分子生物学期末复习试题及答案.docx

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1、分子生物学期末复习试题及答案一、名词解释分子生物学 : 包括对蛋白质与核酸等生物大分子的结构与功能 , 以及从分子水平研究生命活动RNA组学 : RNA组学研究细胞中snmRNAs的种类、结构与功能。同一生物体内不同种类的细胞、 同一细胞在不同时间、不同状态下 snmRNAs的表达具有时间与空间特异性。增色效应 : DNA 变性时其溶液OD260增高的现象。减色效应 : DNA 复性时其溶液OD260降低的现象。Tm:变性就是在一个相当窄的温度范围内完成 , 在这一范围内 , 紫外光吸收值达到最大值的 50%时的温度称为 DNA的解链温度 , 又称融解温度 (melting temperatu

2、re, Tm)。其大小与 G+C含量成正比。解链曲线 : 如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260(absorbance,A,A260 代表溶液在 260nm处的吸光率 ) 值作图 , 所得的曲线称为解链曲线。DNA复性 : 在适当条件下 , 变性 DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象 , 这一现象称为复性。核酸分子杂交 : 在 DNA变性后的复性过程中 , 如果将不同种类的 DNA单链分子或 RNA分子放在同一溶液中 , 只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系 , 在适宜的条件 ( 温度及离子强度 ) 下 , 就可以在不同的分子间形成杂化双链 , 这种现象称为核酸分子杂交。

3、基因 : 广义就是指原核生物、真核生物以及病毒的 DNA与RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列 , 就是遗传的基本单位。狭义指能产生一个特定蛋白质的DNA序列。断裂基因 : 不连续的基因称为断裂基因 , 指基因的编码序列在 DNA上不连续排列而被不编码的序列所隔开。重叠基因 : 核苷酸序列彼此重叠的 2个基因为重叠基因 , 或称嵌套基因。致死基因 : 删除后可导致机体死亡的基因。基因冗余 : 由于一基因在个体中有若干份拷贝 , 当删除其中一个时 , 个体的表型不发生明显变化。DNA重组 : DNA分子内或分子间发生遗传信息的重新组合 , 又称为遗传重组或基因重排。同源重组 : 发生在同源序列间

4、的重组称为同源重组 , 又称基本重组。接合作用 : 当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时 , 质粒 DNA从一个细胞 ( 细菌 ) 转移至另一细胞 ( 细菌 ) 的 DNA 转移称为接合作用 (conjugation) 。转化作用 : 通过自动获取或人为地供给外源 DNA,使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型 , 称为转化作用 (transformation) 。转导作用 : 当病毒从被感染的 ( 供体 ) 细胞释放出来、再次感染另一 ( 供体 ) 细胞时 , 发生在供体细胞与受体细胞之间的 DNA转移及基因重组即为转导作用位点特异重组 : 位点特异重组 (site-specific re

5、combination) 就是由整合酶催化 , 在两个 DNA序列的特异位点间发生的整合。12-23 规则 : 重组发生在间隔为12bp 到 23bp 的不同信号序列之间 , 称为 12-23 规则。转座子 : (transposon)在基因中可以移动的一段DNA序列。转座 : 由插入序列与转座子介导的基因移位或重排称为转座 (transposition)。克隆 : 来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。DNA克隆 : 应用酶学的方法 , 在体外将各种来源的遗传物质 ( 同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA)与载体 DNA接合成一具有自我复制能力的DNA分子复制子 (replic

6、on),继而通过转化或转染宿主细胞, 筛选出含有目的基因的转化子细胞, 再进行扩增提取获得大量同一 DNA分子 , 也称基因克隆或重组DNA (recombinantDNA)。基因工程 : (genetic engineering)实现基因克隆所用的方法及相关的工作称基因工程, 又称重组 DNA工艺学。限制性核酸内切酶 : (restrictionendonuclease, RE)就是识别 DNA的特异序列 , 并在识别位点或其周围切割双链 DNA的一类内切酶。同功异源酶 : 来源不同的限制酶, 但能识别与切割同一位点 , 这些酶称同功异源酶。同尾酶 : 有些限制性内切酶虽然识别序列不完全相同

