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1、一测多评法在中药质量控制中的应用,姓名：徐作军 学号：140703212657,内容,1.概述,随着中药现代化步伐的进一步加快，无论是消费者、药品生产企业、科研工作者还是药品监管机构，都对中药质量提出了更高要求。 现有中药标准多以单一成分含量反映中药产品质量，但中药成分复杂，具有多成分、多靶点的特点，仅以一种成分含量无法全面反映中药质量的优劣，由此提出了多成分质量控制的理念，通过多指标同步质量控制反映中药质量已成为众多专家学者的共识。,传统多指标同步质量控制必然要求众多中药对照品，为实现在中药对照品紧缺、成本高昂的条件下的多指标同步质量控制，王智民等于2006 年首次提出了一测多评法(Quan
2、titative Analysis of Multi-components by Single- maker，QAMS) ，该法可以通过测定易得、价廉、有效的一个成分（作为内参物），实现多个成分含量的同步测定，在降低检测成本的同时解决了对照品不足的问题，日渐成为中药质量评价的新模式。,该方法已在多种中药材、饮片以及中药制剂的多成分含量测定中得到广泛认可和应用，并收载于2010 年版中国药典( 一部)。 QAMS不仅可应用于中药新药的多成分质量研究，也适用于企业对多成分中药类上市产品，特别是对其中间产品进行准确、快速检测，同时检测成本也可大大降低。所以，QAMS是值得推广应用的科学测定法。,2.
3、中药制剂质量控制,中药质量控制是保证中药用药是否有效和安全的关键因素之一，而其研究思路与方法的科学性和现实可操作性决定了其实际控制能力的高低和执行是否有效。 中药质量控制中用到的内参物大多是植物次级代谢产物。活性次级代谢产物是中药发挥其治疗作用的物质基础，因而也是进行质量控制的切入点和关键所在。,3 一测多评法的概念、适用范围及其原理,3.1一测多评法的概念,一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single-marker ，QAMS)是通过中药有效成分间存在的内在函数关系和比例关系，通过测定中药中某个代表性成分（易得、廉价、有效
4、）的含量，依据相对校正因子可计算出该中药中其它多种待测成分（对照品难以得到或难供应）含量，使其计算值与实测值符合定量方法学要求的一种多指标同步质量控制方法。,3.2 一测多评法的适用范围,本方法适用于对照品难得或制备成本高或不稳定的情况下同类多成分同时测定。,3 .3 一测多评法的原理,在一定的线性范围，成分的量(质量或浓度)与检测器响应成正比。在多指标(s，a，b， ，i，)质量评价时，以药材(或成药)中某一典型有效成分作内参物(s)，建立内参物与其它待测成分(a，b， ，i，)间的相对校正因子(RCF，fsa，fsb，fsc，)，按下式计算： 公式(1) 式中fsi为内参物s对待测成分i的
5、校正因子，式中As 为内参物对照品s 峰面积或峰高，Cs为内参物对照品s 浓度，Ai 为某待测成分对照品i峰面积或峰高，Ci为某待测成分对照品i 浓度。,在方法学建立时，主要是求出内参物与各待测成分间的RCF，并把它作为一个常数用于含量测定中药典附录VID 3(3)。在测定含量时，内参物( s) 的浓度可按常规方法( 药典附录D) 进行测定( Cs);应用RCF( fsa，fsb，fsc，) ，结合内参物( s) 实测值Cs，计算待测成分( a，b，i，) 的浓度Ci,见公式（2）。 公式（2） 式中Ai 为供试品中待测成分i 的峰面积，Ci 为供试品中待测成分i 的浓度，As 为供试品中内参
