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1、专题二细胞工程第2节动物细胞工程2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体【学习目标】1. 列表比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同2. 举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。【学习重点】1. 理解和掌握动物细胞融合的原理、过程和意义。2. 理解和掌握单克隆抗体制备的过程的步骤和应用【学习难点】单克隆抗体的制备过程。【教学过程】A、自主学习一、知识网络体系诱导剂： PEG、灭活病毒概念：化学性质单一，特异性强的抗体动物细胞融合制备：免疫后的B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后，再培养主要应用： 单克隆抗体特点：特异性强，灵敏度高，优越性非常明显应用：理论研究；疾病的诊断和治疗二、阅读教材，整合提炼
2、、动物细胞融合1、概念： _或 _动物细胞结合形一个细胞的过程，也称细胞杂交。2、结果：形成_。3、过程两个或多个细胞灭活的病毒或 PEG_ 。4、意义：克服了_ 的不亲和性，成为研究_、 _、肿瘤和_ 培育的重要手段。例 1、动物细胞融合的目的中最重要的是（）A. 克服远源杂交不亲和B.制备单克隆抗体C.培育新物种D.生产杂种细胞 解析 考查动物细胞融合的目的。动物细胞融合就是指不同动物细胞结合形成一个杂种细胞的过程。动物细胞融合技术最重要的用途是制备单克隆抗体。 答案 B例 2、能使动物细胞融合的特有的诱导因子是（）A. 离心B.灭活的病毒C.电刺激D.振动 解析 在体外培养条件下，动物细
3、胞会自发融合，但是频率很低。因此，一般都需要添加具有诱导细胞融合效应的生物药剂或化学药剂，或者采用电融合技术，人为地促进细胞融合。常用的动物细胞融合的诱导因子是聚乙二醇和灭活的病毒。其中聚乙二醇既可用于促进植物原生质体融合，又可用于促进动物原生质体融合。而灭活的病毒只能用于促进动物细胞的融合，如灭活的仙台病毒是最常用的诱导因子，其诱导原理是因为病毒具有侵染细胞的能力，优点是融合率高，对各种动物细胞都适用。 答案 B、单克隆抗体1、抗体产生细胞： _ 。成分： _ 。特点：从 _ 中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。2、单克隆抗体的制备(1) 过程从 _中分未融合细胞给小鼠注射特定的抗原蛋白
4、灭活病毒融合离 B 淋巴细胞_培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞_选择培养基克隆检测小鼠体内培_养体外培养抗体杂交瘤细胞的特点： _、 _ 。单克隆抗体的优点： _、 _ 、_ 。、单克隆抗体的应用1、作为诊断试剂，具有 _、_ 、 _ 、_ 的优点。2、用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗_、可制成 _。例 3、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A. 经过免疫的 B 淋巴细胞B.不经过免疫的 T 淋巴细胞C. 经过免疫的 T 淋巴细胞D.不经过免疫的 B 淋巴细胞 解析 此题考查对细胞工程的了解。单克隆抗体的产生是利用了细胞工程中
5、的细胞融合技术。小鼠的骨髓瘤细胞与经过免疫的B 淋巴细胞融合成杂交瘤细胞， 在体外培养的条件下大量繁殖，产生特异性强的单一抗体。 答案 AA、自主学习阅读教材，整合提炼一、 1、两个；多个2 、杂交细胞3 、结合形成一个细胞的过程4、远缘杂交；细胞遗传；1细胞免疫；生物新品种二、 1、(1) 效应 B 细胞 (2)蛋白质 (3) 血清 2、(1)脾脏细胞；自身融合的细胞；杂种细胞；杂种细胞；单克隆 (2)迅速大量繁殖；产生专一的抗体(3) 特异性强；灵敏度高；产量大三、 1、准确；高效；简易；快速2 癌症；生物导弹三、 重难热点归纳1、 动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同比较项目细胞融合细胞融
