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1、附件1 毕业设计（论文）任务书 课题名称 广西部分猪场致病性大肠杆菌多重耐药性的研究 学 院 动物科学技术学院 专 业 动物医学 班 级 2007级（1）班 学 号 0734130112 姓 名 指导教师（签名） 年 月 日教研室主任（签名） 年 月 日一、课题的内容和要求：大肠杆菌是猪肠道内的常见细菌，体弱和幼龄猪受气温变化或事物变化等因素的影响时，肠道内的这些条件性病原菌便大量繁殖，引起肠道疾病。本课题通过采集广西地区猪场的仔猪的胃肠内容物、粪样等作为病料进行细菌分离培养。通过对所分离的细菌进行培养特性、菌体形态特征观察，以及生化鉴定等，确定为大肠杆菌。并对大肠杆菌进行PCR诊断，测定是否
2、含有毒力基因。用小鼠进行致病性试验，确定是否为致病性大肠杆菌。再制备各种抗菌药片进行药敏试验，并筛选出多重耐药菌株。再从正常大猪肠道内分离细菌，经鉴别培养基确定为大肠杆菌的，做同样的药敏试验，将结果与从小猪体内分离出来的大肠杆菌的药敏试验结果作对比，旨在了解和掌握猪群中大肠杆菌耐药菌株的产生情况和耐药程度，为临床用药提供科学依据。二、设计的技术要求与数据（或论文主要内容）： 本实验通过对所分离的细菌进行培养特性、菌体形态特征观察，以及生化鉴定、PCR检测、动物实验以及药敏试验，并筛选出多重耐药菌株，旨在了解和掌握猪群中大肠杆菌耐药菌株的产生情况和耐药程度，为临床用药提供科学依据。同时也为进一步
3、探索耐药质粒流传规律，研究多重耐药机制奠定基础，为消除其抗药性提供参考依据。三、设计（论文）工作起始日期：自 2011 年 2 月 18 日起，至 2011 年 5 月 29 日止。四、进度计划与应完成的工作：2011.02.182011.02.23 查阅与猪大肠杆菌耐药性相关文献，确定好研究方向及实验方案。2011.02.242011.02.26 准备好实验所需的仪器设备，制作鉴别培养基。2011.02.272011.03.22 每周一次从广西各个地区猪场采集病料进行分离纯化， 4C保存备用。2011.03.232011.05.10 细菌生化试验，PCR检测细菌毒力基因，药敏试验，小白鼠试验
4、。 2011.05.112011.05.15 论文数据整理并统计分析，查阅相关文献。2011.05.162011.05.20 论文撰写、修改，实验修正。2011.05.212011.05.29 论文定稿。五、主要参考文献、资料：1 薛原，张秀英，陈建飞，王贵霞，张彦龙，猪源大肠杆菌多重耐药性的检测和分析，中国兽医杂志2010（第46卷）第3期,41-42页2 包幼迪，质粒快速检测和药敏试验，福建医学院学报（增刊），1983:1011083 Khan A,Dass C,Ramamurthy T,et al.Antibiotic resistance,virulence gene,and mole
5、cular profiles of shiga toxin producing Escherichia coli isolates from diverse sources in calcutta J.J Clin Microbiol,2002,40(6):2009-2015.附件2 广西大学本科生毕业设计（论文）开题报告学号0734130112学生姓名杨晓红学院动物科学技术学院专业年级动物医学2007（1）班指导教师刘芳职称高级实验师设计（论文）题目广西部分猪场致病性大肠杆菌多重耐药性的研究本课题国内外研究动态及意义：猪大肠杆菌病是由原性大肠杆菌引起的仔猪肠道传染性疾病。常见的有仔猪黄痢、仔
6、猪白痢和水肿病三种，以发生肠炎、肠毒血症为特征。仔猪黄痢又称早发性大肠 杆菌病，17日龄仔猪发生的一种急性、高度致死性的肠道传染病。仔猪白痢由大肠杆菌引起的 1030日龄左右仔猪多发的急性消化道传染病。临床上以排腥臭的灰白色粥样稀便为主要特征，发病率高，死亡率低。本病在世界各地流行。一般没有季节性，寒冬和炎夏潮湿多雨季节发病多。猪场集约化饲养发病严重，分散饲养的发病少。主要是带菌母猪由粪便排出病原体菌，散布于外界，污染母猪的乳头和皮肤。仔猪吮乳或舔母猪时感染。下痢的仔猪随粪便排出的病菌随水、饲料和用具污染其它母猪，形成新的传染源。本实验通过对所分离的细菌进行培养特性、菌体形态特征观察，以及生化
7、鉴定、PCR检测、动物实验以及药敏试验，并筛选出多重耐药菌株，旨在了解和掌握猪群中大肠杆菌耐药菌株的产生情况和耐药程度，为临床用药提供科学依据。同时也为进一步探索耐药质粒流传规律，研究多重耐药机制奠定基础，为消除其抗药性提供参考依据。毕业设计(论文)研究内容、拟解决的主要问题：猪大肠杆菌病在世界各地均普遍存在，是仔猪最常见的传染病，造成严重的经济损失。许多养殖场由于常年频繁使用抗生素，导致大肠杆菌对大部分的抗生素都产生了一定的耐药性，通过药敏试验来检测不同抗菌药物的敏感性，以选择出有效药物用于预防和治疗这种疾病，为养殖业提高经济效益。毕业设计(论文)研究方法、步骤及措施：1. 准备好实验所需的
8、仪器设备，制作鉴定培养基，配制好相关的试剂。2.每周一次从广西各个地区猪场采集病料进行分离纯化，4C保存备用。 3. 细菌生化试验，看是否符合大肠杆菌的生化特性。 4. PCR检测，是否含有大肠杆菌毒力基因。 5.药敏试验，检测不同抗菌药物的敏感性，并筛选出多重耐药菌株。 6.小白鼠试验，确定是否为致病性大肠杆菌。 7.统计数据，进行结果分析与讨论。主要参考文献：1王洪武，田光，韩志海，郝秀红，古咚咚，156例大肠杆菌要敏结果分析，海军总医院学报1998年第11卷第1期.2江文正，韩文瑜，猪致病性大肠杆菌的药敏试验报告，吉林畜牧兽医1998年第6期，433 Khan A,Dass C,Rama
9、murthy T,et al.Antibiotic resistance,virulence gene,and molecular profiles of shiga toxin producing Escherichia coli isolates from diverse sources in calcutta J.J Clin Microbiol,2002,40(6):2009-2015.是否可以进入设计（论文）研究：指导教师签名：年 月 日是否可以进入设计（论文）研究：教研室(系、研究所)主任签名：年 月 日附件3 广西大学本科生毕业设计（论文）进展情况记录学院： 动物科学技术学院 专业 动物医学 年级 2007级 姓 名 杨晓红 周 次工 作 情 况 记 录指导教师签字第一周第二周第三周第四周第五周第六周第七周第八周 广西大学本科生毕业设计（论文）进展情况记录学院： 动物科学技术学院专业： 动物医学 年级 2007级 姓 名 杨晓红 周 次 工 作 情 况 记 录指导教师 签字第九周第十周第十一周第十二周第十三周第十四周第十五周第十六周(注：第一周统一为开始做论文的第一周)