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1、3人们用鸡的红细胞提取名校名 推荐专题 3植物的组织培养技术专题 5DNA和蛋白质技术(时间： 50 分钟 )一、单项选择题1下图为植物组织培养过程的简单示意图。下列叙述正确的是()A 植物组织培养所依据的生物学原理为细胞的全能性B过程指植物的生殖生长阶段C将经脱分化培养成的包裹上人工种皮即可获得人工种子D的再分化过程中，诱导生根的激素为细胞分裂素2用高度分化的植物器官、组织或细胞进行组织培养可以形成愈伤组织，下列叙述错误的是 ()A 该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的B该愈伤组织的细胞没有全能性C该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成的D该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状体结构DNA
2、 ，而用人的成熟红细胞提取血红蛋白的主要原因是()A 鸡的红细胞无血红蛋白，人的成熟红细胞有血红蛋白B鸡的红细胞有线粒体，人的成熟红细胞无线粒体C鸡的红细胞有细胞核，人的成熟红细胞无细胞核D鸡的红细胞进行有氧呼吸，人的成熟红细胞进行无氧呼吸4下列关于血红蛋白分离中样品处理及粗分离的描述，错误的是()A 红细胞洗涤：此操作的目的是去除红细胞内的杂蛋白B血红蛋白释放：此操作需要将洗涤好的红细胞放入蒸馏水中C分离血红蛋白溶液：离心后红色透明液体是血红蛋白的水溶液D透析：此操作的目的是去除分子量较小的杂质5 (2014 海高三检测珠 )下列关于DNA和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中，错误的是 ()A
3、 可用蒸馏水涨破细胞的方法从猪的红细胞中提取到DNA 和蛋白质B用不同浓度的NaCl 溶液反复溶解与析出DNA 可除去部分杂质C透析法分离蛋白质的依据是蛋白质不能通过半透膜D进一步分离与纯化血红蛋白时可用凝胶色谱法、离心法和电泳法等6 (2014 珠海高三检测 )PCR 过程与细胞内的DNA 复制过程相比，主要有两点不同，它们是 () PCR 过程需要的引物是人工合成的单链DNA 或 RNA PCR 过程不需要DNA 聚合酶 PCR 过程中 DNA 的解旋不依靠解旋酶，而是通过对反应温度的控制来实现的 PCR 过程中， DNA 不需要解旋，直接以双链DNA 为模板进行复制A B CD 1名校名
4、 推荐7相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程可表示为下图中的哪一个()8已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图所示，下列有关该样品中蛋白质的分离的叙述正确的是()A 将样品装入透析袋中透析 12 h，若分子乙保留在袋内，则分子丙也保留在袋内B若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子甲移动速度最快C若将样品以 2 000 r/min 的速度离心 10 min ，分子戊存在于沉淀中，则分子甲也存在于沉淀中D若用 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最远9下列实验装置可用于生物技术实践的相关实验，下
5、列相关叙述不正确的是 ()A 装置甲可用于果酒或腐乳的制作B装置乙可用于血红蛋白提取和分离过程中对装于中的样品的处理C装置丙可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作D使用装置丁进行蛋白质的分离时，中为待分离的样品二、双项选择题10 (2014 圳市高三调研深)下列关于花药培养的叙述中，正确的是()A 培养基中的蔗糖能提供营养和调节渗透压B选材时可通过镜检确定花粉是否在单核靠边期C产生胚状体是花药离体培养中特有的途径D脱分化形成愈伤组织的过程能合成大量叶绿素11多聚酶链式反应(PCR) 是一种体外迅速扩增DNA 片段的技术。 PCR 过程一般经历30 多次下述循环： 95 条件下使模板 DNA 变性
6、、解链 55 条件下复性 (引物与 DNA 模板链结合 ) 72 条件下引物链延伸 (形成新的脱氧核苷酸链 )。下列有关 PCR 过程的叙述，不正确的是 ()A 变性过程中破坏的是DNA 分子内碱基对之间的氢键，不可利用解旋酶实现B复性过程中引物与DNA 模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的C延伸过程中需要DNA 聚合酶、 ATP、 4 种核糖核苷酸D PCR 与细胞内 DNA 复制相比，其所需要酶的最适温度较高三、非选择题2名校名 推荐12(2014 东四校联考广)某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中初步提取血红蛋白，设计的“血红蛋白提取、分离流程图”如下：实验