7、, 但切割 DNA后 , 产生相同的粘性末端 , 称为同尾酶。载体 : 为携带目的基因 , 实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。复制 : (replication)就是指遗传物质的传代, 以母链 DNA为模板合成子链 DNA的过程。半保留复制 : (semi-conservativereplication)DNA生物合成时 , 母链 DNA解开为两股单链 , 各自作为模板(template) 按碱基配对规律 , 合成与模板互补的子链。子代细胞的 DNA,一股单链从亲代完整地接受过来, 另一股单链则完全从新合成。 两个子细胞的 DNA都与亲代 DNA碱基序列一致。这种复制方

8、式称为半保留复制。复制子 : (replicon)DNA分子中能独立进行复制的单位称为复制子。习惯上把两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子。复制眼 : (replicationeye)DAN 正在复制的部分在电镜下观察起来犹如一只眼睛, 称为复制眼。复制叉 : (replication fork)复制一开始 , 复制起始点要形成一个特殊的叉型结构, 就是复制有关的酶与蛋白质组分子生物学期末复习试题及答案装成复合物与新链合成的部位, 这种结构称为复制叉。端粒 : (telomere) 指真核生物染色体线性 DNA分子末端的结构。开放阅读框 : 从 mRNA 5端起始密码子 AUG到3端终止密码

9、子之间的核苷酸序列 , 各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链 , 称为开放阅读框架 (open reading转录 : (transcription)生物体以 DNA为模板合成RNA的frame, ORF) 。过程 。顺反子 : 遗传学将编码一个多肽的遗传单位称为顺反子不对称转录 : (asymmetric transcription)在 DNA分子双(cistron) 。链上某一区段 , 一股链用作模板指引转录, 另一股链不转多顺反子 : 原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单录 ; 模板链并非永远在同一条单链上。位 , 转录生成的 mRNA可编码几种功能相关的蛋白质, 为多模板链

10、:DNA 双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA顺反子 (polycistron)。的一股单链 , 称为模板链 (template strand),也称作有意单顺反子 : 真核 mRNA只编码一种蛋白质 , 为单顺反子义链或 Watson 链。(single cistron)。编码链 : 相对的另一股单链就是编码链(coding strand),翻译的跳跃现象 : 翻译中读码框发生位移或核糖体跳过一也称为反义链或 Crick链。大段 mRNA后 继续翻译称为翻译的跳跃现象。启动子 : RNA聚合酶结合模板DNA的部位称为启动子信号序列 : (signal sequence)所有靶向输送的蛋白

11、质结(promoter)构中存在分选信号, 主要为 N末端特异氨基酸序列, 可引转录泡 : (transcription bubble)在转录延长过程中, 由导蛋白质转移到细胞的适当靶部位, 这一序列称为信号序局部打开的 DNA双链、 RNA聚合酶核心酶及新生成的RNA列 。三者结合在一起的复合体, 为空泡状结构 , 又称转录复合信号肽 : (signal peptide)各种新生分泌蛋白的N 端有保物。守的氨基酸序列称信号肽。转录因子 : 能直接、间接辨认与结合转录上游区段DNA的线粒体定向肽 : 由核基因组编码的线粒体外膜蛋白的N 端蛋白质 , 现已发现数百种 , 统称为反式作用因子具有的

12、一段肽链。 由富含带正电的氨基酸与丝氨酸、苏氨(trans-acting factors)。反式作用因子中 , 直接或间接酸等。结合 RNA聚合酶的 , 则称为转录因子 (transcriptional基因表达 : (gene expression)基因经过转录、翻译, 产生factors, TF) 。具有特异生物学功能的蛋白质分子的过程。转录后加工 (RNA的成熟 ): 在细胞内 , 由 RNA聚合酶合成的操纵子 : (operon)就是原核生物在分子水平上基因表达调原初转录物控的单位 , 由结构基因、启动子、操纵基因与调节基因组(pre-RNA) 经过链的裂解、 5 端与 3 端的切除与特

