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1、课后巩固提高1.下图中能反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是NaCl 浓度(mol/L)ANaCl 浓度(mol/L)BNaCl 浓度(mol/L)CNaCl 浓度(mol/L)D?当NaCl的物质的解析：DNAB NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的量为0.14 mol/L 时,DNA的溶解度最低？答案：C2 .人们用鸡的红细胞提取 DNA用人的红细胞提取血红蛋白的原因是A.鸡的红细胞无血红蛋白，人的红细胞有血红蛋白B.鸡的红细胞有线粒体,人的红细胞无线粒体C.鸡的红细胞有细胞核,人的红细胞无细胞核D.鸡的红细胞有氧呼吸,人的细胞无氧呼吸解析：鸡（鸟类）的红细
2、胞具有完整的细胞核，含有核DNA,便于进行DNA勺提取，人的红细胞 无细胞核，结构简单，血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白？答案：C3 .下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是A.是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法B.在洗脱过程中，大分子不能进入凝胶内部而最先流出，而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢，最后流出C.凝胶内部有很微细的多孔网状结构，其孔隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关 系D.一般情况下，凝胶对要分离的物质没有吸附作用，因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来解析：本题考查凝胶色谱法分离蛋白质的原理？凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法，凝胶是由多糖类化
3、合物构成的，其内部有很微细的多孔网状结构，小分子蛋白质可以进入凝胶内部，路程较长，移动速度慢，而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝 胶内部，路程较短，移动速度快，因此在洗脱中分离？选用不同种凝胶，其立体网状结构不同，孔 隙大小不同，因此可分离的分子大小也不同，故应相关？凝胶一般对分离的物质无吸附作用，所有要分离的物质都应该被洗脱出来，这是凝胶色谱法与一般层析法的不同？答案：C4 .PCR利用了 DNA热变性白原理，PCR仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器,对PCR寸程中“温度的控制”的下列说法错误的是()A.酶促反应需要高的温度，是为了确保模板是单链B.延伸的温度必须大于复性温度 ，而小于变
4、性温度C.DNA聚合酶不能热变性,要用耐高温的聚合酶D.DNA解旋酶不能热变性，为了确保模板是单链解析：PC幅一种体外DNAT增技术？DNAZ链的解开不需要解旋酶,靠高温使其变性,双链 螺旋结构解体，双链分开，在复T前，在耐高温的DNA聚合酶的作用下根据碱基互补配对原则合 成新的DNA,因此延伸的温度大于复性温度而小于变性温度？答案：D5.在血红蛋白的整个提取过程中 ，不断用磷酸缓冲液处理的目的是(多选)()A.防止血红蛋白被氧气氧化B.血红蛋白是一种碱性物质，需要酸中和C.防止色谱柱内产生气泡，影响洗脱效果D.让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能解析：在血红蛋白的提取过程中，不断
5、用磷酸缓冲液处理的目的是防止色谱柱内产生气泡 影响洗脱效果，同时为了让血红蛋白保持在体内所处的环境，以维持其结构和功能？答案：CD6 .在“DNA粗提取与鉴定”的实验中，将提取获得的含 DNA的粘稠物(含较多白杂质)分别 处理如下：放入2mol 1/1的NaCl溶液中,搅拌后过滤,得到滤液D和粘稠物d放入0.14mol L -1的NaCl溶液中，搅拌后过滤，得到滤液E和粘稠物e放入冷却的95%勺酒精溶液中，搅拌后过滤，得到滤液F和粘稠物f以上获得的滤液和粘稠物中，因含DNA交少而可以丢弃的是()A.d,E,FB.D,e,fC.d,e,FD.D,E,f解析：本题考查的是“ DNA粗提取与鉴定”的
