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1、 综述 !#： $% ,(%92 -1?/A =/B-B ?9+81A=A; /0 - ;AA :=-?CAB, CAB ?89 :BAD+9 AC 8D,-1 -1?/A/901/C/+-1? :BA;B900 /1 -1?/A 91;/199B/1; ，F8/+8 /0 ?89 /1?9;B-?/A1 AC :8-;9 -1 -1?/A =/B-B 8-0 991 -:=/9 F/ /1 /A,9 -1 -:=/+-?/A1 AC :8-;92 -1?/A =/B-B -B9 B9H/9F9 /1 ?8/0 :-:9B90；J1?/A =/B-B；K-11/1; 单克隆抗体的发现是人类医学
2、史上的重大突 破， 其中人源性单克隆抗体是治疗性抗体发展的主 要方向， 迄今为止， 主要历经了 个阶段： 异源抗体、 人源化抗体和人源性抗体， 对医学和生物学的发展 发挥了巨大的作用。然而作为治疗性抗体在人体内 的应用， 鼠源单克隆抗体尚存在一些问题。鼠源性 抗体作为异种蛋白应用于人体可引起免疫应答， 产 生人抗鼠抗体 （LJMJ） $ 。LJMJ 既可影响单克隆 抗体的治疗效果， 又可能诱发过敏反应。另外， 鼠单 克隆抗体通常不能有效激活人体的生物效应功能， 在人体内的半衰期也较短， 解决这些问题的根本途 径是制备人源性抗体 5 。因此， 进入 5% 世纪 N% 年 代后， 随着分子生物学技
3、术的迅猛发展， 抗体工程的 研究兴起即进入了第三代抗体时期。这一时期， 抗 体库技术的创建被誉为是革命性进展， 它最大的特 点是用细菌克隆取代了 I 细胞克隆， 而这项技术的 一个突破性进展， 就是在细菌表面表达的噬菌体抗 体库 （:8-;9 -1?/A =/B-B） 23 。它的出现主要是基 于 KOP 技术的建立和发展、 抗体分子在大肠埃希菌 中的功能性表达及噬菌体展示技术的发展。 一、 噬菌体抗体库 应用噬菌体展示技术构建的抗体库即为噬菌体 抗体库， 包含了 项实验技术：（$） P72KOP 技术， 用 一种引物克隆出全套免疫球蛋白可变区基因；（5） 采 用大肠埃希菌分泌表达具有生物活性
4、的抗体功能片 段；（） 噬菌体表面展示技术的建立。 $ 分别插 入不同的噬菌体载体， 二种重组噬菌体超感染同一 宿主菌， 轻链 9 8; 就可与重链 9 8: 片段通过二硫 键结合形成 ,/0 片段。将噬菌体抗体文库通过特异 性抗原的筛选， 就可以得到含特异性抗体片段的噬 菌体 # 。 和 ?， 在它 们表面能筛选到大量的工程抗体 。理论上讲抗 体库越大， 从中筛选出特异性抗体的可能性就越大。 因此， 若想获得高亲和力的特异性抗体， 就必须在淘 筛过程中严格淘筛条件、 优化淘筛方法， 淘筛方法的 改进是该技术发展的动力之一 ( 。 传统的淘筛方法是先洗脱再感染及在相同载体 上直接感染， 再经反
5、复 “吸附C*5 技术的疾病诊断 和安全检测及蛋白质相互作用等。在抗体治疗学领 域， 最早起源于白喉抗毒素的发现， 随后慢慢应用于 各种疾病的预防和治疗 D 。EFGH 等 .利用噬菌体 展示技术制备了抗 ?I8 抗体， 亲和性高免疫原性 低， 对于预防和治疗乳腺癌和卵巢癌有较大的价值； */F/ 等 !利用 ? 噬菌体抗体库对结核分枝杆菌 的重要蛋白之一热休克蛋白 %J 进行研究， 筛选了 亲和高的人抗体， 为结核病的药物治疗奠定了良好 的基础。在抗病毒抗体研究领域， :AG2HK 等 %建 了狂犬病毒的免疫噬菌体抗体库， 为狂犬病的预防 和治疗奠定了基础。在疾病诊断方面， ;/=/LH 等
6、 对导致老年痴呆症的 M 淀粉神经毒性低聚物进行了 研究， 并利用骆驼免疫单链抗体库对该低聚物进行 抗体的亲和筛选， 研究结果表明获得的抗体可能并 不识别传统的结合位点， 同时也为该疾病的免疫诊 %(国际流行病学传染病学杂志 (# 年 % 月第 . 卷第 H2GK CN=H+O 6GS， QANH (#， TK).， 4) 断提供了研究基础； 噬菌体抗体库也可应用于蛋白 与蛋白相互作用方面， !#$% 等利用噬菌体抗体库技 术对小分子蛋白之间的相互作用进行了相应的研 究， 为传感器的研究提供了实验依据。孔波等 ?:#:?A#: 6:= =#B#C6$#: $?C%:4#?08 D#4 *:，2
7、EEF，2G （2） ： 2E?4 !，!$?J?06:=$ K，L6500# .M， ?$ 648 N?:?A6$#: A?C;#:6:$ 6:$#;=#?0 $ $%? C(4?$? %56: (A$?8 LA?:=0 D#$?C%:4， 2E =#0C：(%6? =#0(468 Q5AA K(#: D#$?C%:4，2EE2， 4#;A6A#?0 50#: (%6? =#0(468 .?$%=0 .4 D#4， 2EE2，46$?A 7，34 9， ?$ 648 9:64O#: $%? (?A#(%?A64 ;4= 6:$#; A?(?A$#A? B 6 C?4#6C =#0?60? (
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