7、准备样品处理配制缓冲液、血细胞洗涤、破碎、离心等悬液纯化、纯蛋白质度鉴定 粗分离 凝胶色透析谱法、电泳等请回答下列有关问题：(1) 样品处理中红细胞的洗涤要用 _ 反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度 pH 7.0 的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是_ 。(2) 血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是_，若要尽快达到理想的透析效果，可以 _( 写出一种方法 )。(3) 电 泳 利 用 了 待 分 离 样 品 中 各 种 分 子 的_ 等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。(4) 一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白
8、电泳结果如图所示。 由图可知携带者有 _种血红蛋白， 从分子遗传学的角度作出的解释是_ 。13PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定DNA 片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：(1)A 过程高温使DNA 变性解旋，对该过程原理的叙述，正确的是_。A 该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键B该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键C该过程不需要解旋酶的作用D该过程与人体细胞的过程完全相同(2)C 过程要用到的酶是_ 。这种酶在高温下仍保持活性，因此在PCR 扩增时 可 以 _ 加 入 。 PCR反 应 除 提 供 酶 外 ， 还 需 要 满 足 的 基 本 条 件 有 ：_ 。1
9、5(3)如果把模板DNA 的两条链用N 标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“ 95 1555 72 ”温度循环3 次，则在形成的子代DNA 中含有N 标记的 DNA 占 _ 。3名校名 推荐(4)如果模板DNA 分子共有 a 个碱基对，其中含有胞嘧啶m 个，则该 DNA 复制 10 次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸_个。(5)PCR 中由碱基错配引起的变异属于_。假设对一个DNA 进行扩增， 第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，则扩增若干次后检测所用DNA 的扩增片段， 与原 DNA相应片段相同的占_。14如图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请回答下列问题。(1) 血红蛋白是人和其他
10、脊椎动物红细胞的主要组成成分，其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有 _功能。(2) 甲装置中， B 是血红蛋白溶液，则A 是 _；乙装置中， C 溶液的作用是_ 。(3) 甲装置用于 _ ，目的是 _ 。用乙装置分离蛋白质的方法叫_ ，是根据 _ 分离蛋白质的有效方法。(4)用乙装置分离血红蛋白时，待_ 时，用试管收集流出液，每5 mL 收集一管，连续收集。课后达标检测371解析： 选 A 。依次代表离体的植物组织或细胞、愈伤组织、根或芽、植株。愈伤组织生根还是发芽取决于激素的种类和浓度比例。当生长素/细胞分裂素比值较高时，有利于生根；反之，有利于生芽。要获得人工种子，应选外包上人工种皮。2 解
11、析： 选 B。植物组织培养的原理是植物细胞的全能性。植物细胞只有脱离了植物体，在一定的外部因素的作用下，经细胞脱分化，分裂形成愈伤组织，再由愈伤组织细胞发育、分化形成新的植物体，才能表现出全能性。3解析： 选 C。鸡的红细胞中有细胞核，可用来提取DNA ，而人的成熟红细胞中没有细胞核，但含有较多的血红蛋白。4 解析： 选 A 。红细胞洗涤的目的是去除血浆中的蛋白质。5 解析： 选 A 。猪是哺乳动物，哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核和线粒体，不能从其红细胞中提取出 DNA 。6解析： 选 C。PCR 过程与细胞内的DNA 复制过程相比较，主要有两点不同：(1)PCR过程需要的引物是人工合成的一小