13、殊结构成 ; 通过调节基因编码的调节蛋白与诱导物、辅阻遏物协的形成、 核苷的修饰与糖苷键的改变、以及拼接与编辑等同作用 , 开启或关闭操纵基因, 对操纵子结构基因的表达过程 , 转变为成熟的 RNA分子的过程称为RNA的成熟或转进行正、负控制。录后加工 (post-transcriptional processing)。转录衰减 : (attenuation)就是指转录可正常起动, 但在转RNA编辑 : 改变 RNA编码序列的方式称为RNA 编辑。录进入第一个结构基因前即突然停止的过程。由于这一终密码子 : (codon) 代表一个氨基酸或蛋白合成、终止信号的止作用并不能使正在进行的结构基因转

14、录中途停止, 而仅核苷酸三联体。就是部分中途停止转录, 所以称为转录衰减。二、 填空题 :1、分子生物学的发展分为三个阶段 : 人类对 DNA与遗传信息传递的认识阶段 , 重组 DNA技术的建立与发展阶段 , 重组 DNA技术的应用 与分子生物学的迅猛发展阶段。2、对 DNA双螺旋结构的提出贡献最大的三位科学家就是J、 Watson, F、Crick, O、 Avery 。DNA序列测定法有两种, 分别为 G:lbert化学法 , sanger酶法。4、 PCR 仪的发明者为Kary B 、Mullis。5、核酸分子由碱基 , 戊糖 , 磷酸 三部分组成。6、在 DNA双螺旋结构中, 氢键 维

15、持双链横向稳定性, 碱基堆积力 维持双链纵向稳定性。7、 OD260=1、 0相当于 50ug/ml 双链 DNA,40ug/ml 单链 DNA,20ug/ml 寡核苷酸。8、 DNA的密度为 1、 7g/cm3, 相当于 8M CSCL溶液的密度。9、质粒 PSC101中的 P 代表 构建该质粒的研究者或单位。分子生物学期末复习试题及答案10、 DNA重组的种类 同源重组 , 接合作用 , 转化作用 , 转导作用 , 位点特异的重组, 转座。11、基因工程中常用载体可分为三类质粒 DNA,噬菌体 DNA,病毒 DNA。12、同一基因获取的方法有四种化学合成法 ,cDNA 文库 , 基因组 D

16、NA文库 , 聚合酶链式反应 (PCR)。13、重组 DNA导入受体菌时 , 对受体菌的要求为安全宿主菌, 限制酶与重组酶缺陷, 处于感受态 ; 导入方式有转化 , 转染 , 感染 三种。14、重组 DNA技术操作过程可形象归纳为 分 , 切 , 接 , 转 , 筛 。15、 1958年 Meselson 等氮的同位素试验 证明了 DNA复制为半保留复制的机制。16、复制的方向有 单向复制 , 相向复制 , 双向复制 。17、参与 DNA复制的物质有 底物 , 聚合酶 , 模板 , 引物 , 其她的酶与蛋白质分子。18、细菌的 RNA聚合酶全酶的五个功能位点为 , , , , 。19、真核生物

17、的转录过程可分为识别 , 起始 , 延伸 , 终止 四个阶段。20、逆转录酶就是一类非常复杂的酶, 在其简单的一条多肽链上具有多种酶活性DNA聚合酶活性 ,RNA 酶活性 ,DNA 内切酶活性 ,DNA 旋转酶活性 , 螺旋酶活性 ,tRNA 结合酶活性。21、遗传密码的特点有 连续性 , 简并性 , 摆动性 , 通用性 。22、基因表达就是受调控的 , 可在多个层次上进行 , 包括基因水平 , 转录水平 , 转录后水平 , 翻译水平 , 翻译后水平的调控。三、翻译 :脱氧核糖核酸 (DNA),超螺旋 (supercoil),正超螺旋 (positive supercoil),DNA-depe

