱性产I ( I ) C 蔫肺炎克雷伯菌

24、的耐药情况比较 2 2E S B L 和K P C 基因检测及D N A 测序P C R 对8 2 株产K P C 酶的肺炎克雷伯菌进行E S B L 基 因检测，结果6 5 株呈阳性结果。通过D N A 测序 发现，其中2 3 株含S H V 型B 内酰胺基因( 8 株 S H V 一1 1 和1 5 株S H 、厂- 1 2 ) ，4 2 株含C T X M 一1 组 基因( 3 1 株C T X M 一1 5 和1 1 株C T X M 一1 4 ) ，未发 现其他P E R ，V E B ，S F O 和O X A 型等超广谱8 内 酰胺酶基因。共检出含E S B L 基因菌株数为6

25、5 株，检出率7 9 3 。 万方数据 6 4 现代检验医学杂志第2 7 卷第3 期2 0 1 2 年5 月JM o dL a bM e d ，V 0 1 2 7 ，N o 3 ，M a y 2 0 1 2 2 3P F G E 分析随机选择1 0 株( 1 0 8 2 ) 临床产 K P C 菌株进行P F G E 分型显示条带基本一致，为 同一个克隆株( 即A 型) ，相似性系数9 4 。如 图1 显示A 克隆株存在两个亚型，分别为8 株A 1 亚型和2 株A 2 亚型，两者仅相差1 个条带。 耄三j j 三蓉雪邑= 三= 三j j 雪量j - - _ _ - _ 一 萎毳善j I _ 舅

26、_ _ 一_ _ _ - _ 曼I _ _ 。_ ：薯= ：_ _ ? - 1 _ _ ! ：， 鉴墨髅兰曼嚣盖篇嚣 警：= 糟蜮喀盏篮= = = = ! ：_ = = 誊捌譬躅誊 l23456 7891 0 拄：l 8 号西株为A 1 亚型；9 1 0 西株为A 2 亚型 图11 0 株随机选择的临床产K P C 的肺炎克雷伯菌P F G E 图谱分析 2 4 改良H o d g e 试验8 2 株K P C 菌株均显示阳 性结果，图2 中k p n 2 3 是一株代表单产K P C 的肺 炎克雷伯菌，k p n 3 5 是一株代表合并产E S B L 和 K P C 的肺炎克雷伯菌。 2

27、5C L S I 法和改良法对8 2 株产K P C 肺炎克 雷伯荫和3 0 株单产E S B I ，对照菌株分别进行 C L S I 法和改良法。结果在6 5 株合并产E S B L 的 菌株中，大部分菌株在C L S I 法中显示为阴性结果 ( 图3 A ) ，仅有1 1 株菌株出现阳性结果，检出率仅 为1 6 9 ( 1 1 6 5 ) 。而改良法全部为阳性结果( 图 3 B ) ，检出率1 0 0 。在1 7 株单产K P C 菌株和3 0 株单产E S B L 对照菌株的检测中，C L S I 法和改良 法的抑菌圈差值均未达到5m m 的阳性标准，两种 试验均显示相同结果( 图3 中

28、C 和E 为C L S I 法，D 和F 为改良法) 。由表2 可以看出，改良法比C L S I 法具有更高的可靠性，与P C R 结果完全相符。 注：数字代表抑菌圈直径，n 1 I u 代表单位毫米 圈3C L S I 法和改良法 衰2 P C R ，C L S I 法和改良法的结果 3 讨论产K P C 菌株已引起了全世界的关注，对 于此类细菌的感染往往治疗手段局限。同时已有 研究表明产K P C 酶菌株因含E S B L 基因而使耐药 情况更严重，而K P C 和E S B L 基因可能存在于相 同的质粒使传播更加容易 3 。因此对产K P C 酶菌 株含E S B L 基因的检测是感染

29、控制的重要环节。 通过对E S B L 基因进行P C R 扩增，在8 2 株产 K P C 肺炎克雷伯菌中有6 5 株呈阳性结果，含E S B L 基因高达7 9 3 。在进行D N A 测序后，我们 图2 改良H o d g e 试验 发现本地区产K P C 酶菌株主要含S H V 型和 C T X M 型E S B L 基因，这与我国E S B L 基因的主 要分布型别相同。水解头孢类药物是E S B L 的特 性之一，而一些产K P C 菌株对头孢他啶的水解活 性较弱 3 J ，因此E S B L 可明显增强产K P C 菌株对 头孢类药物的耐药性。在本研究中我们对含和不 含b l a

