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1、论 著O ri g ina l国产与进口齐多夫定胶囊在健康人体的药代动力学和生物等效性Phar m acoki netics and bi oequi valence of do m estic and i m ported zi dovudine capsules i n healthy vol unteers李小利 ,王本杰 ,倪梅媛 ,郭瑞臣(山东大学齐鲁医院临床药理研究所,济南 250012LI X i a o-l,i WANG Ben-jie,N IM ei-yuan,GUO Rui-chen(Instit u te of C li n ical Phar m acology, Q
2、ilu H os p it a l of Shandong University, J inan 250012,China收稿日期 :2005-12-19修回日期 :2006-06-19作者简介 :李小利 (1975-,女 ,硕士 ,主要从事临床药理学研究通讯作者 :郭瑞臣 ,教授 ,博士生导师Te:l(053182169636E-ma i:l grc7636126.co m 摘要 :目的 研究国产与进口齐多夫定胶囊(抗艾滋病药在健康志愿者体内的药代动力学和生物等效性。方法20 名健康男性受试者随机交叉单剂量口服国产与进口齐多夫定胶囊300m g,用高效液相色谱法测定给药后不同时间的血浆浓度
3、,计算主要药代动力学参数。结果国产与进口齐多夫定胶囊主要药代动力学参数 :t1/2 分别为 (1.72 0.42,(1.53 0.27h;t ma x分别为 (0.86 0.42,(0.88 0.30h;Cm ax分别为 (1.60 0.61,(1.60 0.55g mL-1;A UC08分别为 (2.06 0.37,(2.08 0.34 g h mL-1;AUC0-分别为 (2.11 0.37,(2.12 0.34 g h m L-1。国产齐多夫定胶囊相对生物利用度F 为(99.02 5.02%。结论 2 制剂具有生物等效性。关键词 :齐多夫定胶囊 ;药代动力学 ;生物等效性 ;高效液相色谱
4、中图分类号 :R969.1;R978.7 文献标识码 :A文章编号 :1001-6821(200704-0288-04Abstract:Objective To study the phar m acok i n etics and b i o equ i v a lence after si n gle o ral adm i n istration o f do m estic(testand i m ported (referencezi d ovudine capsu les i n20healt h y vo l u nteers.M ethods A sing le ora l d
5、ose o f zidovudine test and reference w ere g iven accord i n g to a rando m ized t w o way cross-over desi g n.Plas m a concentration o f zi d ovu dine(300m gw as deter m ined by HPLC.R esults M ean phar m acok i netic para m eters after o ral adm i n istration of zidovud i n e test and re ferencew
6、 ere as follo w s:t1/2w ere(1.72 0.45,(1.53 0.27h;t m ax w ere (0.86 0.42,(0.88 0.30h;C m ax w ere(1.60 0.61,(1.60 0.56 g mL-1;AUC0-8w ere(2.06 0.36,(2.08 0.34h g mL-1;AUC0- w ere(2.11 0.36,(2.12 0.34h g m L-1.The b i o ava ilab ility of zi d ovudine test to reference w as(99.02 5.02%.Conc l u sion
7、The results de m onstrated that the test and refer ence of zi d ovudine capsu les w ere b i o equ i v a len.tKey words:zi d ovud i n e capsu les;phar m acokinetics;b i o equ i v a lence;H PLC齐多夫定是世界上第一个获准生产的抗艾滋病药物。 1987 年,在美国首次上市 , 主要用于治疗人类免疫缺陷病毒感染及预防 H I V 母婴传染。齐多夫定可竞争性地抑制病毒逆转录酶并终止病毒 DNA 链的延伸 ;在 2
8、种或 3 种药物合并用药方案中 , 齐多夫定与具有类似288 第 23 卷 第 4 期 2007 年 7 月(总第 108 期或不同作用机制的多种药物间存在协同或相加抗病毒活性 1 。齐多夫定可竞争性抑制病毒 DNA 合成并终止病毒 DNA 链的延伸 ,增进细胞介导免疫并增加特异性无效病毒抗体的滴度 2 。本研究通过单次口服国产与进口齐多夫定胶囊的标准双交叉试验 ,评价 2 种制剂的人体生物等效性。材料、对象与方法1 药品与仪器试验制剂 :齐多夫定胶囊 ,批号 :20040517,规格 :每粒 :100mg,山东省医药工业研究所提供 ;参比制剂 :齐多夫定胶囊 ,批号 :B NX9271, 规
