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1、PH、AD、Ach等因素对离体家兔肠肌运动的影响XXXXXXXX大学第二临床医学院 临床医学 （2）班 第7组 20072090211【摘要】：目的：通过观察HCl、NaOH、23台试液、肾上腺素和乙酰胆碱对离体家兔肠肌的激动作用，加深理解各药物的激动和阻断作用。方法 在保证个影响因素不相互干扰的情况下，逐步给予相应的刺激和给药，用微机生物信号采集处理系统观察各项处理前后的收缩幅度变化，分析探讨各种理化刺激引起循环、呼吸、泌尿等功能的适应性改变。结果 得到了各项处理前后的收缩幅度原始图表。结论 滴加HCl、23台试液、肾上腺素，肠肌标本的收缩张力下降；滴加NaOH、乙酰胆碱，肠肌标本的收缩张力
2、升高；其中使用23台试液的肠肌标本紧张性上升。1Hcl, NaOH,by observation naoh, 23 s try and that of epinephrine and b, as alkali to the rabbits from the muscles of excitement, comprehension of drugs and stops. Method In a way to ensure that factors influencing not interfere with each other cases, has given the appropriate
3、incentives and drug, with microcomputers biological signal collecting systems and observe the processing of the amplitude variation, which caused by various rationalized cycle, breathing and urinary for functions change. Results Received the attention of the contraction in the diagram. the conclusio
4、n was added, one twenty-three hcl try and that of epinephrine. the specimen the contraction of muscle tension ； drop down with naoh, even terror; the muscles of the increase of tension ； used 23 s try the sausage in the availability of increased tension.【关键词】：离体肠肌；台氏液；酸碱度；肾上腺素肾上腺素：由肾上腺髓质分泌的一种儿茶酚胺激素。
5、在应激状态、内脏神经刺激和低血糖等情况下，释放入血液循环，促进糖原分解并升高血糖，促进脂肪分解，引起心跳加快。1【Key words】：Intestinal muscle from the body; Tyrodes Salts Solution;PH;ADAdrenaline;epinephrine：One kind of catecha phenol amine hormone which secretes by the adrenal medulla. In situations and so on stress condition, splanchnic nerve stimulati
6、on and hypoglycemia, releases into the blood circulation, the promotion glycogen decomposes and elevates the blood sugar, the promotion steatolysis, causes the palpitation to speed up. 【引言】消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样，具有肌肉组织共有的特性如兴奋性、传导性、收缩性，但是表现出与骨骼肌、心肌所不同的特点，既兴奋性低、收缩缓慢、富有伸展性、具有紧张性、自动节律性、对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。 为观察哺
7、乳动物消化道平滑肌的特性，必须给予离体肠肌以接近于在体情况的适宜环境。本实验以台氏液作灌流液。其离子成分和pH与哺乳动物的体液相似。在整个实验过程中，灌流液的温度恒定在38左右并每隔20分钟更换一次灌流液，持续给灌流液供O2。1Introduction：Abnormal Smooth muscle and skeletal muscle and the myocardium was poorly, is characteristic of tissue, such as excitement, and the contract, but show and skeletal muscle and