6、实验原理 ？根据实验原理可知当NaCl溶液浓度为2mol/L时,DNA在NaCl溶液中的溶解度最高，所以中因含 DNAt少而可以丢弃的是粘稠 物d;当NaCl溶液浓度为0.14mol/L时,DNA在NaCl溶液中的溶解度最低，所以中因含 DNA 较少而可以丢弃的是滤液E;由于DN心溶于95%勺酒精溶液，所以中因含 DNA较少而可以丢弃的是滤液F?答案：A7 .下列叙述中错误的是()A.改变NaCl溶液的浓度只能使 DNA溶解而不能使其析出8 .在沸水浴中，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C.用电泳法可分离带电性质 ？分子大小和形状不同的蛋白质D.用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质解析：DNAB
7、 NaCl溶液中的溶解度是随着 NaCl溶液浓度的变化而变化 ？在0.14 mol/LNaCl 溶液中DNA的溶解度最小，低于或高于0.14 mol/L,DNA 的溶解度会增大？在DNAM提取实验中就是先把核物质溶解在2 mol/LNaCl溶液中，然后逐渐加水,稀释至0.14 mol/L 时，使DNAW出？答案：A8 .现代生物学已向两个方面发展，宏观研究的水平为生态系统水平，微观研究的水平为分子水平，对于分子的研究，其物质的提取和分离显得尤为重要？下面是物质提取和分离的相关问题，请回答：(一)DNA分子的提取和分离(1)在提取菜花细胞中的DNAt采用的研磨法，为什么不能像用鸡血那样，用蒸储水
8、使其破裂？(2)在提取实验过程中用到两种浓度的NaCl溶液，说明其作用：2 mol/LNaCl 溶液:;0.14 mol/LNaCl 溶液: ?(3)在整个操彳过程中，每100 mL血液中加入3 g柠檬酸钠的作用 是: ?(4)鉴定DNA所用的试剂： ?(二)血红蛋白的提取和分离(1)在血红蛋白的提取和分离过程中：粗分离？纯化和纯度鉴定时，都会用到缓冲溶液，其作用是?(2)在洗脱过程中，对洗脱液的流速要求稳定的目的是： ?(三)不同的化学物质，其理化特性不同，提取方法也有所差异，如胡萝卜素不溶于水，易溶 于,因此可以用 方法进行提取？解析：(一 )(1)DNA分子提取中理想的材料为富含DNA勺
9、细胞，动物中鸡血红细胞具有细胞核，放入蒸储水中会使细胞涨破释放出DNA,而植物细胞含有细胞壁不能因吸水而涨破?(2)实验过程中两次用到 NaCl溶液，初次为2 mol/L的NaCl溶液，用于溶解DNA而0.14 mol/L 的 NaCl溶液会使DNAW出?(3)为了防止凝血现象的发生应加入柠檬酸钠?(4)鉴定DNA所用的试剂为二苯胺试剂？(二)(1)为保持蛋白质的生理活性，防止变性从而用缓冲液保持pH的恒定?(2)洗脱液的流速变化过快，使操作压变化过大，从而使洗脱物质的下降速率变化过大，导致分离纯化不充分？(三)胡萝卜素的化学性质比较稳定，不溶于水，易溶于有机溶剂？因此可以用有机溶剂作萃取剂，
10、以萃取的方法来提取？答案：(一 )(1)植物细胞具有细胞壁,不会吸水涨破，只有通过研磨，才能释放出DNA(2)溶解DNA子,过滤并除去不溶于 NaCl溶液的杂质使DNA分子析出，过滤并除去溶于 NaCl溶液中的杂质(3)防止出现凝血(4)二苯胺试剂(二)(1)维持血红蛋白环境中的pH的稳定(2)维持操作压的稳定(三)有机溶剂有机溶剂萃取9 .我们通常选用猪？牛？羊等动物的血?防S行实验，来提取和分离血红蛋白？请回答下列有 关问题：(1)实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液？其中加入柠檬酸钠的目的是 ？此过程即是样品处理，它应包括红细胞
11、洗涤？分离血红蛋白溶液？洗涤红细胞的目的是？(2)收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析，这就是样品的粗分离？透析的目的是？透析的原理是？ (3)通过凝胶色谱法将样品进一步纯化(如图)，在操作中加样的正确顺序是 ,最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电脉进行纯度鉴定？其中通过凝胶色谱法将样品纯化的目的是解析：本题考查提取和分离血红蛋白的相关知识？透析袋是本实验收集样品的关键，是一种半透膜？实验的操作顺序应根据SDS-聚丙烯酰胺凝胶电脉的需要进行？答案：(1)防止血液凝固血红蛋白的释放去除杂蛋白(2)去除相对分子质量较小的杂质透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内(3)去除相对分子质量较大的杂质10.