9、格 :每粒 100 m g,G laxo Sm ith Kline(美国生产 ;齐多夫定对照品 ,含量 :99.7%,由山东省医药工业研究所提供;内标 :替硝唑 ,含量 :99.6%,由山东省医药工业研究所提供。1100 高效液相色谱仪 ,美国安捷伦公司产品 ; XK96-A 快速混匀器 ,姜堰市新康医疗器械有限公司产品 ;AX-205 电子天平 ,梅特勒 -托利多仪器 (上海有限公司产品 ;TDL-4 型高速台式离心机 ,上海安亭科学仪器厂产品。2 受试者选择20 名健康男性志愿者 ,年龄 (23.45 1.10岁 ,体质量 (69.35 6.15kg;试验前经病史询问、体格检查和实验室检查
10、 (心电图、临床血液学、血液生化和尿常规未发现异常。无药物过敏史、药物依赖史、精神病史及其他慢性病史。试验前向志愿者说明试验目的、药物特性、适应症、试验期间的注意事项及可能出现的不良反应 ,并签定书面知情同意书。试验方案经本院伦理委员会批准。3 分组与给药方法采用双周期随机交叉试验设计。20 名志愿者按体质量指数进行分层随机分组,2 组志愿者个人资料及实验室检查数据经统计学分析无显著性差异 ,条件相当。志愿者于试验前 1 天晚 10 时后禁食 , 试验当日晨抽取空白血样后 ,立即空腹口服试验制剂或参比制剂 300mg。110 号志愿者服用试验制剂齐多夫定胶囊 ;1120 号志愿者服用参比制剂齐
11、多夫定胶囊 ,温开水 200m L 送服。服药 2h 后方能饮水 ,4h 后进食标准低脂肪、低蛋白早餐。 1 周后 , 2 组交叉服药 ,进行第 2 周期试验。剂量、饮食、观察方法等与第 1 周期相同。服药期间 ,禁用其他药物和含咖啡因类饮料、吸烟和饮酒。4 样本采集于服药前和服药后 0.25,0.5,0.75, 1.0,1.5, 2.0,2.5,3.0,4.0,5.0,6.0,8.0h取肘静脉血 4m L,并立即移入塑料试管中 ,3500r m i n-1 离心 15m in,取血浆分双份于 -20 低温保存。5 血药浓度测定 3-45.1 色谱条件D ia m onsilTM C18(5
12、m,4.6mm 250mm 色谱柱 ;流动相为 0.005m o l L-1 磷酸二氢钠缓冲液 -乙腈 (80 20,用前经 0.45 m 微孔滤膜过滤 ,超声脱气 ;流量为 1.5mL m i n-1; 柱温 :24 ;检测波长 : 265nm;进样量 20 L。5.2 样本处理取血浆 0.5mL 加 50 g m L-1 内标替硝唑 60 L,加入 2m oL L-1 高氯酸 100 L 沉淀蛋白 ,10000 r m i n-1 离心 5m i n,进样 20 L 测定。6 方法学考察与评价6.1 标准曲线制备用空白人血浆将齐多夫定标准储备液稀释成不同浓度 (0.01,0.1,0.2,1
13、,2,4 g m L-1 的标准液 ,按样品处理方法 ,进样测定。以齐多夫定和替硝唑峰面积比值 (Y 对齐多夫定浓度 (X 进行线性回归 ,直线回归方程为 Y=0.92X-0.002,相关系数 = 0.9999;血浆最低检出浓度为 0.01 g mL-1。齐多夫定在 0.014.00 g mL-1 内,线性关系良好。 6.2 回收率、日内及日间精密度配制浓度 0.02,1,4 g mL-1 的齐多夫定标准血浆各 5 份,于 1 日内连续测定 ,计算日内相对标准差 (RSD。每日配制浓度 0.02,1,4 g mL-1 齐多夫定标准血浆各 1 份,连续测定 3 日 ,计算日间相对标准差 (RSD
14、。结果见表 1。Tab l e1.Recove ry rate and prec ision o f z i d ovud ineAdded ( g mL-1W it h i n-day( g mL-1RSD(%Bet w een-day( g mL-1RSD(%R ecovery rate(%0.020.02 0.006.460.02 0.004.5697.00 2.741.001.00 0.010.981.01 0.010.8599.74 0.864.004.01 0.040.974.03 0.030.7399.90 0.38 n=5,m ean SD6.3 稳定性考察存放期间 取健康人空
15、白全血数份 ,分别加入齐多夫定标准溶液 ,使血浆中齐多夫定的浓度分别为 0.02,1,4 g mL -1,放置在 -60 冰箱中 ,分别于第 0,2,7 天取样分析 ,考察其在存放期间的稳定性。结果表明 ,血浆样品在 -60 至少能保存 7 天。多次冻融 取健康人空白血浆数份 ,分别加入齐多夫定标准溶液 ,使血浆中齐多夫定的浓度分别为0.02,1,4 g mL -1,-60 放置 ,然后反复冻融 2 次测定其浓度 ,考察其冻融稳定性。结果表明 ,血浆样品冻融 2 次后 ,血药浓度无明显变化。 6.4 方法的专属性在选定色谱条件下测得的色谱图见图1。由图 1 可见 ,齐多夫定与内标替硝唑的保留时
16、间分别为4.78m i n 和 6.43m in ,2 者峰形良好 ,分离完全 ,无杂质峰干扰。F igure 1.Chromatogra m s of z i dovud i neA.Z i dovudi n st andard ;B.In t ernal st andard;C.Z i dovud i n e and i n ternal standard ;D.B l ank plas m a ;E.B l ank plas m a sp i ked w it h zidovud i ne and i n t ernal standard;F .Plas ma sa mp le s p