8、 the myocardium was poorly the different characteristics, both sexually exciting and contracting out, slowly, and full of nervous, spontaneous, in chemistry, and mechanical led a more sensitive excitement, etc. To observe the mammals of the gut Smooth muscle must be given from the heart muscle in on
9、 the body of a suitable environment. this experiment to pour the liquor made Tyrodes Salts Solution ions. the composition and ph and mammals of fluids in the experiment. the flow of fluid and constant temperature is thirty-eight about every 20 minutes and down stream, continued to flow. for the o2.【
10、材料和方法】：1.实验对象：家兔 浙江中医药大学动物实验中心提供。2.实验仪器：恒温水泵、空气泵、固定器、恒温离体小肠灌流装置、温度计、微调固定器、 张力换能器、铁支架、电脑、生物信号采集处理系统、冰箱等木锤、止血钳、手术刀、20ml注射器、手术剪、持针器、手术圆针、缝线、烧杯、手术盘、搪瓷碗等。3.实验药品和试剂：蒂罗德液（即台氏液）：0.8%NaCl、0.02%KCl、0.026%MgSO477H2O、0.0065% NaH2PO4、0.02%CaCl2、0.1%NaHCO3、0.1%葡萄糖溶液。1:10 000肾上腺素、1:10 0000乙酰胆碱、1NHCl、1NNaOH溶液。24.实验
11、方法：将台氏液快速充满空气小泡后，分成两份，一份冷藏于4冰箱, 使其变冷却，简称为预冷台式液；一份分次放入200ml的小烧杯中，然后将其放入恒温水泵中的不锈钢槽内预热至37 38 。按下图安装实验装置，并进行以下操作：图1：实验装置示意图打开恒温水泵，加热台氏液。打开空气泵，调试恒温离体小肠灌流装置内槽台氏液中的气流速度。打开电脑，点击生物信号采集处理系统图标，显示生物信号采集处理系统窗口。选择菜单“实验/常用生理学实验”，“离体小肠平滑肌运动”。并将张力换能器输出线连接到已确定作为记录张力的通道。离体小肠段的制备（1）准备两个小手术盘，一个小手术盘用于清洗肠内容物，另一小手术盘盛预冷台氏液倒
12、入中，其液体量已淹过小肠段为准。（2）用持针器夹持手术圆针、穿线备用。（3）取家兔一只，将其倒提，用木锤猛击后脑勺，使之昏迷，迅速进行以下操作：将其仰卧位固定，用手术剪从剑突下沿腹白线向耻骨联合方向剪开皮肤约5cm长，打开腹壁，暴露腹腔，顺着胃找到与胃相连的十二指肠，沿十二指肠向空肠的方向取出小肠段约30cm，放入一小手术盘中，用注射器抽取预冷台氏液冲洗肠内容物，直至冲洗干净为止。将干净的小肠段放入另一盛有预冷台氏液的小手术盘中，用手术刀刮去肠管外的血管和系膜，将小肠段切割成小段，每小段肠约2cm长，并在小段肠的两端、距断端约1mm处各穿约30cm长的线，注意在操作过程中，每10分钟换一次预冷
13、台氏液。 按图1. 安装离体肠段，具体操作是：（1）取出固定架，将肠段的下端的线头尽量靠近固定架的小钩，并牢固地绑紧在小钩上，将固定架放回内槽，小钩尽量靠近槽底，重新用张力微调器固定固定架，将空气泵重新连接至固定架，并通过固定架将空气输入内槽的台氏液中。（2）将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接, 用张力微调器缓慢升降拉线，保持线有一定紧张度，肠段、线应与地平面垂直，同时，肠段及上端的线头不得碰及槽壁和固定架。（3）换液：打开灌流槽的内槽排水阀门，排去原来的台氏液，用注射器从恒温水泵的小烧杯中抽取被加温的台氏液放入灌流槽的内槽中，其每次用量以淹过肠段的量为准。调节位于固定架尾部的空气流量
14、调节旋钮，使气泡即细小、均匀，又不影响肠段的运动。5. 实验注意事项(1) 必须在准备好充气的4的预冷台氏液和一份预热的台氏液等准备工作后，再制备离体肠段和开始正式的实验。(2) 各种试剂的滴管要有标记，不可混淆使用。6观察指标：小肠平滑肌收缩的频率、收缩和舒张的程度、舒缩强度、舒缩规则性。7.实验观察7.1记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线，观察其收缩活动的特点。向台氏液中加入1NHCl盐酸2滴，观察小肠收缩活动的改变.反应稳定后冲洗2遍。7.2记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线，向台氏液中加入1NNaOH 2滴，观察小肠收缩活动的改变.反应稳定后冲洗2遍。7.3肠活动恢复后，将原37 38台氏液换