18、ndent DNApolymerase( 依赖 DNA的 DNA聚合酶 ),解螺旋酶 (helicase),引物酶 (primase), SSB(单链 DNA结合蛋白 ),DNA ligase(DNA连接酶 ), telomerase(端粒 ) ,cDNA(互补 DNA),teminator(终止子 ),UBF(upstream binding factor)上游启动子结合因子,TBP(TATA box-binding protein)TATA框结合蛋白 ,downstream elements(下游启动子元件 ),TF(transeriptional factors)转录因子 ,CTD(ca

19、rboxyl terminal domain)羧基端结构域 ,EB(溴化乙锭 ), IF(起始因子 ),EF(延长因子 ),RF(释放因子 ),molecular chaperon(分子伴侣 )四、简答题 :1、证明 DNA就是主要的遗传物质的两个重要实验就是什么？1944,O 、 Avery 肺炎双球菌转化实验1952,A 、D Hershey与 M、 Chase 噬菌体感染实验2、简述 mRNA的结构特点与功能？结构特点 :1 、大多数真核 mRNA的 5末端均在转录后加上一个 7- 甲基鸟苷 , 同时第一个核苷酸的 C2也就是甲基化 , 形成帽子结构 :m7GpppNm。- 2、大多数真

20、核 mRNA的 3末端有一个多聚腺苷酸 (polyA) 结构 , 称为多聚 A 尾。功能 : 把 DNA所携带的遗传信息 , 按碱基互补配对原则 , 抄录并传送至核糖体 , 用以决定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。3、简述 tRNA 一级结构的特点？含 1020% 稀有碱基 , 如 DHU;3末端为 CCA-OH;5末端大多数为 G;具有 TyC 4、简述 tRNA 的结构？tRNA 的二级结构三叶草形( 氨基酸臂 ;DHU 环; 反密码环 ; 额外环 ;T C 环)tRNA 的三级结构倒L 形5、简述原核生物与真核生物的rRNA 的种类？真核生物的种类有:5S rRNA,28S rRNA,5、

21、 8S rRNA,18S rRNA;原核生物的种类有:5S rRNA,23S rRNA,16SrRNA、分子生物学期末复 及答案6、什么叫DNA的 性？ 性DNA 化 会 生哪些 化？DNA的 性 (denaturation):在某些理化因素作用下,DNA 双 解开成两条 的 程。 性后其它理化性 化:OD260增高 ; 粘度下降 ; 比旋度下降 ; 浮力密度升高 ; 酸碱滴定曲 改 ; 生物活性 失。7、什么叫 C 矛盾？ C 矛盾主要表 在哪几方面？C 矛盾指基因 大小与机体的 复 性缺乏相关性, 即真核生物中DNA含量反常的 象。表 在 :1 、C 不随生物的 化程度与复 性而增加,(

22、如肺 的 C 值为 112、2, 而人的 3、2; 与牛相近 );2 、 源关系密切的生物C 相差甚大 ,( 如豌豆 14, 蚕豆 2);3 、高等真核生物具有比用于 高得多的C值 ,( 如人染色体 DNA含量在理 上包含 300万个基因 , 但有 用途的基因只有 5-10 万个左右 ) 。8、 述鼠 寒沙 氏菌鞭毛相 的原理？鞭毛相 (phase variation):鼠 寒沙 氏菌由鞭毛蛋白决定的H抗原有两种 , 分 H1鞭毛蛋白与 H2鞭毛蛋白。从 菌落的沙 氏菌中 常能出 少数呈另一抗原的 菌 胞, 种 象称 鞭毛相 。hix 反向重复序列 , 它 之 的 H 片段可在 Hin 控制下

23、 行特异位点重 ( 倒位 ) 。 H 片段上有两个启 子P,其一 hin 基因表达 , 另一正向 H2与 rH1基因表达 , 反向 ( 倒位 ) 时 H2与 rH1 不表达。 rH1为 H1的阻遏蛋白基因。9、 述 Ig 基因重排中RSS序列的位置及 成？重 (IgH) 基因的 V-D-J 重排与 (IgL) 基因的 V-J 重排均 生在特异位点上。在 V 片段的下游 ,J 片段的上游以及D片段的两 均存在保守的重 信号序列(recombination signalsequence, RSS) 。 成 :1 、共同的T 核苷酸回文序列(CACAGTG)。 2、共同富含A 的 9核苷酸 (ACA

