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1、枯草芽孢杆菌论文抗原蛋白枯草芽孢杆菌的筛选论文：降解大豆抗原蛋白枯草芽孢杆菌的筛选及发酵条件摘要：用不同来源的株枯草芽孢杆菌菌株发酵生豆粕，筛选到1株对大豆抗原蛋白伴球蛋白和球蛋白的降解能力均较强的菌株。采用菌株发酵生豆粕，对发酵条件进行值、接种量、料水比三因素三水平研究，发现在值为，接种量为，料水比为，菌株可降解以上的抗原蛋白。关键词：枯草芽孢杆菌；发酵；大豆；抗原蛋白；降解 ing ， ， （ ； ， ， ， ）： fermentate ， ， ， .0， ： ； ； ； ； 大豆粕蛋白质含量高达，含有人体所必需的种氨基酸，为全价蛋白源，在动物饲料及人的高蛋白营养保健品中常作为优质原材料。
2、但生大豆中含有多种抗营养因子，且所含的主要蛋白质伴球蛋白及球蛋白均为大分子蛋白质，有很强的抗原性，能激起特异的免疫应答，食用后不仅会导致血清中抗大豆免疫球蛋白滴度的升高，而且会造成小肠局部发生器质性的损伤。试验通过豆粕发酵试验，筛选出1株对抗原蛋白降解能力较高的枯草芽孢杆菌，最大程度地将大分子的抗原蛋白降解为小分子蛋白，从而提高豆粕的食用安全性和蛋白质的利用消化力。材料与方法试验材料试剂抽提缓冲液（ ，值）。原料新鲜生豆粕（购自东海粮油）。菌株及培养基枯草芽孢杆菌，培养基（含蔗糖）。试验方法降解大豆抗原枯草芽孢杆菌的筛选）试验菌种的准备。将枯草芽孢杆菌菌株分别接入斜面活化，再分别转接入液体培养
3、基中，在摇床中培养 作为液体菌种备用。）豆粕发酵试验。称量豆粕 ，将菌株以和的接种量分别接入生豆粕中，加 l水混合均匀。将以上混合物装入 l阔口罐头瓶，并用塑料薄膜封好，恒温箱中静置发酵。）发酵样品抗原蛋白残留率测定。将未发酵豆粕及菌株发酵的豆粕样品在烘箱中烘干。每种样品各称取 ，加入 l 的抽提缓冲液研磨匀浆，修正各样品值为，浸泡 后离心（转速 ，时间 ）去渣，调节上清液值为，离心（转速 ，时间 ），干燥称重即为各样品中抗原蛋白的质量，抗原蛋白的残留率按下式计算：菌株的豆粕发酵条件的初步研究）单因子试验。在温度为，以接种量、料水比及值个因素的不同水平发酵大豆粕，测定各发酵样品的抗原蛋白残留率
4、。）正交试验。在单因子试验的基础上，选取接种量、料水比及值各个水平，再设计正交试验，优化发酵条件，测定各发酵样品的抗原蛋白残留率。结果与分析降解大豆抗原蛋白枯草芽孢杆菌的筛选结果表结果显示，菌株发酵的样品中抗原蛋白的残留率高，这些菌株降解抗原蛋白的能力较差。，菌株发酵的样品中在的接种量下，抗原蛋白的残留率很低，这些菌株降解抗原蛋白的能力较强。其中菌株在及的接种量下，抗原蛋白的残留率均达到最低，故菌株为降解大豆抗原蛋白效果最好的菌株。菌株发酵条件初步研究结果接种量试验结果温度为，料水比为，值为条件下，不同的接种量发酵生豆粕，测得不同发酵样品中抗原蛋白的残留率见表。根据表，的接种量下，发酵样品的抗