6、物s 的峰面积，Cs 为供试品中内参物s的浓度，fsi为内参物s对待测成分i 的校正因子。,4 一测多评法的应用,4.1 芳香类成分,芳香类化合物包括黄酮类、香豆素、木脂素、蒽醌类等，一般具有较强的紫外吸收，能够很方便地用紫外检测器进行检测。,4.1.1 黄酮类,冠脉康胶囊由葛根、丹参等药材组成，葛根中的异黄酮类成分葛根素、大豆苷元以及丹参中的酚酸类物质丹酚酸B等均为活性药理成分，其中以葛根素为内参物较易得到，而以丹酚酸B为内参物价格较高且供应不足。邹桂欣等以葛根素（异黄酮类）为内参物，建立冠脉康胶囊中该成分与大豆苷元( 异黄酮类) 及丹酚酸B( 苯丙素类) 的CF，用相对校正因子计算大豆苷元
7、及丹酚酸B的含量，与外标法实测值进行比较，二者没有显著性差异。对不同品牌填料及不同长度的色谱柱进行考查，评价一测多评法在中药复方制剂中的准确性和科学性。,4.1.2 香豆素类,冯伟红等以秦皮为研究对象，以秦皮甲素为内参物，建立该成分与秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素( 均为香豆素类) 的相对校正因子。秦皮香豆素一测多评法的计算结果与外标法实测值之间没有显著性差异，实验所得的CF可信。 杨芳等以欧前胡素为内参物，采用HPLC 建立其与异欧前胡素、氧化前胡素( 均为香豆素类) 的相对校正因子，对川白芷实现一测多评。20批药材中3种香豆素含量的计算值与外标法实测值SD 5%，QAMS控制川白芷药材的质量是可
8、行准确的。,4.1.3 木脂素类,贺凤成等以五味子为研究对象，采用HPLC 以五味子醇甲为内参物，建立其与五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素( 均为木脂素类) 的相对校正因子，并计算含量; 同时采用外标法测定13批五味子药材中4 个成分的含量。两种含量没有显著性差异，验证了一测多评法的准确性。,4.1.4 蒽醌类,大黄蒽醌类成分如大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚等化合物的一测多评研究报道较多。,张锴镔等以大黄素为内参物，采用QAMS测定了新清宁片中大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚的含量。20批新清宁片中QAMS计算值与ESM实测值无显著性差异，SD 5%。张德培等选择相同的内参物和指标
9、成分，对酒大黄实现了一测多评。,4.1.5 其他芳香类,孟江等以6-姜辣素为内参物，建立干姜中该成分与6 -姜酚、8 -姜辣素及10-姜辣素(均为单苯环类)的相对校正因子，利用CF计算4种成分的含量，同时采用外标法测定，两种测定结果间无显著差异。28批干姜中4种单苯环类成分可以用一测多评法进行测定。 刘智等以天麻素为内参物，建立其与对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、巴利森苷(均为单苯环类)的CF，对天麻药材实现了QAMS质量控制。,4.2 生物碱类成分,生物碱类化合物分类比较复杂，QAMS文献中报道的多为具有较强紫外吸收的异喹啉类、吲哚类生物碱等。,4.2.1 异喹啉类,QAMS 在小檗碱、巴马汀、
10、黄连碱、表小檗碱、药根碱等异喹啉类生物碱的含量测定中研究报道较多。,匡艳辉等以黄连药材为研究对象，建立小檗碱与巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱的相对校正因子，并用该CF 进行含量计算。28批黄连药材和饮片中5个生物碱的含量测定结果，一测多评计算值与外标实测值间无显著差异。 QAMS 控制黄连药材和饮片的质量是准确可行的。该方法已经被中国药典2010年版(一部) 收录，作为黄连药材质量控制的法定标准。含有黄连的香连制剂( 包括丸、片、胶囊等剂型)和黄连配方颗粒等中药制剂，也可以用QAMS法测定其中小檗碱类异喹啉生物碱的含量。,4.2.2 吲哚类,宋亚芳等以吴茱萸为研究对象，建立吲哚类生物碱吴茱萸