6、合的方法诱导手段用途的原理植物体细细胞膜的用纤维素酶、果胶酶离心、电刺激、振克 服 远 源 杂去除细胞壁后诱导原动、聚乙二醇（ PEG） 交不亲和， 获胞杂交流动性生质体融合诱导得杂种植株动物细胞细胞膜的用胰蛋白酶使细胞分除应用植物细胞杂制备单克隆交手段外，还有用融合流动性散后诱导细胞融合抗体灭活病毒诱导2、 单克隆抗体的应用单克隆抗体可以作为诊断试剂，准确识别各种抗原物质，与抗原的特异性结合具有准确、高效、简易、快速的特点。单克隆抗体还可以用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症。单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。B、反馈矫正1、基因型为Aa 与基因型为B
7、b 的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞()AAAaaBAaBbC AabbD BBbb2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是()诱导融合的方法完全相同所用的技术手段不相同所采用的原理完全相同都能形成杂种细胞A. B. C. D. 3、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是()A、可以制成诊断盒用于疾病的珍断B 、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C、可以利用基因工程技术生产D、可以在生物体内生产，不能体外生产4、“生物导弹”是指()A、单克隆抗体B、带有特定药物的单克隆抗体C、杂交细胞D、 B 淋巴细胞5、在克隆羊培育过程中，将雄羊的体细胞核移
8、入雌羊的卵细胞中。产生该克隆羊的方式及该克隆羊发育成熟后所分泌的性激素依次是()A 无性生殖雄性激素B无性生殖雌性激素C有性生殖雄性激素D有性生殖雌性激素6、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合中有特殊性的是()A、融合的原理B、融合的优点C、融合的诱导手段D、融合的过程7、下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中1 过程注射的物质和A细胞的名称为()A、抗体、 T 淋巴细胞B、抗原、 T 淋巴细胞C、抗体、 B 淋巴细胞D、抗 原、效应B 淋巴细胞8、单克隆抗体和血清抗体相比，其优越性在于()A、单克隆抗体能够制成“生物导弹”B、单克隆抗体能够在体外制备C、单 克隆抗体比血清抗体的
9、特异性强、免疫活性高D、单克隆抗体制备过程简单9、单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是()A特异性强、灵敏度高B与抗癌药物结合可制成“生物导弹”C 体外培 养 B 淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D 由效应 B 细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌10、试管婴儿、试管苗、克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果, 下面对其生物学原理及技术的叙述正确的是()A 都属于无性生殖 , 能保持母本性状B都是细胞 工程的技术范围C都充分体现了体细胞的全能性D都不会发生基因重组和变异11、某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关
10、内容，你认为有几处是不正确的()植物细胞工程动物细胞工程技术手段植物组织培养，植物体细胞动物细胞培养和融合，单克隆抗体杂交的制备特殊处理机械法去除细胞壁胰蛋白酶处理，制细胞悬浮液融合方法物理方法，化学方法物理方法，化学方法，生物方法典型应用人工种子，杂种植物单克隆抗体的制备培养液区蔗糖是离体组织赖以生长的动物血清不可缺少别成分A 0B 1C 2D 312、下列关于细胞工程的有关叙述，不正确的是()A利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄 - 马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术，而利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株没有采用植物组织