12、下图表示在生物体外获取DNA域目的基因)的两种方式？, II + %。+ 哪- dTTPP（引物）模板DNADNA聚合酶4种脱氧核苛酸A |变性（加热至94t）DNA解旋 I IB|冷却至55t,引物结合到互补DNA链聚口酶T Cl复制（加热至72七）DNA . DyA D重信循环，野得PCR产物DNA DNA DNA DNA 图一I-II-I -IIniRNA 单链 DNA DNA图二图一表示经PC叱术扩增获取DNA的过程？PC双多聚酶链式反应的缩写 ？PCRT法模仿体 内DNA勺复制过程，首先使DNA变性（加热至94C）,两条链解开为单链；然后冷却（至55C）使 引物（DNA复制时所需的约
13、20个核甘酸的短链）与单链相应的碱基互补序列结合 ；再在热稳定 DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）作用下进行延伸（加热至72 C ）,即以4种脱氧核甘酸为原料,在引 物的引导下合成与模板互补的 DNA新链？如果2条DNA|i链各补上一条新链组成 2个DNA分子 ?如此反复循环，DNA以指数形式扩增？上述过程可以在 PCFT增仪中自动完成？图二表示反转录 形成DNA勺过程？即以mRN朋模板，反转录成互补的单链 DNA然后在酶的作用下合成双链 DNA ？请据图分析回答：（1）图一中的DNA聚合酶的化学本质是，它与人体内的DNA聚合酶相比具有 特性？（2）图一 A中的DNAB旋过程在人体内可由 催化
14、完成？C过程复制方式的特点是 ？（3）图二E中的碱基互补配对方式与图一 C中的不同之处是 ？ 假设图一中的一个模板 DN册子中有800个碱基对，基中含有腺喋吟600个，若通过PCR技术 共消耗周围环境中游离的胞喀咤脱氧核甘酸6200个,则该模板DNA PCRT增仪中已经复制了 次？解析：(1)DNA聚合酶是一种蛋白质,在PCR术中所用的DNAm合酶最大的特点是耐高温 , 即高温下不变性，可反复使用？(2)PCR技术用高温变性解旋，在人体中是常温解旋酶作用解旋 ？ C过程是PCR技术中的中温延伸阶段，其复制的方式仍是半保留复制 ？(3)RNA中含有U不含T? 一个DNA子中A+C占碱基总数的一半
15、，故C的数目为800-600=200?假设复制n次，相当于新 增加了 (2 n-1)个 DN6子，故 200X (2 n-1)=6200,解得:n=5 ?答案：(1)蛋白质 热稳定(或耐高温)(2)解旋酶半保留复制(3)E中是U A,C中是T-A 511 .柠檬油是植物芳香油中的一种，它是一种广谱性的杀虫剂，可杀死蚊子？苍蝇？嶂螂和臭虫等传染疾病的害虫，以及危害粮食？蔬菜的常见害虫，包括幼虫？蛹等，是一种绿色杀虫剂？(1)柠檬油的挥发性 ,易溶于，比重比较？(2)提取柠檬油常用的原料是柠檬花与柠檬果皮，嫩的花朵在蒸储过程中，精油易被水蒸气分子破坏，所以可采用 法？柠檬果皮中精油的提取适宜采用
16、法，此种方法 是通过 将液相从固液两相混合物中分离出来，必经步骤为：柠檬果皮 H回水洗 浸泡f 清洗f 装* f J k榨和喷淋一糊状压出液ff高速离心f静置分层f分液f柠 檬精油A是，目的是?B是,目的是?C过程为,目的是?实验过程中浸泡橘皮后，需用清水洗涤，其目的是?(3)采用柠檬油作为杀虫剂，可以解决其他杀虫剂给人类带来的隐患，其突出的优点是?(4)从生产绿色食品的要求出发，写出防治害虫的三种方法：?解析：(1)(2)水中蒸储可能发生原料的焦糊问题 ，而且可能使某些有效成分高温水解 ，凡 存在上述问题的应考虑萃取法或压榨法 ？用压榨法从柠檬果皮中提取柠檬油时，应用石灰水充 分处理，以提高
