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1、单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版标题样式 单击此处编辑 母版副标题样 式 v癫痫动物模型的制备 2010109116 实验动物学 概述 癫痫流行病学介绍 1 1 癫痫模型制备原理 2 2 不同的癫痫模型制备方法 3 3 讨论与展望 4 4 1.癫痫流行病学介绍 v 癫痫是一种脑部疾患，特点是存在能产生 癫痫发作的脑部持久性改变，并出现相应神 经生物学、认知、心理学以及社会学等方面 的后果。 v 中国癫痫患病率约为7，每年新发病40 万例，患者总数超过900万，其中超过一半 是儿童及青少年。 2.癫痫模型制备原理 v 利用药物制备癫痫模型，通过破环脑部神 经递质释放的平衡，阻断兴奋性氨基
2、酸的循 环通路，从而诱发癫痫形成与发作。 v 利用手术制备癫痫模型，主要用于模拟外 伤后癫痫。具体的发病机制尚不十分明确， 目前研究显示与各神经元细胞之间的突触连 接的改变有关。 3.不同的癫痫模型制备方法 癫痫动物模型 1.药物建模 通过药物注射 的方式建立癫痫 动物模型。 2.手术建模 利用外科手术 的方法建立癫痫 动物模型 3.1药物建模的几种方法 1 注射 合成红藻氨 酸制备大鼠 癫痫模型 2 注射 氯化锂-匹罗 卡品致大鼠 癫痫模型 3 穿刺注射 海人酸杏仁 核点燃大鼠 癫痫模型 3.1.1注射合成红藻氨酸法 v 红藻氨酸(kainic acid, KA)是红海藻的 提取物，可作用于
3、脊椎动物中枢神经系统的 谷氨酸受体,可直接兴奋神经元,又可增强钠 离子的通透性而使神经细胞去极化,诱发癫 痫的发生。 v 利用KA的人工合成品,即合成红藻氨酸 (syn thetical kainic acid, SKA)制作大 鼠癫痫模型。 v 正常Wistar大鼠腹腔注射10mg/kgSKA后约 5min,大鼠出现凝视行为(级), 之分别在约 23min、97min、129min和140min动物顺序出现 -级癫痫发作。3h后症状减轻，7-8小时后 停止，14小时基本恢复正常。 制备过程 方法特点 v 注射合成红藻氨酸诱发大鼠癫痫，SKA 5- 12mg/kg 腹腔注射可诱发大鼠癫痫发作,
4、 以 10mg/kg剂量为佳。 v 合成红藻氨酸诱发大鼠癫痫发作的阶段性 明显、行为学表现规律、稳定,死亡率低， 适宜大规模建立癫痫动物模型 。 3.1.2注射氯化锂-匹罗卡品法 v 注射氯化锂（Licl）和匹罗卡品 (pilocarpine, PI-LO)致癫痫模型在动物行 为、脑电图、病理及药理特性上与人类颞叶 癫非常类似。 v 近年来一直被认为是研究颞叶癫痫的理想 模型。 制备过程 v 正常Wistar大鼠经过腹腔注射LiCl 125mg/kg,18-24h后腹腔注射PILO 20 mg/kg 达到-级发作则为进入癫持续状态 (status epilepticus, SE) ,致成功。
5、v 若无发作或发作未达到-级, 则每隔 30min腹腔注射PILO 10mg/（kg次) ,最多 6次, 其间癫痫发作级的大鼠认为致成功 。 方法特点 v PILO首次剂量为20mg/kg,以后小剂量给 予PILO(10mg/kg), 简单易用，可按个体差 异控制PILO的用量，成功率较高。 v 此方法的致癫痫率和自发发作的出现率 基本一致,明显优于传统方法。是研究颞叶 癫痫的理想模型。 3.1.3穿刺注射海人酸法 v 点燃模型(Kindling model)是通过重复 给予一个首发阈下电或化学刺激引起部分或 全面性癫痫发作的癫痫模型, 具备慢性、自 发性和复发性特征。 v 海人酸(kaini
6、c acid ,KA)具有很强的神 经毒性作用,海马富含KA受体, KA脑内注射 能使动物产生长时间肢体型癫痫发作。 制备过程 v Wistar大鼠麻醉后30min用5L微量注射 器吸KA1L,颅骨穿刺以右侧杏仁基底核为 KA注射部位，速度为1L/min ,留针5min， 以确保药物被完全吸收。 v 实验大鼠在KA杏仁核注射后平均41和 61min分别依次出现部分性发作和癫痫性大 发作 方法特点 v 用KA杏仁核微量注射, 为全身给药点燃用 量的万分之一, 点燃成功率高达90%。 v 点燃一旦建立, 动物的这种脑细胞及惊厥 行为敏感性可长期维持, 是研究脑细胞兴奋 性、可塑性以及学习和记忆、癫
7、痫发病机制 、癫痫外科手术预后判断的理想动物模型 。 3.2机械损伤制备大鼠癫痫模型 v 颅脑外伤是癫痫的常见病因之一。外伤后 癫痫(PTE)的发病机制目前尚未阐明。现有 研究表面，突触重建在PTE的发病发展过程 中起着重要作用。 v 突触素(synaptophysin.p38)和苔藓纤维 (mossy fiber，MF)与突触重建关系密切， 是突触功能和突触重建的重要标志之一。 制备过程 v 正常Wistar大鼠用2戊巴比妥钠 (50mg/kg)腹腔麻醉后，矢状位切开头部皮 肤，剥离颅骨外膜，左侧顶距矢状缝旁 3.5mm，冠状缝后4.0mm处钻一直径3.0mm的 骨窗，保持硬脑膜完整。 v
8、此时接液压打击装置，压强152-202kPa， 时程40-50ms。打击后，缝合头皮，清醒后 自由进食、水。 液压打击手术部位图示 方法特点 v 手术后连续观察实验动物行为三个月，根 据不同等级的癫痫发作，可研究外伤后癫痫 的发病机制。 v 液压脑损伤制备的动物模型，较好的模拟 了人类PTE的显著特征晚期、慢性、反复 、自发性发作。 是研究外伤后癫痫理想的 动物模型。 4.讨论与展望 v 导致癫痫发病的因素非常复杂, 癫痫的发 病类型多, 目前还没有一种动物模型能够模 拟出所有的癫痫发作类型。 v 以上介绍的几种癫痫动物模型，都有其独 特之处。不同方法制备的癫痫动物模型，将 会为癫痫发病机制和治疗的研究做出贡献。 4.讨论与展望 v 导致癫痫发病的因素非常复杂, 癫痫的发 病类型多, 目前还没有一种动物模型能够模 拟出所有的癫痫发作类型。 v 以上介绍的几种癫痫动物模型，都有其独 特之处。不同方法制备的癫痫动物模型，将 会为癫痫发病机制和治疗的研究做出贡献。 THANKS