11、次碱与吴茱萸内酯(柠檬苦素类三萜)和吴茱萸碱(吲哚类生物碱)的相对校正因子，进行含量计算; 同时采用外标法测定药材中以上3种成分的含量，并比较QAMS计算值与外标法实测值的差异。11批吴茱萸中两种成分含量的计算值与实测值无显著差异。,4.2.3 哌啶类,胡椒碱为哌啶型生物碱，该类生物碱本身没有共轭体系，但胡椒碱结构中连有其他的芳香环，可用HPLC紫外检测器检测。李岑等以藏药当佐为研究对象，通过建立内参物胡椒碱与其他3个指标成分间的CF，对没食子酸( 单苯环类) 、羟基红花黄色素-A( 黄酮苷类) 、桂皮醛( 苯丙素类) 的含量进行计算，实现了含量测定的一测多评。,4.3 萜类成分,按照所含碳原
12、子数，萜类化合物可分为单萜、二萜、三萜等类别。这类次级代谢产物分子中一般没有较大的共轭体系，因而QAMS文献中一般采用紫外区的末端吸收，或结构中连有的其他共轭体系的紫外吸收进行测定。,4.3.1 单萜类,付滢舟等用气相色谱法，建立了速效救心丸中莰烷类单萜成分异龙脑、左旋龙脑和右旋龙脑的QAMS质控方法。 以右旋龙脑为内参物，建立其与异龙脑、左旋龙脑的相对校正因子，并进行含量测定。所建立的CF重现性良好，一测多评法与现行标准方法的测定结果基本一致。所建立的方法能测定以各种冰片投料生产的速效救心丸中的冰片含量。,4.3.2 二萜类,半日花烷型二萜穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯、脱水穿心莲
13、内酯等是穿心莲的抗炎、抗病毒有效成分。 林青等在建立穿心莲中以上4 种成分同步测定方法的基础上，测定内参物穿心莲内酯与其余3 种二萜的CF，进行一测多评实验，并在穿心莲药材及其制剂消炎利胆片中加以应用。对39 批穿心莲药材和30 批消炎利胆片中4 种二萜进行QAMS 测定，结果与外标法实测值均没有显著性差异。 另外，王贞媛等选择以上相同的4种二萜指标成分，以脱水穿心莲内酯为内参物，对穿心莲片实现了一测多评。,4.3.3 三萜类,朱晶晶等建立了人参皂苷b1与其他8种皂苷，包括人参皂苷g1、e、f、h1、c、b2、b3、d( 均为达玛烷型三萜皂苷) 间的相对校正因子，实现只用一个对照品测定人参和三
14、七中多个人参皂苷类成分的含量，解决了质量控制中对照品供应不足问题。所建立的CF 可同时用于人参、三七及其相关产品的定量分析及质量评价。,4.4 长链脂肪族类成分,李桂秀等采用HPLC以党参药材中党参炔苷( 长链脂肪族苷类) 、党参苷IV(苯丙素苷类) 和苍术内酯III( 桉烷型倍半萜) 为指标，建立党参炔苷与另外两种成分间的相对校正因子，并用所建立的CF计算含量。结果表明该药材中3 种专属性成分可以用QAMS进行测定，实测值与计算值间没有明显差异( SD 4%) 。,5 小结与展望,一测多评法是中药多指标质量控制的一种新颖的模式。在缺乏对照品的情况下，该方法作为一种含量测定的补充方法，能够实现
15、中药整体质量控制。次级代谢产物是中药发挥药效作用的物质基础，也是控制中药质量的关键。,从次级代谢产物的角度来分析，QAMS 仍有很多值得去探索的工作。 （1）、进行一测多评的中药种类有限。中国药典2010年版(一部)收录中药品种2000 余种，而QAMS已报道的中药材、饮片以及中药制剂只有几十种。 （2）、涉及的次级代谢产物种类和数量都比较有限。甾体类和糖类成分均未见报道，芳香类、生物碱类和萜类等成分中研究的化合物数量也很有限。 （3）、评价的指标成分与相应药材的药理作用的相关性研究较少。部分以QAMS研究的中药品种，并未以药效活性成分作为评价指标。这些问题也正是一测多评法值得研究的方向。 作为一种新颖、高效、低成本的整体质量评价方法，一测多评法已经展现出了自身的优势，今后必将在中药质量控制中发挥更大的作用。,谢 谢,