24、AAAACC)。3、中 固定 度或 12bp 或 23bp 的 隔序列10、以 Hind 例 明限制性核酸内切 命名的原 ？Hin d Haemophilus influenzae d株流感嗜血杆菌 d 株的第三种 第一个字母取自 生 的 菌属名, 用大写 ; 第二、第三个字母就是 菌的种名, 用小写 ; 第四个字母代表株 ; 用 数字表示 的先后次序。11、 述 体的 准？能自主复制 ; 具有两个以上的 物, 便于重 体的 与 定; 有克隆位点 ( 外源 DNA插入点 ), 常具有多个 一 切位点 , 称 多克隆位点 ; 分子量小 , 以容 大的外源DNA。12、 述重 DNA技 的基本原理

25、？目的基因的 取 - 克隆 体的 与构建- 外源基因与 体的 接-DNA 入受体菌 - 重 体的 - 克隆基因的表达13、 述 PCR体系的基本 成成分与基本反 步 ？ 成成分 : 模板 DNA;特异性引物 ; 耐 DNA聚合 ;dNTPs;Mg2+。反 步 : 性 (95 )- 退火 (Tm-5 )-延伸 (72 )- 性 (95 )- 循 14、 述 DNA的半不 复制的机理？ 着解 方向生成的子 , 复制就是 行的 , 股 称 。另一股 因 复制的方向与解 方向相反 , 不能 着解 方向 延 , 股不 复制的 称 随从 。复制中的不 片段称 岡崎片段(okazaki fragment)。

26、 复制而随从 不 复制, 就就是复制的半不 性。15、 述 DNA复制保真性的三种机制？1、遵守 格的碱基配 律;2 、聚合 在复制延 碱基的 功能;3 、复制出 DNA-pol的及 校 功能。16、 述 DNA拓扑异构 与作用机制的不同？拓扑异构 : 切断 DNA双 中一股 , 使 DNA解 旋 不致打 ; 适当 候封 切口,DNA 松弛状 ;反 不需 ATP。 DNA拓扑异构 : 切断 DNA分子两股 , 断端通 切口旋 使超螺旋松弛 ; 利用 ATP供能 , 接断端 , DNA 分子 入 超螺旋状 。分子生物学期末复习试题及答案17、什么叫端粒？其结构特点与功能就是什么？端粒指真核生物染

27、色体线性DNA分子末端的结构。结构特点端 DNA序列就是多次重复的富含G、 C 碱基的短序列。功能完整性18、什么叫端粒酶？其组成如何？:1 、由末端单链DNA序列与蛋白质构成;2 、末:1 、维持染色体的稳定性;2 、维持 DNA复制的端粒酶 (telomerase):以酶分子中的RNA片段为模板 , 在染色体DNA3-端合成一段DNA。组成 : 端粒酶 RNA (human telomerase RNA, hTR);端粒酶协同蛋白 (human telomerase associated protein 1, hTP1); 端粒酶逆转录酶 (human telomerase reverse

28、 transcriptase, hTRT)19简述转录与复制的异同点？20、简述细菌的RNA聚合酶全酶的组成？ 2 : 465 kD; 与亚基 : 催化中心 , 构成核酸通道 ; 亚基 : 核心酶组装所需 ; 也与调节因子作用 ; 亚基 : 启动子识别 , 具有启动子特异性。21、简述原核生物启动子的序列特点？s 因子能直接与启动子序列结合,-35 与 -10 区距离的改变将影响s 因子的作用 , 从而改变其始效率; 不同的启动子具有不同的其始效率。22、简述细菌RNA 聚合酶中因子的特点？重复使用 (Re-usable);DNA的非专一性结合力使 Holo-enzyme识别(107/mol)