17、i k ed w it h i n ternal standard7 数据处理用 DAS 2.0 程序计算药代动力学参数及相对生物利用度 ,主要药代动力学参数进行方差分析、双单侧 t 检验和 (1-2 置区间分析 ,评价受试制剂和参比制剂的生物等效性。结 果1 血药浓度 -时间曲线20 名健康志愿者单次口服齐多夫定胶囊受试制剂与参比制剂 300m g 后的平均血浓度 -时间曲线见图 2。2 药代动力学参数20 名健康志愿者口服齐多夫定胶囊受试制剂和参比制剂后力学参数见表 2。3 生物等效性评价300m g 主要药代动齐多夫定胶囊受试制剂和参比制剂的C max 、t max 、AUC 0-8 和
18、 AUC 0- 经对数转换后进行方差分析、双单侧检验及90%可信限考察 ,结果显示 ,制剂间和周期290第 23 卷 第 4 期 2007 年 7 月 (总第 108 期间无显著差异 ;但个体间存在显著差异。In AUC 0-8 、I nAUC 0- 、I n C max 、t max 90%双单侧检验结果分别为97.00%100.84%,97.48%101.30%,91.70%104.86%,90.11%107.03%,提示 2 制剂具有生物等效性。F i gu re 2.M ean p las ma concentrati on -ti m e curves of z i dovudi n
19、 e after as i ngle oral dos e of 300mg test and ref eren ce i n 20heal thy vol unteersTab l e 2.The ma in phar m acokine tic pa rame t e rs a fter sing le o ra l dose o f 300mg z i d ovud ine t e st and re f e rence in 20hea lt hy vo lunteersPara m eterTest Ref eren ce AUC 0-8( g h mL -1 2.06 0.362.
20、08 0.34AUC 0- ( g h mL -1 2.11 0.372.12 0.34C m ax ( g mL -11.60 0.611.60 0.55t m ax (h0.86 0.420.88 0.30t 1/2ke (h 1.72 0.421.53 0.27F (%99.02 5.02讨 论本文用高效液相色谱法测定血浆中齐多夫定浓度 ,方法简便、经济、灵敏度高 , 重现性好。在本条件下 ,齐多夫定及内标测定均不受血浆中内源性物质的干扰 ,最低定量限、精密度、准确度、回收率以及稳定性完全符合生物样本中药物分析的方法学要求。 20 名健康志愿者单次口服国产或进口齐多夫定300m g 后,
21、2 制剂在健康人体内的吸收、分布过程相似。主要药代动力学参数个体间存在统计学差异 ,但周期间及制剂间均无统计学差异。与文献报道 2一致。国产齐多夫定胶囊相对生物利用度F 为(99.02 5.02%,表明 2 制剂的吸收程度相似。方差分析和双单侧t 检验证明 ,2 制剂具有生物等效性。参考文献 :1Langtry HD,Ca m poli-R i chards D M.Z i dovud i ne :A revie w of its phar m acodyn a m ic and phar m acok i n etic prop erties and t herap euti c effic
22、acy J.D rug s ,1989;37:408-450.2Robb i ns BL ,W ai bel B H,Fri d l and A.Quanti zation of i ntracell u l arz i dovud i n e phos phates by use of co mb ined cartri dge-rad i oi m munoas say m et hodo l ogyJ.An ti m i crob Ag e n ts Ch e m ot h e r ,1996;2651-2654.3M ays DC,D i xon KF ,Ba l boa A,et a
23、 l .A nonpri m ate an i m alm odel tozi dovud i ne phar m acokinetics i n hum an s :i nh i b i ti on of g l ucuron i dationand renal excretion of zi dovud i ne by prob enecid i n ratsJ.J Pha r macolExp Th er ,1991;259:1261-1270.4T rang J M ,Prej ean J D,Ja m es R H,e t al .Z i dovud i ne bioavailab ilit yand li n ear phar m acok i netics i n fe m al e B6C3F1m i ceJ.D rug M etabDispos ,1993;21:189-193.