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1、实验七、白细胞形态观察及分类计数,临床检验诊断学教研室,将血液制成细胞分布均匀的血涂片，用Wright染液染色，根据各类细胞的形态特点和颜色差异将白细胞区别病进行计数。通常分类100个白细胞，计算得出各种白细胞所占的百分率。,掌握显微镜外周血白细胞分类计数方法及各种白细胞的正常形态。,原理,目的,器材 载玻片、推片、洗耳球、显微镜、微量吸管、香柏油、乙醇-乙醚溶液、擦镜纸 试剂 瑞氏染液、磷酸缓冲液 标本 抗凝血,1.血涂片制备 2.染色：将血涂片用瑞氏染液染色， 冲洗干净，自然干燥后待用。 3.低倍镜观察 观察全片，细胞分布和染色情况 4.油镜观察 选择血涂片体、尾交界处细胞分布 均匀、着色
2、良好的区域，滴加香柏油1滴，按一 定方向顺序对所见白细胞进行分类计数，共计数 100个白细胞。 5.计算 求出各类细胞所占的百分率。,操 作,血 涂 片制 备,推片,载玻片,血液,将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度：快、大(厚)。慢、小（薄）,一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾鲜明,涂片干燥后用铅笔在血涂片的头 部写上姓名和编号,李四,B 1 2 3,血 涂 片 染色,滴加瑞氏染色液3-5滴，用洗耳球将液和液轻轻吹混，静置5-10min,直接流水冲洗 （切勿先到掉染液）,干燥后用油镜分类计数100个白细胞,李四123,涂片干燥后加瑞氏染色液3-5滴至覆盖整个血膜，约1min,中性杆状核粒细胞,正常白细胞形态,中性分叶核粒细胞,正常白细胞形态,嗜酸性粒细胞,正常白细胞形态,嗜碱性粒细胞,正常白细胞形态,单核细胞,正常白细胞形态,淋巴细胞,总结,1.血涂片干透后方可染色，否则染色过程中容易脱落。 2.加染液应适量，过少易蒸发形成沉渣，不易观查。 3.冲洗时不能倾倒掉染液，应先以流水冲洗，以防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不宜过久，以防脱色。 4.分类时要沿一定方向连续进行，避免主观选择视野。 5.镜下见到幼红细胞，应计数但不计入100个白细胞中。 6.注意其他细胞形态。,注意事项,1.请分类100个白细胞，并报告结果。 （本次实验课只写作业题）,分析讨论,