高中生物血红蛋白的提取和分离选修一.docx

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1、名校名 推荐高二生物教学案姓名班级学号课题血红蛋白的提取和分离预习完成学习目标:本课题通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离,使学生能够体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法,并了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理,为今后学习运用这些技术打下基础。学习重点和难点:学习重点:凝胶色谱法的原理和方法。学习难点:样品的预处理预习内容一凝胶色谱法(1)概念:凝胶色谱法也称作_ ,是根据 _分离蛋白质的有效方法。(2)原理:大多数凝胶是由 _构成的小球体,内部有许多贯穿的通道,当不同的蛋白质通过凝胶时, _ 的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程_ ,移动速度 _ ;而_的蛋白质无法进入凝胶

2、内部的通道,只能在 _移动,路程 _ 。相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。二缓冲溶液(1)作用:在一定范围内,缓冲溶液能抵制_对溶液 _的影响,维持pH 基本不变。(2)配制:通常由 _ 种缓冲剂溶解于水中配制而成,调节缓冲剂的_ 就可以制得_缓冲液。三电泳(1)概念:带电粒子在 _ 的作用下发生 _ 的过程。(2)原理:许多重要的生物大分子,如_、 _ 等都具有 _的基团,在一定 pH 下,这些基团会带上 _或 _。在电场的作用下, 这些带电分子会向着_移动。电泳利用了分离样品中各种分子_以及分子本身的 _ 、_不同, 使带电分子产生不同的 _ ,从而实现样品中各种分子的分离。四蛋白质提

3、取分离一般分为_、 _、 _、 _ 。五实验操作I样品处理血红蛋白由 _ 肽链组成,包括两个_ 和两个 _ 。每条肽链环绕一个_基团,此基团可携带 _或 _。血红蛋白因含有血红素而呈现_ 。(1)红细胞的洗涤目的:去除。方法: _离心, 如 500 rmin1 离心 2 min ,然后用胶头吸管吸出上层透明的_ ,将 下 层 _ 的 红 细 胞 液 体 倒 入 _ , 再 加 入 _ 的 生 理 盐 水 , 缓 慢 搅 拌_,低速短时间离心,如此重复洗涤 _ ,直至上清液中没有_,表明红细胞已洗涤干净。(2) 血红蛋白的释放:将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,加_ 到原血液的体积,再加40的_ ,置

4、于 _ 上充分搅拌 10 min 。(3) 分离血红蛋白溶液:将搅拌好的混合液离心后可观察到试管中溶液分为4 层。第 1层: _ 的甲苯层第 2层: _ 的沉淀层 _ 薄层固体第 3层: _ 的水溶液 _ 透明第 4层:其他杂质的 _色沉淀物将液体用 _ 过滤,除去 _,于 _中静置片刻后, 分出下层的 _液体。(4)透析过程: 取 1 mL 的_溶液装入 _中,将其放入盛有300 mL 的 20 mL L 1 的 _中 (pH = _) ,透析 12 h。原理:透析袋能使自由进出,而将保留在袋内。目的:可以除去,或用于巩固练习1用凝胶色谱法分离蛋白质时,分子量大的蛋白质()A路程较长,移动速

5、度较慢B 路程较长,移动速度较快C路程较短,移动速度较慢D路程较短,移动速度较快2利用凝胶色谱法什么样的蛋白质先洗脱出来()A相对分子质量大的B溶解度高的C相对分子质量小的D所带电荷多的3亚铁血红素基因可携带()A一分子COB一分子NOC 一分子O2 或 CO2D 一分子NO24将经处理破裂后的红细胞混合液以2000 r min 的速度离心10 min 后,离心管中的溶液分为四层,从上到下的顺序依次是()A血红蛋白、甲苯层、脂类物质层、沉淀层B甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂类物质层C脂类物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层D甲苯层、脂类物质层、血红蛋白、沉淀层5凝胶色谱法分离蛋白质的依据是()A对其

6、他分子的亲和力B溶解度C所带电荷多少D相对分子质量的大小6凝胶色谱法中所用的凝胶的化学本质大多是()A糖类化合物B脂质C蛋白质D核酸7洗涤红细胞时,分离所用方法为()A低速成长时问离心B低速短时间离心C高速长时间离心D高速短时间离心8缓冲液的作用是:在一定范围内,抵制外界的影响来维持()基本不变。()A温度B pHC渗透压D氧气浓度9电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷()的电极移动。()1名校名 推荐A相同B 相反C 相对D相向10血液由血浆和各种血细胞组成,其中()的含量最多。()A白细胞B 血小板C红细胞D淋巴细胞11为防止血液凝固,在采血容器中要预先加入抗凝血剂()。()A. NaClB. 甲苯C. 蒸馏水D. 柠檬酸2

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