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1、第三章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全,细菌的生命活动与环境密切相关.适宜的环境,能促进细菌的生长繁殖.环境不适宜时,可引起细菌的变异或抑制其生长,甚至杀灭细菌.,制作人：蒋小平,微生物无处不在，医疗中如 何创造无菌的条件？,第一节 消毒灭菌,一、概念：,1、 消毒（disinfection）： 2、 灭菌（sterilization）：杀灭物体上所有微生物的方法 3、 防腐（antisepsis）：防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法 ，不一定杀死微生物:,杀死物体上或环境中的病原微 生物,不能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法,第一节 消毒灭菌,一、概念：,4、 无菌（asepsis）：
2、无菌是无活菌的意思，多是灭菌的结果 。 5、 无菌操作：防止细菌进入人体或其它物品的操作技术。,热力灭菌法 辐射灭菌法 物理方法 滤过除菌法 超声波杀菌法 干燥和低温抑菌法等 高效消毒剂-含氯、醛类消毒剂 环氧乙烷 等 化学方法 中效消毒剂-含碘消毒剂 醇类（异丙醇） 低效消毒剂-季铵盐类 氯已定 高锰酸钾,第二节 消毒灭菌的方法,第二节 消毒与灭菌,二、物理消毒灭菌法：,（一）热力消毒灭菌法：,1、干热灭菌法：,焚烧,烧灼,干烤,第二节 消毒与灭菌,二、物理消毒灭菌法：,（一）热力消毒灭菌法：,2、湿热消毒灭菌法：,巴氏消毒法 61.1/62.8 15-30min 71.715-30秒,煮沸
3、法1005分钟,间歇蒸气消毒法1001530分钟过夜（循环3次）,高压蒸汽灭菌法：最有效的灭菌方法，为一密闭容器中，可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。,第二节 消毒与灭菌,高压蒸汽灭菌基本原理： 加热密闭容器中水至沸腾产生蒸汽，排尽原锅内的冷空气后，闭阀升压，使水沸点升高，从而导致菌体蛋白质凝固变性失活。,第二节 消毒与灭菌,高压蒸汽灭菌主要对象： 牛肉膏蛋白胨、营养肉汤等培养基、生理盐水、手术器械及耐高温、湿热的物品。,第二节 消毒与灭菌,同温度下湿热灭菌较干热效果好的原因： （1）湿热中菌体吸水，蛋白质易凝固，因蛋白质含水量增加，所需凝固点降低。 （2）湿热穿透力明显大于干热。 （3）湿热蒸
4、汽有潜热存在，能迅速提高被灭物体的温度，从而增加灭菌效力。,第二节 消毒与灭菌,高压灭菌几点注意事项：,第二节 消毒与灭菌,二、物理消毒灭菌法：,（二）电磁波辐射杀菌法：,紫外线波长在265-266nm杀菌能力最强,它能干扰DNA复制,导致细菌变异或死亡,但穿透力弱,故只能用于房间空气和物品表面的消毒.,1、日光与紫外线：,2、电离辐射 包括和射线，电离射线具有较高的能量，对各种细菌均有致死作用，机制是干扰DNA合成、破坏细胞膜、引起酶系统紊乱等，主要用于一次性医用塑料制品消毒，食品、药品等消毒灭菌，而不破坏其营养。,第二节 消毒与灭菌,3、微波 波长1-1000mm的电磁波，可穿透玻璃、陶瓷
5、和塑料，但不能穿透金属表面。主要用于食品、非金属器械、检验室用品等消毒，原理是极性分子摩擦生热，内外升温达到杀毒灭菌的目的。,第二节 消毒与灭菌,第二节 消毒与灭菌,二、物理消毒灭菌法：,（三）滤过除菌法：,主要用于不耐高温的血清、抗毒素、抗生素、药液的除菌。,第二节 消毒与灭菌,三、化学消毒灭法：,（一）常用化学消毒剂的种类及用途,（二）化学消毒剂的杀菌机制： 1、使菌体蛋白变性或凝固； 2、干扰微生物的酶系统和代谢； 3、损伤细胞膜；,常用消毒剂的种类、浓度、用途及作用机制,常用消毒剂的种类、浓度、用途及作用机制（一）,第三节 消毒灭菌的运用,皮肤、黏膜、空气、饮水、环境、医 疗器械、病人
6、污染物品、病人排泄物与分 泌物的消毒灭菌。（具体自己看书）,影响消毒灭菌效果的因素： 1、消毒剂的性质、浓度和作用时间 2、细菌的种类与生活状态（P44） 3、温度 4、酸碱度 5、有机物,第四节 影响消毒灭菌效果的因素,第五节 病原微生物实验室生物安全,一、生物安全（biosafety）即生物技术安全（safety of biotechnology） 指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类健康及生态环境所产生的危害或潜在风险。,在安全的实验室内使用安全的方法从事与病原微生物菌（毒）种、样本有关的教学、检测、诊断、研究等活动，达到保护实验室工作人员和公众健康的目的。 核心是防感染和防扩散！,
7、二、病原微生物的分类 根据传染性和危害程度，病原微生物分为四类： 第一类是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。 第二类是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。,第三类是指能够引起人或动物疾病，但一般情况下对人、动物或环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。 第四类是指在通常情况下不会引起人或动物疾病的微生物。,病原微生物实验室生物安全防护水平（BSL）分级,复习思考题,1.杀灭芽孢最常用和有效的方法是（ ） A 、紫外线照射
8、B、煮沸5min C、巴氏消毒法 D、高压蒸汽灭菌法 2.灭菌方法错误的是（ ） A、手术室空气-紫外线 B、排泄物-漂白粉 C、饮水-氯气 D、含血清培养基-高压蒸汽灭菌,D,D,3.常用于基础培养基灭菌（ ） A、高压蒸汽灭菌法 B、紫外线照射法 C、滤过除菌法 D、巴氏消毒法 4、常用于手术器械的灭菌（ ） A、紫外线照射法 B、高压蒸汽灭菌 C、滤过除菌法 D、巴氏消毒法,A,B,5.关于紫外线，说法错误的是_。(第03章) a.其杀菌作用与波长有关 b.可损坏细菌的DNA构型 c.265-266nm杀菌作用最强 d.其穿透力弱，故对人体无损害 e.紫外线适用空气和物体表面的消毒 6.
9、常用于空气或物体表面的消毒_。(第03章) a.高压蒸气灭菌法 b.紫外线照射法 c.滤过除菌法 d.巴氏消毒法 e.干烤法,d,b,7.将牛奶加热6230分钟的目的是_。 a.使牛奶中的蛋白质变性，易于吸收 b.杀灭牛奶中的所有微生物 c.杀死牛奶中的病原菌 d.使牛奶不含活菌 e.防止或抑制微生物在牛奶中生长和繁殖 8.乙醇消毒剂常用的浓度是： _。 a.100 b.95 c.75d.50e.30,c,c,1、解释热原质、菌群失调、消毒、灭菌、防腐、无菌操作等概念;2、细菌有哪些代谢产物？它们分别有哪些医学意义？3、了解细菌的分布与护理工作有什么关系？4、何种情况下正常菌群可转变为条件致病菌或菌群调？5、请为下列物品或部位选取一种最理想的消毒灭菌方法：手术室 、手术器械、注射器、饮水、受轻微污染的血清、浓痰、碗筷、牛奶、门诊大厅。,