11、培养技术B在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生细胞脱分化，染色体变异或基因突变，而不可能发生细胞分化和基因重组2C动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体D“试管婴儿”实质上就是“体外受精”和“胚胎移植”的“产物” ，不能使不能产生精子或卵细胞的夫妇能得到自己的孩子； 单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术13、（多选）下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，正确的是()AB 淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B融合后形成的杂交瘤细胞既能大量增殖，又
12、能产生单克隆抗体C体外培养时，一个效应B 淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖D单克 隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性明显14、（多选） 1975 年米尔斯坦和柯勒成功地获得了单克隆抗体。下列细胞中与单克隆抗体的制备有关的是()A. 效应 B 细胞B T 淋巴细胞C.骨髓瘤细胞D杂交瘤细 胞二、填空15、图是某种淋巴细胞，膜外颗粒状物质为抗体。据图回答：（ 1）这是细胞，它是由分化而来的。（ 2）抗体从开始合成到分泌出细胞，经过的细胞结构顺序是（填标号）。抗体的分泌说明细胞的各种生物膜在结构上具有，并以的形式转变。（ 3）在分泌抗体时要消耗由提供的能量。（ 4）抗体的化学本质是
13、，它能与发生特异性结合，发挥免疫效应，该过程属于免疫。（ 5）若该抗体是单克隆抗体，则该细胞名称为。在制备单克隆抗体的过程中，要应用的动物细胞工程的技术手段是。15、效应 B 细胞B淋巴细胞或记忆细胞一定的连续性2囊泡6线粒体球蛋白抗原体液杂交瘤细胞动物细胞融合16、英国科学家米尔斯坦和科勒在前人工作的基础上，利用小鼠的骨髓瘤细胞与某种B 淋巴细胞，产生杂交瘤细胞，通过杂交瘤细胞增殖产生了单克隆抗体。现在我们能不能利用此题原理生产人的胰岛素呢？黑人妇女海拉的宫颈癌细胞分离建立了“海拉细胞系” 至今已有半个世纪，仍然在世界上许多实验室广泛地传代使用。能否利用“海拉细胞系”提供的细胞和胰岛B 细胞
14、产生 “杂交瘤细胞”，经“杂交瘤细胞”产生胰岛素呢？理论上应该是可行的，现在假如可行的话，请按照细胞工程的原理回答下列有关问题。（ 1）首先是获取胰岛B 细胞：从胰腺中取得了胰岛的部分细胞，要使分离，应当使用酶。（ 2）要将胰岛A 细胞和胰岛B 细胞分开最好是利用培养基。（ 3）获取了胰岛B 细胞后，要使它与“海拉细胞系”融合最好用诱导。（ 4）要确定“杂交瘤细胞”是否成功，首先应先看能否；其次是看其能否产生。16、胰蛋白选择性灭活的病毒大量增殖胰岛素17、下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：(1) 图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术
15、手段是_ 。(2) 图甲中过程常在 _ 诱导下完成，过程与体外培养相比，其优点是_ 。(3) 单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其_ 。(4) 若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗?_。原因是 _ 。(5) 图乙过程的技术具有多种用途，但是不能()A有选择地繁殖某一性别的家畜B繁殖家畜中的优良个体C用于保存物种D 改变动物的核基因(6) 在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是()A卵细胞大，便于操作B卵细胞含有的营养物质多C 卵细胞 的细胞质可使体细胞