29、,增强全酶与Sextama Box,与模板链结合R, B site的专一性结合力; 修饰 RNApol(1014/mol),构型 , 降低全酶与导致 RNA链的延伸缓慢。23、简述转录过程？识别阶段 :RNA 聚合酶在s 亚基引导下结合到启动子上,DNA 双连局部解开; 起始阶段 : 在模板链上通过碱基配对合成最初RNA链; 延伸阶段 : 核心酶向前移动,RNA 链不断生长 ; 终止阶段 :RNA 聚合酶达到基因转录终点 ,RNA 与 RNA聚合酶从DNA上脱落。24、 RNA编辑的生物学意义？RNA编辑能消除移码突变等过程带来的危害; 能增加基因产物的多样性; 与生物细胞发育与分化有关, 就

30、是基因调控的一种重要方式; 可能使基因产物获得新的结构与功能, 有利于生物进化; 很可能与学习与记忆有关。五、论述 :1、论述 E、 coli的 DNA的生物合成过程？1、复制的起始。a、起始复合物的形成 : 大约 20-40 与 DnaA蛋白各带一个 ATP聚集结合在 4个 9bp 位点上 ,DNA 缠绕其上 , 形成起始复合物 (HU 蛋白质帮助 ) 。b、开链复合物的形成: 富含 AT的 3个 13bp 序列被解链。c、前引发复合物的形成:DnaB 在 DnaC帮助下结合于解链区, 借助水解 ATP 的能量 , 双链沿 5-3 方向移动 ,形成前引发复合物。2、复制的延长。 在 DNA-

31、pol 催化下 ,dNTP 以 dNMP的方式逐个加入引物或延长中的子链上, 其化学本质就是磷酸二酯键的不断生成。领头链的合成: 引物合成酶合成一段DNA引物。前导链与后随链合成的协调一致 ,DNA的两条互补链方向相反 , 为使后随链能与前导链被同一 DNApolIII 的不对称二聚体所聚合 , 后随链绕成了一个突环形构象。3、复制的终止。原核生物基因就是环状DNA,双向复制的复制片段在复制的终止点(ter)处汇合。2、论述细菌RNA聚合酶及其转录？细菌的 RNA聚合酶 (DDRP)全酶 : 组成 2 : 465 kD; 2部分称为核心酶。亚基: 核心酶组装的组建因子, 促使 RNApol 与

32、 DNA模板链上游转录因子结合, 位于前端的因子使双链解链为单链, 位分子生物学期末复习试题及答案于尾端的因子使单链新聚合为双链。亚基 : 结合底物 NTP,催化 NMP之间的磷酸二脂键的形成, 与 Rho( )因子竞争RNA 3 -end, 催化中心模板DNA结合 , 构成 RNA聚合酶全酶后因子含有两个位点,I位点 : 专一性结合 ATP或 GTP,E位点对 NTP非专一性结合, 编辑。因子: 强碱性亚基 , 促使 RNA polymerase 与非模板链 (sense strand)结合 , 受 K 酶抑制 , 识别启动子。s 因子 : 重复使用 , 使 RNA聚合酶全酶识别启动与模板链

33、结合 , 促进转录的起始 , 修饰 RNA聚合酶构型降低了全酶与DNA的非专一性结合力 , 增强 RNA与识别位点的专一性结合力 , 导致 RNA链的延伸缓慢。亚基未知。与亚基就是催化中心, 构成核酸通道。转录识别阶段 :RNA聚合酶在 s 亚基引导下结合到启动子上,DNA 双连局部解开 ; 起始阶段 : 在模板链上通过碱基配对合成最初 RNA链 ; 延伸阶段 : 核心酶向前移动 ,RNA 链不断生长 ; 终止阶段 :RNA 聚合酶达到基因转录终点 ,RNA与 RNA聚合酶从 DNA上脱落。3、论述蛋白质翻译的过程？1、翻译的起始。指 mRNA与起始氨酰 -tRNA 分别与核蛋白体结合而形成翻

