上海理工大学医疗器械与食品学院-OLYMPUS-IX71倒置相差荧光显微镜使用说明.docx

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1、上海理工大学医疗器械与食品学院 - OLYMPUS- I X7 1 倒置相差荧光显微镜使用说明-作者 : _-日期 : _OLYMPUS IX71倒置相差荧光显微镜使用说明一、明场方式的使用说明1) 打开明场卤素灯控制器( TH4 )电源,“ I ”为打开,“ o”为关闭。TH4电源开关TH4 光强调节旋钮2) 调节 TH4 上的光强调节旋钮,获得合适的光强度。4) 选择合适的物镜并将聚光镜上的调节环至 BF 或空档位置。5) 调节调焦旋钮,获得清楚的明场图像。6)进行拍照时,要将光路切换到目镜和软件里都可看的位置。光路切换旋钮当前位置为完全目镜位置,光 100%到目镜,软件下看不到;若将旋钮

2、逆时针旋转至最下方时,此时目镜下和软件里都可以看到,拍照时要将光路切换到此位置。二、相差方式的使用说明1) 选择合适的物镜和聚光镜中的相差环。聚光镜( 5 孔位)1 号孔位相差环 PHL2 号孔位相差环 PH13 号孔位相差环 PH2在聚光镜右侧旋转调节相差环,白点处的显示数字即代表相对应的相差环已放入光路4X 物镜用 PHL10X、 20X 物镜用 PH140X 物镜用 PH22) 调节调焦旋钮,获得清楚的相差图像。3) 20X 、40X 的物镜上有矫正环,根据不同的培养容器需要调节矫正环,在聚焦到相对最清楚后调节矫正环至图像最清晰。*观察相差时,要使用与相差物镜放大倍数相匹配的相差环板。三

3、、荧光方式的使用说明1) 打开汞灯光源控制器 U-RFL-T 的电源(开关在控制器前面板右下方) “I ”为打开,“ o”为关闭; 2s 后“ BURNER ON”指示灯点亮为绿色,荧光光源完全打开。显示汞灯灯泡已用小时数“BURNER ON”指示灯汞灯光源控制器电源开关注意:汞灯光源不要频繁开关,打开后至少使用半小时以上,关闭后至少等待半小时再打开。2)调节荧光滤色块转盘到合适的位置进行荧光观察。观察之前确保荧光滤色块转盘上的光闸shutter处于打开位置(“ o”为打开,反之为关闭)。光闸 shutte r6 孔位荧光滤色块转盘I 、调节荧光滤色镜转盘时,需要确认荧光滤色镜和标本所需的激发

4、波长一致UW蓝色荧光( DAPI、Hochest等)BWA绿色荧光( AlexFluo488、GFP等)GW红色荧光( TRITC、 DsRed等) 、为了防止标本的淬灭,观察或成像后请及时关闭荧光滤色镜转盘上的荧光光闸(SHUTTER)。四、 DP2-BSW软件使用1)单张实时图像预览及图像采集左侧为软件预览及采集界面,在该界面下可以调节单张采集时的各种参数:实时预览图像采集Movie 模式采集曝光选项,分为手动曝光/ 自动曝光和超级荧光模式曝光区域选择,有0.1%/1%/30%和 Full Image四种灵敏度选择,一般选择ISO200曝光补偿 , 一般选择“ 0”预览分辨率选择,最高可选

5、1360X1024采集分辨率选择,分辨率越高,图像越清晰,相应拍摄时间也略有会增加图像对比度调节2)图像添加标尺及标尺保存I 、拍照前在软件中选择正确的物镜倍率。、在 View 菜单下选择 Scale Bar选项,标尺即会在图片上显示出来。、拍照以后如果想将标尺保存在图片中,则在Image 菜单下选择Burn In Info选项,然后保存图片。3)白平衡和黑平衡、在预览界面下可使用黑白平衡功能,根据标本类型不同,黑白平衡功能之一分别可用(明场观察时白平衡可用,荧光观察时黑平衡功能可用)。黑平衡、点击黑(白)平衡按钮,然后在预览图片上选取合适的背景地方划一块区域,软件会自动完成黑(白)平衡。、执行完黑(白)平衡以后,若要恢复图像原来的色调,可通过点击“acquisition setting ”找到” Camera”然后将其下拉菜单里的 “color ”的 RGB值恢复初始状态即可。-THE END, THERE IS NO TXT FOLLOWING.-

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