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1、药物对离体豚鼠回肠的作用,实验原理（Principle）,ACh,回肠M受体,平滑肌收缩,胞浆Ca2+ ,Ca2+内流,平滑肌Ca2+通道开放,阿托品,回肠M受体,H1受体,组胺,扑尔敏,H1受体,G蛋白,平滑肌收缩,肌浆网释放Ca2+,Ca2+通道,外Ca2+内流,氯化钡,平滑肌收缩,肌浆Ca2+ ,触发肌浆网释放Ca2+,Ba2+经钙通道进入胞浆,胆碱能神经释放ACh,实验目的(Objectives)：,1.掌握豚鼠离体肠肌灌流方法,2.熟悉乙酰胆碱和组胺对肠道平滑肌M胆碱受体和H1受体的激动作用，以及它们的受体拮抗剂阿托品和扑尔敏的阻断作用。,1. 材料与方法(materials and
2、 methods):,1.1 实验动物 豚鼠,1.2 药品与试剂 10-2g/L acetylcholine chloride溶液，1g/L atropine sulfate溶液，10-2 g/L histamine phosphate溶液、10-3 g/L chlorpheniramine溶液、10g/L BaCl2 溶液、台氏液。,1.3 仪器和装置,1.3.1 麦氏浴槽,出水口,进水口,固定钩,麦氏浴槽,1.3 仪器和装置,1.3.2 记录仪器,RM6240C微机生物信号处理系统,1.4.1 用木槌击豚鼠头部致昏死，立即剖开腹腔，找到回盲部，然后在离回盲部1cm处剪断，取出回肠约10cm
3、左右一段，置于氧饱和的台氏液培养皿中，沿肠壁除去肠系膜，然后将回肠剪成数小段（约11.5 cm），用注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净。,1.4 离体肠肌制备,1.4.2 取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角壁处，分别用缝针穿线，并打结。注意保持肠管通畅，勿使其封闭。 1.4.3 肠管固定：取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角壁处，分别用缝针穿线，并打结。注意保持肠管通畅，勿使其封闭。肠管一端连线系于浴槽固定钩上，然后放入37麦氏浴槽中。再将肠管的另一端系结在张力换能器的悬臂梁上。 1.4.4 肠肌稳定：调节张力至1g，稳定1030分钟 。,2.1 ACh 洗脱,2
4、.2 ACh atropine 洗脱,2.3 histamine 洗脱,2.4 chlorpheniramine histamine 洗脱,2.5 BaCl2 atropine,2. 观察项目,3.结果,表1 药物对离体豚鼠回肠张力的影响（g),3.1 Acetylcholine作用于离体豚鼠回肠，其张力由1.1g增至3.5g， 在acetylcholine作用基础上向灌流夜中加入atropine，回肠张力由3.5g 降低至1.1g。见表1和图1。,Ach: acetylcholine,乙酰胆碱 Atr: atropine 阿托品 His: histamine 组胺 Chl:chlorpheniramine 氯苯那敏,图1 药物对离体豚鼠回肠作用,Ach 换液 Ach Atr Ach 换液 His 换液 Chl His Bacl2 Atr 稳定20min (每次换液后稳定10min),4.讨论,4.1 Acetylcholine作用于离体豚鼠回肠使其张力升高，用 atropine后，回肠张力 降低，atropine为肠平滑肌细胞膜上M受体的阻断剂，由此可见， Acetylcholine作用于离体豚鼠回肠平滑肌细胞膜上的M受体使平滑肌收缩。 4.2 ,