12、段单链 DNA 或 RNA 。(2)PCR 过程中， DNA 解旋不依赖解旋酶，而是通过对反应温度的控制来实现的。7 解析： 选 B。当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道， 路程较长， 移动速度较慢； 而相对分子质量较大的蛋白质不能进入凝胶内部，路程较短，移动速度快。8 解析： 选 A 。分子甲的分子量最小，进入凝胶内部通道而移动速度慢；分子乙留在透析袋内， 说明其相对分子质量比较大，分子丙比分子乙相对分子质量大，所以分子丙也留在袋内；分子戊比分子甲的分子量大，分子甲可能不存在于沉淀物中；SDS聚丙烯酰胺4名校名 推荐凝胶电泳中的样品， 其电泳迁
13、移率完全取决于分子的大小， 分子量相差越大， 形成的电泳带相距越远。9 解析： 选 D。使用装置丁进行蛋白质的分离时，待分离的样品在中，中为缓冲溶液。10解析： 选 AB 。产生胚状体是花药离体培养中的途径之一，而且植物的其他组织细胞经培养也可形成胚状体。培养早期不需要光照，幼小植株形成后才需要光照。11 解析： 选 AC 。 PCR 一般要经历30 多次循环，每次循环可以分为变性、复性和延伸三步。 从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，并且由引物延伸而成的 DNA 单链会与引物结合，进行DNA 的延伸。 DNA 变性 (95 )：双链 DNA 模板在热作用下， 氢键断裂， 形
14、成单链 DNA 。复性 (55 )：系统温度降低， 引物与 DNA 模板结合，形成局部双链。 延伸： 在 Taq 酶 (在 72左右活性最高 )的作用下， 以四种脱氧核糖核苷酸为原料，从引物的5端向 3端延伸，合成与模板链互补的DNA 链。12(1)生理盐水渗透原理 (当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破 )(2) 除去小分子杂质增加缓冲液的量或及时更换缓冲液(3) 带电性质以及分子大小、形状(4)2 携带者具有 ( 控制血红蛋白的 )一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质13解析： (1)高温所起的作用类似于解旋酶，使双链 DNA 变为单链。 (2)C 过程为 PCR技术的
15、延伸阶段， 当系统温度上升至 72 左右时， 溶液中的四种脱氧核苷酸在Taq DNA 聚合酶的作用下合成新的DNA 链。 Taq DNA 聚合酶是耐热的，高温下不变性，所以一次性加入即可。 PCR 即为体外 DNA 复制，所需条件与体内DNA 复制基本相同，都需要模板、原料、能量、酶，只不过为了便于控制 DNA 复制过程通过设置高温解旋代替了解旋酶的作用，省掉了解旋酶作用过程中所需能量的供应，同时，加入了与模板链相结合的引物作为子链延伸的起点，省掉了切除引物的过程，使PCR 过程更简洁。(3)PCR 技术遵循半保留复制的特点。经过三次循环，共产生23 个 DNA分子，其中有2 个 DNA 分子
16、含有 15N 标记。 (4)在一个双链 DNA 分子中， (C T) 占碱基总数的一半，故T 的数目为 a m，复制10 次，相当于新增加了 (210 1)个 DNA分子，故需加入T 的数目为 (210 1)(a m)。(5) 基因中的碱基对改变属于基因突变。对一个DNA 进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，以后按正常配对方式进行扩增，错配链作模板扩增的都是错误的DNA 分子，原正常链扩增得到的 DNA 分子都是正常的DNA 分子，故若干次后检测所用DNA 的扩增片段，与原 DNA相应片段相同的占75%。答案： (1)C(2) Taq DNA 聚合酶一次 DNA模板，分别与两条模
17、板链相结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行(3)25% (4)(2 10 1)(a m) (5)基因突变 75%14解析： 血红蛋白在氧分压高的地方与氧结合，在氧分压低的地方与氧分离，起到运输氧的作用。图甲表示的是透析过程，将装有血红蛋白溶液的透析袋放入盛有300 mL 的物质的量浓度为20 mmol/L 的磷酸缓冲液中(pH 为 7.0)。透析的目的是去除样品中分子质量较小的杂质。 图乙表示用凝胶色谱柱洗脱血红蛋白的操作示意图。凝胶实际上是一些微小的多孔球体， 小球体内部有许多贯穿的通道。相对分子质量较大的蛋白质不能进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，通过的路程较短，移动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质比较容易进入凝胶内部的通道，通过的路程较长，移动速度较慢。因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出， 相对分子质量中等的分子后流出，相对分子质量最小的分子最后流出，从而使相对分子质量不同的各种分子得以分离。这种分离血红蛋白的方法叫凝胶色谱法。C溶液是磷酸缓冲液，其作用是洗脱血红蛋白。待红色的蛋白质接近色谱柱底端时开始收集流出液。答案： (1)运输(2)磷酸缓冲液洗脱血红蛋白(3)透析 (粗分离 )去除小分子杂质凝胶色谱法相对分子质量的大小(4)红色的蛋白质接近色谱柱底端5