30、 E s B L 产K P C 菌株常见的9 种B 内酰胺类药物 的耐药性进行了比较分析，除对头孢噻肟和氨曲南 耐药性相同外，含b I a 飘产K P C 菌株对其他7 种B 内酰胺类药物的耐药性更强。 P F G E 是以限制性内切酶对染色体D N A 酶 切后所得的基因片段系列为分析依据，具有分型能 力强、分辨率高、重复性好等优点，是进行流行病学 研究判断院内交叉感染的可靠工具。我们通过对 1 0 株随机选择菌株进行P F G E 分析，大致了解了 万方数据 现代检验医学杂志第2 7 卷第3 期2 0 1 2 年5 月JM o dL a b M e d ，V 0 1 2 7 ，N o 3

31、，M a y 2 0 1 2 6 5 本地区产K P C 酶肺炎克雷伯菌的主要流行模式。 i u m J A r c hI n t e r nM e d ，2 0 0 5 ，1 6 5 ( 1 2 ) ：1 4 3 0 1 4 3 5 它们以单一菌株克隆传播为主，且主要型别为A 2 翼r d ? ? nP ，c u z 。? G N a a sT T h 8 。8 3 ? 弛a l t 。 型。同时，我们发现合并产E S B L 和K P C 菌株与 t 。r i a E J 孟c e tI n f e c tD i s ，2 j 0 9 ，9 ( 4 ) ：i 2 8 2 3 6 。 单独产

32、K P C 菌株分属两个亚型。在院内感染控制 E 3 P e t r e l l aS ，Z i e n t a l G e l u sN ，M a y e rC ，e ta 1 G e n e t i c 领域，我们除了要防止输入性的传播，同时更应加 a n ? s ：r ：c t u r a li n s i g ，h t ，si n t ，o t h e d i S s e 掣n a i ：n 。p o 8 n 一 强对于此类菌株感染后的消毒处理和采取有效的 m a 。K P G 2i d 。n t 蕊di n 。二E 。c h 。 d 诅。o l ；s t r a i n 隔离措施来防

33、止院内感染的传播。 a n da n E n t e r o b a c t e r c l o a c a e ? t r a i ni s o 1 a t e df r 。鼍，t h e 在对所事菌株进行E S B L 表型检测中，加入抑罴篡。p ，a ，t 2 i o e n 0 8 t ，i n 5 2 F ( 1 r a o n ) 爿去量篇l m K m 6 A g e 毗8 啪e 制剂后表型确证试验的检测效率明显高于C L S I 4 S a m u e l s e n 面，a 。：ru ，T o f t 。l a n dS ，e ta 1 E m 。卜 推荐的确证试验。3 一氨

34、基苯酚硼酸是一种丝氨酸 g e n c eo fc l o n a l l yr e l a t e dK l e b s i e l l ap n e u m o n i a ei s o 一 型的p 内酰胺酶抑制剂，它并不依赖p 内酰胺环结l a t e 翟0 e q u e n c e t y p e2 5 8 曼。d u d n g ；1 ：5 m i ! 一薷i a - 。 构嘲。因K P C 酶也属于丝氨酸型酶，有研究利用t A e n d 。黜宅芝：罴。a 。s e ，2 i o n o 癸：蜀器裟富e n u 上。 硼酸复合物对K P C 酶表型的检测取得了很好的效 5 E n

35、 d i m i a n iA ，H u j e rA M ，P e r e zF ，e ta 1 C h a r a e t e r i z a 一 果1 0 。我们利用了硼酸的这一特性，结合C L S I 推 ? 1 0 no f ，b l a K P ，C - c 。n t a ，i n i n gK 1 e ? 5 地“口声他 m o m 础1 8 旷 荐的E S B L 表型确证试验进行改良，比较了两种方凑蓑箫；量。兰盅篡芝；l = h t u e t ，i o ，2 n o s o i 9 n ，6 t h 3 e ( 3 E ) a ：s 4 t 2 e r 7 n 一 法在产K

36、 P C 肺炎克雷伯菌中检测E S B L 表型的效4 3 7 率。结果发现C L S I 法对含b l a E S B L S JK P C 菌株表 E 6 C l i n i 。8 1 a n ，dL a b o o S t a n ，d a ，r d 5I 嘣h 8 P 8 。f o m 一 型检出率仅为1 6 9 ( 1 1 6 5 ) ，而改良法E S B L 表 a l n 9 e t h es i n t a f o n = 三= 芷嚣c c e l p i l l i t i 。b 。i l l i t 。y n d t e 岂翟： 型全部呈阳性结果，检出率为1 0 0 。在单

37、产K P C r a t o r yS t a n d a r d sI n s t i t u t eM 1 0 0 一S 1 9 ，W a y n e ，P A ， 苎篓三璺为硼酸翌羔暨，璧的翟掣竺要竺改璺兰 7 胡2 0 付0 9 品，朱德妹，帏信军，等对头孢吡肟敏感疑似产 中抑菌圈比C L S I 法明显增加，但是并没有一株产 。磊严谱i 诺鬣磊酶”I 大I g l 肠4 曩幕吾磊芜蔷福蓄蔷磊芬，子 生假阳性结果。此现象与文献 9 报道结果相似，生物特征 J 中华医学检验杂志，2 0 0 8 ，3 1 ( 1 0 ) ： 可作为K P C 酶表型的答定方法。为了了解加入硼 1 1 2