16、胞核全能性得到表达D重组细胞才具有全能性17、(1) 动物细胞培养(2)聚乙二醇 ( 或灭活的病毒，物理方法如离心、振动、 电刺激也可 )不需特定的培养基， 不需严格的外界环境条件(3)特异性(4)不完全是卵细胞质的遗传物质也3能控制某些性状(5)D (6)C18、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：该方案能达到预期效果吗？。原因是_ 。图中为 _ 过程，常用 _ 作为诱导剂。该细胞继承了_ ，因此不仅能分泌_，还有 _ 本领。该方案的目的是_ 。鼠的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后, 在培养时通过_（有丝 / 减数）分裂方式大量繁殖。细胞中染色体数目与淋
17、巴细胞相比有何特点？ _ ；要观察融合后的细胞中的染色体形态、数目 , 可用一定浓度的_ 处理。18、（ 1）不能没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的 B 淋巴细胞（2）动物细胞融合灭活病毒（或 PEG）双亲细胞的遗传物质特异性抗体在体外培养条件下大量增殖（3）制备单克隆抗体（4）有丝 , 加倍 , 龙胆紫19、右图为细胞融合的简略过程，请据图回答：（ 1）若 A、 B 是植物细胞，在细胞融合之前已用_ _ 处理，除去了 _；由 A、 B 到细胞 C的过程中，常用的物理方法是_ 。融合完成的标志是_ 。（ 2）若 A、 B 是植物细胞，则形成的 D 细胞还要应用 _ 技术把 D 培养
18、成植株。（ 3）若 A、 B 是动物细胞，一般取自 _ ，然后用使其分散开来；由A、 B 到 C 的过程中，常用的不同于植物细胞融合的手段是，所形成的D 称为， A、 B 融合为 C 的过程说明了细胞膜具有。（ 4）若该过程是制备单克隆抗体，A 为小鼠效应B 细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已经被注射了。注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了_ ，图中 B 为。（ 5）若该过程仍是制备单克隆抗体，在 A、 B 到 C 的过程中，所形成的 C 有 _种，用来培养的 D 细胞应该是 _。从中选择出它的方法是 _ 培养，获得 D后，常用的培养方法是培养液中培养和_ 。（ 6）若 A 为人细胞，
19、 B 为鼠细胞，并分别用红、绿荧光染料标记细胞膜上的蛋白质，在C 细胞时，细胞一半发红色荧光，一半发绿色荧光。到D 细胞阶段，两种颜色的荧光均匀分布，请解释原因。 _ 。19、纤维素酶和果胶酶细胞壁电激、 离心、振动产生新的细胞壁植物组织培养动物胚胎或出生不久的幼龄动物的组织或器官胰蛋白酶灭活的病毒杂交细胞一定的流动性 抗原效应 B 细胞、记忆细胞、 抗体骨髓瘤细胞 3杂交瘤细胞用特定选择培养基小鼠腹腔内增殖（ 6）细胞膜上的蛋白质是可以移动的。高二年级生物导学提纲选修3（八）选修班的参考答案A、自主学习阅读教材，整合提炼一、 1、两个；多个 2 、杂交细胞3 、结合形成一个细胞的过程4、远缘
20、杂交；细胞遗传；细胞免疫；生物新品种二、 1、 (1)效应 B 细胞 (2)蛋白质(3)血清2、 (1)脾脏细胞；自身融合的细胞；杂种细胞；杂种细胞；单克隆(2)迅速大量繁殖；产生专一的抗体(3)特异性强；灵敏度高；产量大三、 1、准确；高效；简易；快速2 癌症；生物导弹B、反馈矫正题号1234567891011121314答案CCDBACDCCBBCBCDABCD15、效应 B 细胞 B 淋巴细胞或记忆细胞一定的连续性2囊泡 6线粒体球蛋白抗原体液杂交瘤细胞动物细胞融合16、胰蛋白选择性灭活的病毒大量增殖胰岛素17、(1)动物细胞培养(2)聚乙二醇 ( 或灭活的病毒，物理方法如离心、振动、
21、电刺激也可 )不需特定的培养基， 不需严格的外界环境条件(3)特异性 (4)不完全是卵细胞质的遗传物质也能控制某些性状(5)D(6)C18、（1）不能没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B 淋巴细胞（2）动物细胞融合灭活病毒（或PEG）双亲细胞的遗传物质特异性抗体在体外培养条件下大量增殖（ 3）制备单克隆抗体（4）有丝 , 加倍 , 龙胆紫19、纤维素酶和果胶酶细胞壁电激、 离心、振动产生新的细胞壁植物组织培养动物胚胎或出生不久的幼龄动物的组织或器官胰蛋白酶灭活的病毒杂交细胞一定的流动性 抗原效应 B 细胞、记忆细胞、 抗体骨髓瘤细胞 3杂交瘤细胞用特定选择培养基小鼠腹腔内增殖（ 6）细胞膜上的蛋白质是可以移动的。4