油红染色法.doc

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1、油红染色法油红作为脂肪染色剂,其染色步骤简便,染色结果肯定,并且优于苏丹。试剂配制:油红O 0.5g异丙醇(含量98%) 100ml此为油红饱和液,可长期保存备用。染色步骤:(1) 冻切片(2) 蒸馏水充分洗涤。(3) 油红稀释液染10-15分钟,避光、密封。油红稀释液的配制:(4) 取油红饱和液6毫升,加蒸馏水4毫升,静置5-10分钟后过滤后使用。(5) 60%乙醇镜下分化至间质清晰。(6) 水洗。(7) Marry氏苏木素复染核。(8) 水洗。(9) 甘油或甘油明胶封片。结果:脂肪呈鲜红色,细胞核呈蓝色,间质无色。注意事项:1.油红染色时应避免试剂挥发过多,否则易形成背景沉淀。60%乙醇分

2、化,应于镜下控制至脂肪组织呈鲜红色,间质无色时为度。油红O染色法(Oil Red O Method for Lipofuchsin)适用于中性脂肪染色。染色结果:中性脂肪呈红色 ,胞核蓝色。方法步骤:1 冰冻切片,厚约610UM,蒸馏水稍洗。2 用钩把切片捞入60异丙醇中漂洗2030秒钟。3.取贮备液6ML ,加蒸馏水4ML,混合后静置10分钟,即可用来染色。油红O染时间510分钟。4 60异丙醇稍洗去多余染液,蒸馏水洗。5 Mayer苏木素浅染核6 1盐酸酒精分化。7 水漂洗10分钟或于稀碳酸锂水溶液中促蓝,裱于玻片,把周围水分抹干。8 封片剂封片。注意事项:1 用于脂肪易溶于有机溶剂,所以显示脂肪一般不能象石蜡切片一样处理,而通过冰冻切片染色来显示。2 作脂肪染色的冰冻切片不能太薄,过薄的切片常会使脂质丢失。3 Mayer苏木素复染时间不能过长。4 染色结果不能长期保存,应尽快观察及照相。

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