动物生理学-蛙心灌流实验报告.doc

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1、一、实验结果1、正常心搏曲线2、 滴加0.65%NaCl溶液3、 滴加2%CaCl2溶液2滴4、 滴加1%KCl溶液5、 滴加0.01%Adr溶液6、 滴加0.01%Ach溶液二、分析与讨论1、正常心搏曲线从图中可以看出本组牛蛙心跳比较微弱,再结合本组牛蛙心脏外表上有不规则小黑斑这一点,可推断出这只牛蛙可能患有心脏疾病。2、 滴加0.65%NaCl溶液滴加0.65%NaCl溶液后,心跳减弱,这是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时,灌注液中缺乏Ca2+,以致心肌细胞动作电位期内流Ca2+减少,细胞质Ca2+浓度减少,心肌的收缩活动也随之减弱。3、滴加2%CaCl2溶液2滴加入CaCl2后,心

2、跳略微增强。细胞外Ca2在细胞膜上对Na内流有竞争性抑制作用,称为膜屏障作用。Ca2浓度增高时,Na内流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均降低。Ca2浓度增高使Ca2内流增多,心肌收缩能力增强。4、滴加1%KCl溶液滴加1KCl后,曲线的频率逐渐减小,愈来愈疏,幅度也逐渐下降。这是因为当细胞K+浓度增高时,K+与Ca2+有竞争性拮抗作用,K+抑制细胞膜对Ca2+的转运,使进入细胞内Ca2+减少,心肌的兴奋收缩偶联过程减弱,心肌收缩力降低。所以心搏曲线振幅减小。5、滴加0.01%Adr溶液滴加肾上腺素后,蛙心收缩增强,心脏舒张完全,描记的心搏曲线幅度明显增大。其作用机理是,肾

3、上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合,提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性,导致肌浆中Ca2+浓度增高,使心肌收缩增强。另外,肾上腺素还有降低肌钙蛋白与Ca2+亲和力,促使肌钙蛋白对Ca2+的释放速率增加,提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度,刺激Na+与Ca2+交换,使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速,这样,将使心肌舒张速度增快,整个舒张过程明显增强。6、滴加0.01%Ach溶液滴加乙酰胆碱后,蛙心收缩减弱,心率减慢。其机理为:乙酰胆碱与心肌细胞膜M受体结合,直接抑制Ca2+通道,减少Ca2+内流,进而使心肌收缩减弱。 7、加2滴0.01%阿托品和0.01%Ach与只加乙酰胆碱相比,加了阿托品后

4、再加乙酰胆碱的牛蛙心脏跳动无明显变化。因为阿托品能与心肌细胞膜的M胆碱受体结合,妨碍乙酰胆碱与其结合,从而起抗胆碱作用,但由于心脏本身的缘故使每次收缩的时间增加了。且在整个实验过程中,该牛蛙的心脏时不时的会停止跳动,影响实验结果。三、结论 本次实验首先要制备离体蛙心,制备好后,蛙心插管内的液体应随蛙心室的收缩和舒张活动而上下移动。其实质是:在心室收缩时,心室容积减少,室内压升高,将心室内的液体压入插管内,管内液面上升;在心室舒张的时候,心室容积增大,心室内压减少,将插管内液体吸入心室,管内液面下降。但是有时候蛙心插管内液面波动不明显,其主要原因有:(1)插管内尖端出现血凝块。此时应用接有针筒的

5、长吸管将血凝块吸出,并将新鲜的任氏液注入,直至血液颜色变浅;(2)插管尖端不在心室腔内,而是在心房或者脉间结缔组织等地方。解决方法为将插管重新插入心室;(3)插管进入心室腔内过深,以致尖端抵住了心室壁。解决方法为将插管稍稍外提,使插管口正好处于心室腔内,且开口正对着液体喷射方向。 细胞外液高Ca2+,促进Ca2+内流,胞浆Ca2+浓度升高,Ca2+与肌钙蛋白的结合数量增加,心肌收缩力增加,当胞浆Ca2+浓度持续升高时,Ca2+与肌钙蛋白结合后不解离,心肌处于持续收缩状态而形成钙僵;肾上腺素促进Ca2+内流,提高肌浆中Ca2+的浓度,增加心肌收缩力,肾上腺素又可促进Ca2+泵活动,降低肌浆中Ca

6、2+浓度,促进Ca2+与肌钙蛋白的解离,使心肌舒张完全41KCl: 细胞外KK与Ca在细胞膜上有竞争性抑制K抑制细胞膜对Ca转运进入细胞内Ca 心肌的兴奋收缩联过程减弱心肌收缩力K 膜内外k浓度梯度减小静息电位绝对值减小兴奋性K Ca内流受抑制0期去极速度和幅度降低传导性降低52CaCl2: 即180mmol/L(正常:2mmolL)细胞膜外Na与Ca有竞争性抑制细胞外液Ca浓度细胞兴奋时内流Ca心肌收缩力 6 O. 65NaCl : 111mmolL细胞外Ca2期内流Ca胞浆Ca 浓度心肌收缩 7:肾上腺素 正性变化肾上腺素与心肌细胞膜上的1受体结合心肌细胞和肌浆网膜Ca通透性肌浆中Ca浓度

7、增加心肌收缩8:乙酰胆碱 负性变化乙酰胆碱可直接抑制Ca通道Ca内流心肌收缩0期:心室肌细胞兴奋时,膜内电位由静息状态时的-90mV上升到+30mV左右,构成了动作电位的上升支,称为除极过程(0期)。它主要由Na+内流形成。 1期:在复极初期,心室肌细胞内电位由+30mV迅速下降到0mV左右,主要由K+ 外流形成。 2期:1期复极到0mV左右,此时的膜电位下降非常缓慢它主要由Ca2+内流和K+ 外流共同形成。 3期:此期心室肌细胞膜复极速度加快,膜电位由0mV左右快速下降到-90mV,历时约100150ms。主要由K+的外向离子流(Ik1和Ik、Ik也称Ix)形成。 4期:4期是3期复极完毕,膜电位基本上稳定于静息电位水平,心肌细胞已处于静息状态,故又称静息期。Na+、 Ca2+ 、K+的转运主要与Na+-K+泵和Ca2+泵活动有关。关于Ca2+的主动转运形式目前多数学者认为:Ca2+的逆浓度梯度的外运与Na+顺搜索浓度的内流相耦合进行的,形成Na+- Ca2+交换。

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