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1、-精选文档 -名词解释汇总1. 分子杂交不同的 DNA片段之间， DNA片段与 RNA片段之间，如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性， 形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。2. cDNA文库以 mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA ，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体） 连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA ，并能繁殖扩增， 这样包含着细胞全部 mRNA 信息的 cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。 cDNA 文库特异地反映某种组织或细胞中，在特定发育阶段表达的蛋白质的编码基因，因此cDNA 文
2、库具有组织或细胞特异性。3. 选择标记基因选择基因（又称选择标记基因），主要是一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因，这种基因在执行其选择功能时，通常存在检测慢（蛋白酶作用需要时间）、依赖外界筛选压力（如抗生素、除草剂）等缺陷。4. ORF开放阅读框 (OpenReadingFrame,ORF) 从起始密码子开始，是DNA 序列中具有编码蛋白质潜能，一段无终止密码子打断的碱基序列。5. 转化转化（ transformation）是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA 而使它的基因型和表现型发生相应变化的现象。该现象首先发现于细菌。6. 转染专指感受态的大肠杆菌细胞捕
3、获和表达噬菌体DNA 分子的过程可编辑-精选文档 -7.转导转导（ transduction）由噬菌体将一个细胞的基因传递给另一细胞的过程。它是细菌之间传递遗传物质的方式之一。其具体含义是指一个细胞的DNA或 RNA 通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中。8. 质粒不亲和性在没有选择压力下，两种不一样的质粒不能在同一宿主细胞系中稳定共存的现象9. RACERACE 是基于 PCR 技术基础上由已知的一段cDNA 片段，利用锚式PCR ，快速扩增 cDNA末端从而获得已知mRNA内一段小序列与3 或 5 的 cDNA序列技术。10. 基因工程在分子水平上进行遗传操作，指将一种或多种微生物的基因或
4、基因组提取出来，或人工合成基因，按人们的愿望， 进行严密的设计， 经过体外加工重组， 转移到另一种生物体的细胞中，使之能在受体细胞遗传并获得新的遗传性状的技术11. RT-PCRmRNA在逆转录酶的作用下得到cDNA第一链，让后直接以其为模板，用特定引物进行PCR 的技术12. 插入失活载体的标记基因常常含有一个或多个限制酶酶切位点，若用限制酶去处理这些位点并插入一段外源基因，该位点处基因出现无法正常表达的现象成为插入失活13. SD 序列mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。SD 序列在细菌mRNA起始密码子AUG 上游7-12 个核苷酸处， 有一段富含嘌呤的碱基序列，能与细菌 16SrR
5、NA的 3 端识别， 帮助从可编辑-精选文档 -起始 AUG 处开始翻译。14. 穿梭质粒载体穿梭质粒是指一类具有两种不同复制起点和选择标记，因而可以在两种不同类群宿主中存活和复制的质粒载体。15. 多克隆位点（ MCS ）载体上人工合成的含有多个限制酶酶切位点的DNA 片段16. Southern 印迹Southern 印迹杂交是进行基因组DNA 特定序列定位的通用方法。其基本原理是：具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原则特异性地杂交形成双链。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA 变性并在原位将单链 DNA 片段转移至尼龙膜或其他固
6、相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量17. Western 印迹western印迹是指将蛋白质样品经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，然后转移至到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，然后用抗体通过免疫学反应检测目的蛋白，分析基因的表达程度。18. Northern印迹Northern印迹杂交（ Northern blot）。这是一种将RNA 从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。DNA印迹技术由Southern于 1975年创建，称为Southern印迹技术，RNA 印迹技术正好与DNA相对应，故被称为North
7、ern印迹杂交，与此原理相似的蛋白质印迹技术则被称为Western blot。19. Cosmid载体 / 黏粒可编辑-精选文档 -指带有黏端位点(cos) 的质粒。黏粒是由人工构建的含有噬菌体 DNA的 cos 序列和质粒复制子的载体。20. 探针（ probe ）探针是一小段单链DNA 或者 RNA 片段（大约是20 到 500bp ），用于检测与其互补的核酸序列。21. TmDAN 变性温度， 加热 DNA 溶液，使其对 260nm紫外线吸光度突然增加，达到最大值一半时的温度22. DNA变性DNA 变性是指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂，双链变成单链，从而使核酸的天然构象和性质发生改变。
8、变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂，碱基间的堆积力遭到破坏，但不涉及到其一级结构的改变。23. DNA 复性DNA 的复性指变性DNA在适当条件下，二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象，它是变性的一种逆转过程。热变性DNA 一般经缓慢冷却后即可复性，此过程称之为 退火 (annealing）。24. 分子杂交不同的 DNA片段之间， DNA片段与 RNA片段之间，如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性， 形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。25. 操纵子操纵子（ operon ）：指启动基因、操纵基因和一系列紧密连锁的结构基
9、因的总称。可编辑-精选文档 -26. 启动子启动子是位于结构基因5 端上游的DNA序列，能活化RNA 聚合酶，使之与模板DNA 准确的结合并具有转录起始的特异性。27. 增强子增强子 (enhancer)指增加同它连锁的基因转录频率的DNA 序列。28. 因子因子 factor为存在于大肠杆菌中的，在遗传信息转录的终止阶段起作用的蛋白性因子。29. 粘性末端被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，它们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。30. 平末端当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA 两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端31. DNA 连杆32.
