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1、.截止波长的区别，用甲醇做，紫外波长须设在大于230nm，乙腈则大于210nm即可。甲醇的极性参数是5.1，乙腈的是5.8，水的极性参数是10.2，用一定比例的乙腈和水代替纯甲醇，极性会更强呀给你一个计算公式：C乙腈=0.32*C甲醇*C甲醇+0.57*C甲醇以上公式是为保持相同的保留时间，乙腈、甲醇的比例换算公式，其中C乙腈、C甲醇分别为乙腈/水、甲醇/水的百分比。从上式可以算出，纯甲醇相当于89%的乙腈/水，90%的甲醇/水相当于77%的乙腈/水。对反相色谱来说，70%乙腈/水的极性比90%甲醇/水的极性强，对溶质的洗脱能力减弱，因而保留值增大，出峰晚。但不能只考虑溶剂的强度，还必须同时考
2、虑到对选择性的改变，即“溶剂诱导选择性的变化”，有时极性相近的不同溶剂系统对某一具体样品的分离效果有很大的差异，这个溶剂组成能分离，同样极性的另一组溶剂可能就不能分离。1、首先，乙腈价格高乙腈，特别是HPLC级的价格很高，但是，文献或LC厂家所示的条件，多用乙腈，这是为什么呢？现就此谈谈。2、吸光度。乙腈HPLC级的小。乙腈和甲醇的市销HPLC级和优级的吸收光谱中，乙腈HPLC吸收最小（特别是在短波长上小）。所谓HPLC级是除去具有吸收UV的杂质，在规定的波长上吸光度限制在规格值以内。在UV检测时，产生的噪声小，因此在进行UV短波长上的高灵敏度分析时乙腈HPLC级最适宜。另外，在UV检测中的梯
3、度基线上也是乙腈HPLC级产生鬼峰少，虽然，其他与水相溶性高的有机溶剂有各种各样，但很难能找到比乙腈HPLC级吸收更小的。另外，甲醇的HPLC级和优级，虽然所得的光谱相差不大，但是优级不能保证吸光度，有可能产生偏差，价格也相差不大，所以尽量使用HPLC级。3、压力。乙腈低，柱内承受的压力，根据有机溶剂的种类或混合比率的不同而异，水/乙腈，水/甲醇混合液的比率与输液压力的关系中,甲醇与水混合，压力增高，而乙腈同样与水混合且并不如此。所以，乙腈一方，在同样的流速下不在柱内加上多余的压力。从上述两项，可以确认使用乙腈的意义，那么，甲醇除了价格以外，还有没有其化优点呢?精品.4、洗脱能力。一般而言，乙
4、腈较强。乙腈和甲醇分别用同样的比率与水混合时，一般情况下，乙腈的洗脱能力强。特别是混合比率低时，从咖啡因和苯酚的洗脱来看，获得同样的保留时间，乙腈的比率，只需甲醇的比率的一半以下即可。另一方面，有机溶剂100%或与此极接近时，从胡萝卜素和胆甾醇来看，常常都是甲醇的洗脱能力强。混合比在50比1等较为特殊时，调制的误差大，影响保留时间，或平衡化的时间长，乙腈遇到这种情况时，用甲醇的10比1混合代替乙腈，这样操作方便些。溶剂受温度影响时，不采用容器定量，而采用重量的方法(考虑比重)，可使混合比的误差减小。5、分离(洗脱)的选择性。两者的差异，乙腈和甲醇在分离的选择性上不同。由于有机溶剂分子的化学性质
5、(甲醇和乙醇是质子性，乙腈和四氢呋喃是非质子性)不同所致。因此，在用乙腈类不能获得分离的选择性，就试用甲醇类看看。6、峰形。用时出现差异。像水杨酸化合物(在邻位上具有羧基或甲氧基的苯酚化合物)等，用乙腈类时拖尾大，用甲醇类可抑制。可是，一般情况下，聚合物类反相柱，与硅胶柱相比，更具有峰形宽的倾向，特别是用聚苯乙烯分析柱芳香族化合物等时常见。这在流动相是甲醇时非常显著，而用乙腈时不明显。为此，用聚合物类反相用柱时建议采用后者(乙腈类)，这是因为乙腈使凝胶膨润。7、流动相的脱气，乙腈类要注意。混合溶剂的置制，不说在LC装置内，只谈预先在流动相瓶内进行时，(等浓度系统)。甲醇与水混合时发热，多余的溶解空气较易变为脱出气泡(脱气容易)。而乙腈由于吸热冷却，随着慢慢回到室温，产生气泡，所以要考虑脱气(加温搅拌，过滤膜，He脱气等)。8、结论以上反相色谱法流动相常用的乙腈和甲醇进行了比较。粗略地讲是，使用乙腈HPLC级最好，在选择性，峰形差时试用甲醇HPLC，但根据各种不用性质设计分析条件也是必要的。 如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！精品