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1、分子生物学常用溶液配方： 抗生素 储备液浓度 储存温度 工作浓度 工作浓度 (严紧型质粒) (松弛型质粒) 氨苄青霉素 500mg/ml（溶于水） -20 20g/ml 60g/ml 氯霉素 34mg/ml（溶于乙醇） -20 25g/ml 170g/ml 卡那霉素 10mg/ml（溶于水） -20 10g/ml 50g/ml 链霉素 10mg/ml（溶于水） -20 10g/ml 50g/ml 四环素 5mg/ml（溶于水） -20 10g/ml 50g/ml BCIP 0.5g 5-溴-4氯-3-吲哚磷酸二氢钠(BCIP)加到10ml 100%二甲基甲酰胺中, 4保存 NBT 0.5g氯化
2、氮蓝四唑加4ml 70%二甲基甲酰胺中, 保存于4中 0.5mol/L EDTA(pH 8.0) 800ml水中加186.1g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na.H2O), 剧烈搅拌, NaOH调pH 至8.0(约需20g), 定容至1L, 份装高压灭菌备用. 10mg/ml EB (溴化乙锭) 100ml水中加入1g溴化乙锭, 搅拌数小时, 铝箔包裹或转移到棕色瓶中室温保存 IPTG IPTG为异丙基硫代-D半乳糖苷(分子量为238.3D), 8ml蒸馏水溶解2g IPTG后定容至10ml, 用22m滤器过滤除菌, 分装成1ml, -20储存. 10mml/L PMSF(苯甲基磺酰氟) 用
3、异丙醇溶解PNSF成1.74mg/ml(10mml/L)分装成小份储存 PBS(磷酸缓冲盐溶液) 800ml蒸馏水溶8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4、0.24g KH2PO4，HCl调pH至8.0, 加水定容至1L, 高压灭菌20分钟, 室温保存 I液 50mM 葡萄糖(无菌过滤后使用) 25mM Tris.Cl(pH8.0) 10mM EDTA(pH8.0) 高压灭菌后存于4。 II液 0.2M NaOH 0.1% SDS 液(乙酸钾溶液) 60 ml 5mol/L乙酸钾溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水 10%SDS (十二烷基硫酸钠) 900ml水中加入1
4、00g电泳级SDS, 加热至68. 加入几滴浓盐酸调pH至7.2, 定容1L, 分装备用 1M Tris 800ml水溶121.1gTris碱, 加入浓HCl调pH至所需值 pH HCl7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml 室温时调pH定容至1L,分装后灭菌 X-gal X-gal 为5-溴-4氯-3-吲哚-D半乳糖苷, 用二甲基酰胺溶解X-gal配制成20mg/ml的储备液. 保存于玻璃管或聚丙烯管中, 铝箔包裹-20保存 溶菌酶 用水配制成50mg/ml,分装成小份, -20保存, 一经使用后便丢弃 蛋白酶K 储存液:20mg/ml(溶于水); 保存: -20; 反应浓度: 5
5、0g/ml; 反应缓冲液:0.01mol/LTris(pH8.0), 5 mmol/L EDTA, 0.5%SDS; 反应温度:37-56 RNA酶 将胰RNA酶(RNA酶A)溶于10mmol/L Tris.Cl(pH7.5)、15mmol/LNaCl中，配成10mg/ml，于100加热15分钟，缓慢冷却至室温，分装成小份，保存于-20。 STE(亦称TEN)0.1mol/L NaCl; 10mmol/L Tris.Cl(pH 8.0); 1mmol/L EDTA(pH 8.0)。 TE pH 7.410mmol/L Tris.Cl(pH 7.4) 1mmol/L EDTA(pH 8.0) p
6、H 7.6 10mmol/L Tris.Cl(pH 7.6) 1mmol/L EDTA(pH 8.0) pH 8.010mmol/L Tris.Cl(pH 8.0) 1mmol/L EDTA(pH 8.0) TNT(WB专用)50mmol/L Tris.Cl(pH 7.5)150mmol/L NaCl0.05% Tween 20 碱性磷酸酶缓冲液100 mmol/L NaCl5mM MgCl2 100 mmol/L Tris.Cl(pH9.5) 2XSDS蛋白凝胶加样缓冲液 100mmol/L Tris.Cl(pH6.8)200mmol/L二硫苏糖醇(DTT)4%SDS(电泳级)0.2%溴酚蓝
7、20% 甘油 Tris-甘氨酸 使用液:1X :25mmol/L Tris 浓储备液(每升):5X: 15.1g Tris碱 250mmol/L甘氨酸 94g甘氨酸(电泳级)(pH8.0) 0.1%SDS 50ml 10%SDS(电泳级) 6X DNA Loading buffer 25%溴酚蓝40%(W/V)蔗糖水溶液 4储存 脱脂奶封闭液 5% 脱脂奶粉 0.02% 叠氮钠 转移缓冲液配制1L 转移缓冲液，需称取2.9g甘氨酸、5.8gTris碱、0.37g SDS, 并加入200ml甲醇，加水至总量为1L。 细胞及细菌裂解缓冲液 50 mmol/LTris.Cl(pH8.0) 1 mmol/L EDTA(pH8.0) 100 mmol/L NaCl 水 丙烯酰胺 Tris.Cl 10%SDS 10%过硫酸铵 TEMED 10ml 12%分离胶 3.3ml 4ml 2.5ml(1.5M ,pH8.8) 0.1ml 0.1ml 0.004ml10ml 5% 积层胶 6.8ml 1.7ml 1.25ml(1M,pH6.8) 0.1ml 0.1ml 0.01ml核苷酸序列资料： GenBank -美国(GenBank Submissions) EMBL（欧洲分子生物学实验室核苷酸序列资料库）-德国（Data Submissions）