17、出油率，防止压榨时滑脱等？为了使油与水易分离，还应加入小苏打和硫酸钠 ？(3)柠檬油作为一种天然的杀虫剂有其优点：对人？畜无毒，对植物无毒，不污染环境？(4)防治害虫的方法可结合其他生物学知识来解答，其方法较多，如利用生物天敌防治，利用性外激素干扰其交尾或诱捕，运用生物工程如基因工程或诱变育种培育抗虫作物品种等？答案：(1)强有机溶剂轻(2)萃取压榨机械压力石灰水破坏细胞结构，分解果胶，防止压榨时果皮滑脱，提高出油率0.25%的小苏打和5%勺硫酸钠使精油易与水分离过滤除去固体物和残渣除去石灰水(3)对人？其他动物？植物均无毒性减少对环境的污染(4)利用天敌进行生物防治害虫运用生物工程培育抗虫作
18、物品种利用激素影响昆虫的发育12 .PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题，而被广泛应用，此过程需要一种 Taq DNA聚合酶？请回答有关问题：(1)体内DNAM制过程中用解旋酶打开双链DNA,而PCR技术中应用？(2)TaqDNA聚合酶是从水生耐热细菌 Taq中分离的？为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢？TaqDNA聚合酶的功能是？TaqDNA聚合酶的化学本质为蛋白质 ，可用 法和 法进行分离？ 从土壤中分离分解尿素的细菌时，应采取的措施是 ,原因是？(4)相对于细菌分离，而DNA分子的分离和提取操作要复杂的多？在DNA提取中两次用到蒸储水，其目的分别是
19、：？实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料?为什么？(5)与体内DN限制相比较，PCR反应要在 中才能进行，并且要严格控制 条件？(6)PCR中加入的引物有 种，加入引物的作用是 ?解析：(1)PCR技术中用高温使 DNA分子中的氢键打开，从而解旋?(2)利用细菌特有的特 性而与其他细菌区分开来，Taq细菌具有耐高温的特性，放在高温环境下，其他绝大多数细菌死 亡，而Taq细菌得以保留？在DNA子复制中，TaqDNA聚合酶将两个脱氧核甘酸的脱氧核糖和 另一脱氧核甘酸的磷酸连结形成磷酸二酯键值蛋白质的分离可以根据其分子大小和带电的性质和多少使之分离，即凝胶色谱法和电泳法?(3)在分离分解尿素的
20、细菌时，应在培养基上加 入尿素这一种氮源而使不能利用尿素的细菌不能生存?(4)在使用蒸储水时，第一次使血细胞破裂，第二次使NaCl溶液浓度降低至 0.14 mol/L ?(5)PCR反应是在一定的缓冲溶液中进行 的,并需严格控制好温度条件 ？(6)PCR中与体内DNAM制过程中的原料是完全相同的，并加入小段单链DNA或RNA乍为引物，引导DNAM制，可以使游离的脱氧核甘酸与之结合形成磷酸二酯 键，成为DNAM制的起点？答案：(1)高温使DNA分子热变性(2)热泉70C80 c的高温条件淘汰了绝大多数微生物催化脱氧核甘酸之间形成磷酸二酯键凝胶色谱电泳(3)将细菌在培养基中培养，其中惟一的氮源是尿素只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长和繁殖(4)使血细胞破裂，释放出DNA子 稀释NaCl溶液，使DNA子析出不能，哺乳动物成熟的红细胞中无核DN6子(5) 一定的缓冲溶液温度(6)2 作为DNA复制的起点