34、译起始复合物。( 一 ) 原核生物翻译起始复合物形成。核蛋白体大小亚基分离;mRNA在小亚基定位结合 ; 起始氨基酰 -tRNA 的结合 ; 核蛋白体大亚基结合。 ( 二 ) 真核生物翻译起始复合物形成。核蛋白体大小亚基分离; 起始氨基酰 -tRNA 结合 ;mRNA在核蛋白体小亚基就位 ; 核蛋白体大亚基结合。2、翻译的延伸。指根据mRNA密码序列的指导 , 次序添加氨基酸从N端向 C 端延伸肽链 , 直到合成终止的过程。当与起始密码子紧邻的密码子被其氨酰-tRNA 上的反密码子识别并结合后, 延伸反应开始。 肽链延长在核蛋白体上连续性循环式进行, 又称为核蛋白体循环 , 每次循环增加一个氨

35、基酸,胞括以下三步 :a 、进位 , 又称注册 , 指根据 mRNA下一组遗传密码指导, 使相应氨基酰 -tRNA 进入核蛋白体 A位。 b、成肽 , 就是由转肽酶催化的肽键形成过程。c、转位 ,延长因子 EF-G 有转位酶活性 , 可结合并水解 1分子 GTP,促进核蛋白体向mRNA的 3 侧移动。真核生物延长过程 : 真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似 , 但有不同的反应体系与延长因子。另外, 真核细胞核蛋白体没有E 位 , 转位时卸载的tRNA 直接从 P 位脱落。3、肽链合成的终止 ( 翻译的终止 ) 。当 mRNA上终止密码出现后, 多肽链合成停止 , 肽链从肽酰 -tRNA

36、中释出 ,mRNA、核蛋白体等分离, 这些过程称为肽链合成终止。4、论述乳糖操纵子的调节机制？1、阻遏蛋白的负性调节 : 当培养基中没有乳糖时, 存在于操纵子上游的调节基因编码表达的阻遏蛋白结合到操纵子中的操纵基因上阻止了结构基因的表达; 将大肠杆菌转到乳糖培养基中时, 由于诱导物分子结合在阻遏蛋白的特异部位 , 引起阻遏蛋白构象改变, 不能结合到操纵基因上, 使 RNA聚合酶能够正常催化转录存在于操纵子上的结构基因, 即操纵子被诱导表达 ,b 半乳糖苷酶分子数量迅速增加。乳糖本身不能与阻遏物结合 , 而就是进入细胞后, 由 - 半乳糖苷酶变为异乳糖, 异乳糖就是一种较强的诱导剂。2、CAP的

37、正性调节 :cAMP-CAP就是一个重要的正调节物质, 可以与操纵子上的启动子区结合, 启动基因转录。葡萄糖的存在可抑制细菌细胞中的腺苷酸环化酶, 减少了环腺苷酸 (cAMP)的合成 , 与它结合的受体蛋白质CAP因找不到配体而不能形成复合物。 葡萄糖存在时 , 不易形成复合物cAMP-CAP,受其调控的基因就不表达。如果培养基中葡萄糖的含量下降, 腺苷酸环化酶活力就会相应提高,cAMP合成增加 ,cAMP与 CAP 形成复合物并与启动子结合 , 促进乳糖操纵子的表达。 负性调节与正性调节协调合作, 阻遏蛋白封闭转录时,CAP 不发挥作用 , 如没有 CAP加强转录 , 即使阻遏蛋白从P 上解

38、聚仍无转录活性, 葡萄糖 / 乳糖共同存在时, 细菌优先利用葡萄糖 , 葡萄糖可降低cAMP浓度 , 阻碍其与 CAP结合从而抑制转录。结论:lac操纵子强的诱导作用既需要乳糖又需缺乏葡萄糖。5、论述色氨酸操纵子的转录衰减机制？(1) 当细菌内色氨酸缺乏时 , 核糖体停留在序列 I 色氨酸密码子处 , 序列 2与 3配对形成发夹结构 , 序列 3与 4无法形成衰减子结构 , 继续转录合成色氨酸的 mRNA。(2) 细菌内色氨酸充足时 , 核糖体顺利通过序列 1色氨酸密码子处 , 核糖体占据序列 1与序列 2, 序列 3与 4形成衰减子 , 转录终止 , 转录衰减机制实质上就是转录与一个前导肽翻译过程的偶联！