38、8 1 1 3 3 酸抑制剂后是否会影响单产E S B L 菌株的表型检 t H 。r i s uF t i P 。, Z 。h f 譬篙Y 。e n d X K Y f e 6 , e t 出a l T 。h 。e p m p o w l e i c t h u l 岔r E s a c 一- 测，我们选择了经P C R 确证后的3 0 株单产E S B LB L - s c r e e n i n gt e s tp o s i t i v eb u tc e f e p i m e - s u s c e p t i b l e 菌株进行试验。结果发现，在3 0 株不含K P C 基因

39、J C l i nJL a bM e d ，2 0 0 8 ，3 1 ( 1 0 ) ：1 1 2 8 1 1 3 3 的E S B L 菌株的表型试验中，两种方法均显示阳性 8 3 芝嚣= 1 竺：l 竺篙誉篙善：篓翟：篙：d 。a 。h r d 。一- 结果，说明加了硼酸抑制剂后也并未影响单产E S g e n sb yp u l s e d f i e l dg e le l e c t r o p h o r e s i s ：t r a i n i gm a n u B L 菌株的表型检测。 a i E S - A t l a n t aC e n t e r sf o rD i s

40、 e a s ec o n t r o la n dP r e _ 有研究报道细菌产K P C 前已检测到E S 一 9 嚣蒜：芑A r b 。i tR D ，G 。r i n gR v ，。t 。1 I n t e ，p r e - B L 1 1 1 2 1 ，虽然K P C 可通过质粒水平传播，目前也t i n gc h r o m o s o m a lD N Ar e S t r i c t i o np a t t e m sp r o d u c e d 没有报道b l a 瞒B I 和b l a K P c 在基因突变上有直接的 b yp u l s e d f i e l d

41、g e le l e c t r o p h o r e s i sc r i t e r i a o rb a c t e r i 一 关系，但是不可否认临床产E S B L 细菌感染处置不：1 。，S 2 ：y p i n g J c l i n M i 。r o b i 。1 1 9 9 5 3 3 9 ： 当可能会导致更严重的耐药菌株的出现。因此对 1 0 C r o m p t o nI E ，C u t h b e r tB K ，L o w eG ，e ta 1 p - L a c t a 一 临床细菌产E S B L 的监测非常重要。 m a s ei n h i b i t

42、o r s T h ei n h i b i t i o no fs e r i n e1 3 - l a c t a m a s e s 而在抗生素选择性压力下，临床分离的致病菌 ? 。Y 、5 舞凳 。n ；。8 。i d 8 J B i o c h e m 1 9 8 8 2 5 1 有倾向含多重耐药基因的趋势，这不仅加剧了此类 1 1 T s a k r i sA ，K r i s t o1 ，P o u l o uA ，e ta 1 F i r s to c c u r r e n c e 细菌感染的严重性，同时可能对一些常规的表型检 o f K P C - 2 一p o s s e

43、 s s i n ，gK I e b s i e I r a ，? n e “? 。n 哿ei a 测方法( 如E S B L 表型确证试验) 造成了一定的干 w G r i 。e h e k b 。h 。o n s p i 。i a 。l 。i i ：。：繁筹芹了1 黑t ：；。= 。裟 扰。虽然本研究的选材及标本量存在一定的局限 m o t h e r ，2 0 0 8 ，6 2 ( 6 ) ：1 2 5 7 1 2 6 0 性，但是现有的研究表明利用3 一氨基苯酚硼酸的改 1 2 张幸国，杜小幸，张嵘，等发现一株产K P C - 2 型 良E s B L 确证试验是一种较为有效的表型检测

44、方 碳2 0 青0 6 霉, 2 烯9 ( 9 酶) 肺：8 2 炎4 主要伯菌 J 3 中华检验医学杂志 法。 Z h a n gX G ，D uX X ，Z h a n gR ，e ta 1 P I a s m i d - m e d i a t e d 参考文献： c a r b a p e n e m a s eK P C - 2i nas t r a i no fK l e b s i e l l ap n e u E l i B r 黑，L a n d m a nD , H a ：a g R ，e ta 1 R a p i ds p r e a d o f 妇让刀a 洒儿a b M e d 2 0 0 6 芸裟2 2 4 0 1 2 - 8 2 - 0 2 6 - 0 8 1 1c ! a 登j l e H e S l s 【a ? A 化他“np n e u m o m n e m 州e w 修回日期：2 0 1 2 0 3 1 8 Yo r kL i t v ：an e wt h r e a tt oO u ra n t t b i o t t ca r m a m e n t a r 万方数据