生化实验课件 酶切实验-7年制.ppt

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DNA限制性内切酶双酶切分析,原 理,限制性内切酶是一类具有严格识别位点,并在识别位点内或者附近切割双链DNA的脱氧核糖核酸酶。,BamH,+,Hind,+,平端切口,粘端切口,Xba I: TCTAGA AGATCT,Sal I: GTCGAC CAGCTG,实验步骤,10Cutsmart Buffer 2 l 质粒DNA 1 l Xba 1 l Sal 1 l H2O 15 l,20 l,37水浴酶切2小时。1% 琼脂糖凝胶电泳鉴定。,NE buffer (pH 7.9) 150 mM NaCl 10 mM Tris-HCl 10 mM MgCl2 1 mM DTT 二硫苏糖醇,基因组DNA加样 TE溶解液 10ul 6 x loading buffer 2ul DNA染料 1ul,质粒酶切体系加样 酶切体系 20ul 6 x loading buffer 4ul,

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