10、DNA 接头一段短的含酶切位点并能与钝性末端或粘性末端匹配的人工合成DNA 片段。33. cDNA为具有与某mRNA( 信使 RNA) 链呈互补的碱基序列的单链DNA 即 complementary DNA之缩写，或此DNA 链与具有与之互补的碱基序列的DNA 链所形成的DNA 双链。34. 感受态细胞能够从周围环境中摄取DNA 分子，并且不易被细胞内的限制性核酸内切酶分解时所处的一种特殊生理状态称感受态可编辑-精选文档 -35. 转换子36. 蓝白斑筛选蓝白斑筛选是一种基因工程 常用的细菌 重组子 的筛选方法。野生型大肠杆菌（E.Coli ）产生的 -半乳糖苷酶 可以将无色化合物X-gal
11、(5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 - -D- 半乳糖苷 )切割成 半乳糖和深蓝色的物质5- 溴-4- 靛蓝。 5- 溴-4- 靛蓝可使整个菌落产生蓝色变化。突变型大肠杆菌缺少完整的- 半乳糖苷酶，在含有互补片段质粒作用下，可形成完整的- 半乳糖苷酶，插入外源基因的质粒则破坏了半乳糖苷酶的编码，从而通过颜色变化筛选重组子。37. 星活性星活性又称Star 活性。是指由于反应条件不同而产生的切断与原来认识序列不同的位点的现象，也就是说产生Star 活性后，不但可以切断特异性的识别位点，还可以切断非特异性的位点。产生Star 活性的结果是酶切条带增多。38. 同裂酶同裂酶的切割位点可能不同，识别
12、序列和切39. 同尾酶同尾酶，切割不同的DNA 片段但产生相同的粘性末端 的一类 限制性内切酶 。40. YACYAC 载体主要是用来构建大片段DNA 文库，特别是用来构建高等真核生物的基因组文库，并不用作常规的基因克隆。YAC 带有天然染色体所有的功能元件，包括一个着丝粒，一个DNA 复制起点，两个端粒。YAC 能够容纳长达几百kb 的外源 DNA ，这是质粒和黏粒办不到的。大片段的插入更有可能包含完整的基因，在染色体步移中每次允许更大的步移距离，同时能够减少完整基因组文库所需的克隆数目。可编辑-精选文档 -41. 受体细胞受体细胞是指在转化和转导（感染）中接受外源基因的宿主细胞。42. 噬
13、菌体表面显示技术噬菌体展示技术(phage display technology)是将外源蛋白或多肽的DNA 序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，使外源基因随外壳蛋白的表达而表达，同时，外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。43. 包涵体在某些生长条件下，大肠杆菌能积累某种特殊的生物大分子，它们致密地集聚在细胞内，或被膜包裹或形成无膜裸露结构，这种水不溶性的结构称为包涵体44. mRNA 差别显示技术mRNA差 别 显 示 技 术 也 称 为 差 示 反 转 录PCR （ DifferentialDisplayofreverseTranscriptionalPCR）简
14、称为ddRT-PCR 。它是将 mRNA反转录技术与PCR 技术二者相互结合发展起来的一种RNA 指纹图谱技术。目前已广泛应用于分离鉴定组织特异性表达的基因。差别基因表达（differential gene express）是细胞分化的基础。mRNA差别显示技术正是对组织特异性表达的基因进行分离的一种快速而行之有效的方法。该方法的基本原理是首先选取不同的组织样品或不同发育阶段的同一组织样品或同一组织样品经不同药物处理诱导的样品，经总RNA 提取后，进行mRNA反转录合成cDNA 。此 cDNA的合成是采用 Oligo （ dT ）12 MN为引物，其中M 为 A ， C， G 中的任意一种，N
15、 为 A ， C， G 或 T中的任意一种，所以共有12 种 oligo （ dT ） 12 MN引物，其中M 称为锚定碱基，起增大引物 Tm 值的作用， N 称为分类碱基，对反转录进行分类。用这12 种引物分别对同一总RNA 样品进行cDNA 合成，即进行12 次不同的反转录反应，从而使反转录的cDNA具有12 种类型，也就是对cDNA进行 12 种归类（目前较为流行的方法是进行4 种归类，即M可编辑-精选文档 -为简并碱基的形式存在），在此基础上对每一类cDNA进行随机引物和反转录引物PCR 扩增，通过对组织样品的同一类cDNA的 PCR 选择性扩增产物凝胶电泳分析，从而反映出不同样品间基因的时间和空间上组织特异性的表达。如此众多种类的mRNA反转录产物经PCR 选择扩增后其类型依然为数众多，很难用电泳系统加以快速准确地分离。因而需要对反转录产物cDNA进行归类处理， 减轻不同 PCR 产物电泳分离的难度， 提高分离的准确率。可编辑