5、原蛋白的残留率较大，而的接种量下发酵样品中抗原蛋白的残留率均大大降低，且差异不明显。料水比试验结果温度为，接种量为，值为条件下，不同的料水比发酵生豆粕，测得不同发酵样品中抗原蛋白的残留率见表。根据表，料水比为2、时，发酵样品中的抗原蛋白的残留率均较高；料水比为、8、10时，发酵样品中抗原蛋白的残留率大为降低，且差异不明显。值试验结果温度为，接种量为，料水比为时，在不同值下发酵生豆粕，测得不同发酵样品中抗原蛋白的残留率见表。根据表，值为时发酵样品抗原蛋白的残留率最低。4正交试验结果接种量、料水比及值三因子三水平正交试验结果见表。根据表中极差值大小，可以看出料水比对抗原蛋白的残留率影响最大；在的接
6、种量范围内，接种量对发酵样品中抗原蛋白的残留率影响较小；值在范围内，对发酵样品中抗原蛋白的残留率影响也较小。且通过表可直接得出，在值为，接种量为，料水比为.0时，发酵样品的抗原蛋白的残留率最小。抗原蛋白残留率测定结果的验证试验中抗原蛋白的残留率均为多个重复的平均值，且抗原蛋白的残留率测定结果可以用电泳结果来验证（图）。小结与讨论 大豆抗原蛋白严重影响饲喂动物的生长发育，消除大豆抗原蛋白，并增加饲料中小肽的含量，在减少对动物生长发育影响的同时，可提高饲料的价值，国内外在此方面已经有较多的研究。张智等、管风波等、吴晖等通过大豆粕发酵产蛋白酶研究了枯草芽孢杆菌不同菌株的发酵能力；程天德等的研究结果表
7、明，利用枯草芽孢杆菌发酵大豆粕，可以降解的大豆蛋白质。试验筛选到1株对大豆抗原蛋白降解能力较强的菌株，通过对发酵条件的初步优化，大豆抗原蛋白的降解率可高达到以上，优于目前文献上报道最好的抗原蛋白降解率的结果，具有较好的应用前景。接种量、料水比和值是影响枯草芽孢杆菌降解大豆抗原蛋白的主要因素，也影响到发酵饲料产品后期干燥的工艺成本。试验对发酵条件的初步优化，发现在的接种量、的料水比、值的条件下，所筛选到的菌株对抗原蛋白的降解能力最强，接种量及值与文献研究的结果类似，但料水比只需达到，优于他们料水比的研究结果，可以减少发酵产品干燥过程中的能量损耗。抗原蛋白的残留率是评价发酵工艺是否优异，发酵饲料是
8、否达到标准要求的一个重要指标，目前为止，还没有严格的标准来测定发酵豆粕饲料中抗原蛋白的含量。为了快速、准确、高通量地测定发酵饲料产品中抗原蛋白的含量，试验第一次采用抗原蛋白残留率来判断发酵结果。抗原蛋白的残留率是否有意义与抗原蛋白的提取率密切相关，因此需要找到一种大豆抗原蛋白提取率比较高的提取方法，试验采用的是文献的提取方法，抗原蛋白的提取率可达。参考文献： 张乃锋，王中华反刍动物小肽的营养研究进展草食家禽，（）： 冯立志大豆中的抗营养因子饲料工业，（）： ， ： ，： ， ，： ，： 张智，朱宏亮，钮宏禹，等响应面法优化枯草芽孢杆菌产蛋白酶的发酵条件食品科学，（）： 管风波，宋俊梅枯草芽孢杆菌发酵豆粕产蛋白酶活性的研究饲料工业，（）： 吴晖，卓林霞，解检清，等发酵条件对枯草芽孢杆菌发酵豆粕中的蛋白酶活力的影响现代食品科技，（）： 程天德，戴必胜，冯小军枯草芽孢杆菌蛋白酶水解大豆蛋白的研究中国食品工业，（）： 卓林霞，吴晖，刘冬梅枯草芽孢杆菌发酵豆粕产蛋白酶优化试验研究粮食与饲料工业，（）：