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1、实训（实验）课程授课计划科目：微生物检验 任课教师： 授课时间 年 月 日授课时数4实训题目细菌的单染和复染目标要求1、 掌握单染色的操作技术2、观察细菌的基本形态实训（实验）内容单染：1、 涂片：取一片干净无油载玻片，在其中央滴一滴无菌水，然后用接种环以无菌操作方法取少许培养好的大肠杆菌，放在载玻片的水滴中涂匀，注意菌量不宜过多，否则，不易看清单个菌体。2、固定：将涂好的玻片在空气中风干或火焰上通过34 次，使水份蒸发，此时细菌菌体紧贴在玻片上。3、染色：用石炭酸品红或结晶紫染色剂3060S，然后用洗瓶轻轻冲洗染色剂（注意不要直接冲洗染色部位），直至无多余的染液，晾干或用吸水纸从旁吸干或用微
2、火烘干。4、用同样方法将枯草芽孢杆菌制作一张涂片。5、镜检：首先在低倍镜下找到物像，然后在涂膜中央滴一滴香柏油，换成油浸镜观察两个菌种的形态和排列。6、去除油镜上的香柏油：先用干净的擦镜纸擦2-3 次，再换另一张擦镜纸蘸取少许二甲苯以除去残留的香柏油，最后用擦镜纸擦干。擦镜头时应顺着镜头直径方向擦，不要沿着圆周方向擦。复染：1、 取培养12-24h的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌分别涂片、固定。2、加草酸铵结晶紫染色剂一滴，染色1 分钟。3、倾去染液并用洗瓶装水轻轻冲洗。4、镜检：首先在低倍镜下找到物像，然后在涂膜中央滴一滴香柏油，换成油浸镜观察两个菌种的形态和排列。实训（实验）所用仪器材料菌种：1、大肠杆菌、金黄葡萄球菌2、染色液 石炭酸品红染色，结晶紫染色液，吕氏美兰，革兰氏碘液， 95%的酒精3、无菌水4、显微镜、香柏油、接种环、酒精灯、擦镜纸、吸水纸5、洗净的载玻片（Slicle）5片