15、成等量的25台氏液，观察肠活动的改变, 待其活动改变明显时，冲洗1遍, 再加入等量的37 38的台氏液。7.4肠活动恢复后，向台氏液中加入1:10 000肾上腺素2滴，观察小肠活动的改变, 待反应稳定后冲洗2遍, 再加入等量的37 38的台氏液。7.5肠活动恢复后，向台氏液中加入1:10 000乙酰胆碱2滴，观察小肠收缩活动的改变, 待反应稳定后冲洗2遍。7.6. 待肠活动恢复后，停止空气泵的工作，观察肠活动的改变，待其收缩活动改变明显时反应稳定后冲洗1遍，再加入等量的37 38的台氏液，空气泵描记 一段肠段收缩活动恢复曲线后终止实验。【结果】： 图1 离体家兔肠肌的正常运动曲线。在正常情况下
16、，离体肠肌收缩的幅度、频率、张力、时间及间隔都相对稳定，波形没有明显的变化图2 离体家兔肠肌在停止空气泵后的运动曲线。7.当离体肠肌截断氧其供应时，肠段的运动瞬间增强，但随后其张力曲线下降，振幅减小，频率减慢。图3 离体家兔肠肌加入0.01%乙酰胆碱后的肠段运动曲线。离体肠肌张力曲线明显上升，收缩幅度减小，频率加快。图4离体家兔肠肌加入0.01%肾上腺素后的肠段运动曲线。离体肠肌张力曲线下降至基线水平，并且幅度和频率均减小。图5 离体家兔肠肌加入1Mol/LNaOH后的肠段运动曲线。肠段张力曲线上升，幅度减小，频率加快。图6 离体家兔肠肌加入1Mol/L HCl后的肠段运动曲线。肠段张力曲线下
17、降，幅度减小 ，频率减慢。图7 离体家兔肠肌在23台试液中的肠段运动曲线。离体肠肌的张力曲线下降，并且幅度减小，频率减慢。【讨论】：实验结果图可以看出正常情况下，我们观察到离体家兔小肠平滑肌在台氏液中可以自动的、缓慢的收缩，但其节律性很不规则。31.加入盐酸：离体肠肌活动减弱，作用机制是：细胞外H+升高时，Ca2+通道的活性受到抑制，使得Ca2+内流减少；H+升高能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程：H+能与Ca2+竞争钙调节蛋白的结合位点而使肌球蛋白ATP酶活性降低，使肌原纤维对Ca2+的敏感性和Ca2+从肌质网的释放量减少。32.加入NaOH: 曲线呈上升的情况，即肠肌活动增强。原因是Na
18、OH可以中和H+改变了细胞外液的PH值。PH过高、过低，收缩幅度及张力都会降低，最适PH时收缩效果最好。3.25OC台氏液：肠平滑肌对温度改变极为敏感，当温度下降到25OC左右时，由于代谢水平的降低，兴奋性减弱，可出现收缩曲线基线下移，频率变慢，收缩幅度变小。有时可能会见到基线先上移后下降的现象。这是因为降温本身对肠管是一种刺激，也可短暂地加强代谢活动，所以肌张力升高。当温度高于40OC时，由于酶活性提高，可因蛋白变性，使肠管收缩力功能消失。34.加入肾上腺素：可见离体肠管活动减弱，其机制是：目前认为肠肌细胞膜上存在和两种受体，肾上腺素用于抑制型受体，引起肠肌膜上一种特异性受体活化，使K+外流
19、增多，细胞膜发生超极化，肠肌兴奋性降低，肌张力下降。同时，肾上腺素还作用于受体，它的激活引起肠肌细胞膜中的cAMP合成增多，cAMP激活肠肌膜及肌浆网上的Ca2+泵活动，使肌浆中Ca2+浓度降低，亦使肌张力降低；受体激活后还促使K+及Ca2+外流增加，加速膜的超极化，促进肠肌肌张力的减低。45.加入乙酰胆碱：可见离体肠肌活动增强，由实验记录曲线出现收缩频率变快，幅度增加。其机理是：目前认为与消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+内流有关。乙酰胆碱可与肌膜上的M受体结合，使得两类通道开放：一类为电敏感性Ca2+专用通道，另一类为特异性受体活化Ca2+专用通道。前一类通道对乙酰胆碱敏感，
20、小剂量即可引起开放；后一类相对不敏感，只有大剂量才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中Ca2+增高，进而激活肌纤蛋白-肌凝蛋白-ATPP系统，使平滑肌收缩，肌张力增加。3.6. 停止通氧：氧气对于肠段的运动也有影响。当对肠段停止通气时，由于缺氧，肠段的运动瞬间增强，但由于肠肌有氧呼吸运动障碍，产能不足，从而抑制肠肌运动，使其张力曲线下降，振幅减小，频率减慢。5【结论】：在一定范围内，一定浓度 Ach、NaOH 可促进肠肌的运动；一定浓度的 AD、HCl 可以抑制肠肌的运动；短时低温能使肠肌运动降低后又加强直至正常；短时缺氧能使肠肌运动减弱。给予离体肠肌以接近于在体情况的适宜环境，消化道平滑肌
21、仍可保持良好的生理特性。消化道平滑肌兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感的特点。【参考文献】：1. 陆源、林国华、杨午鸣机能学实验教程2010.62. 张志雄.生理学.上海:上海科学出版社.2006.1133. 杨宝峰.药理学.北京:人民卫生出版社.2010.904. 竺心影 . 药理学 M . 第二版 . 北京 : 人民卫生出版社 ,1986 ,50 - 915. 解景田 ,谢申玲 . 生理学实验 M . 北京 : 高等教育出版社 ,1987. 126 1276.周顺伍 . 动物生物化学 M . 第三版 . 北京 : 中国农业出版社 ,1999.