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1、 专题 2 课题 1 微生物的实验室培养一、课题目标1.知识目标a.了解有关培养基的基础知识。b.了解消毒和灭菌方法。2.能力目标a.进行无菌技术操作。b.进行微生物培养。3.情感目标形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。二、课题重点无菌技术操作。三、课题难点无菌技术操作。四 教学流程教学流程教师活动学生 设计活动 意图问题 1：培养基包括哪些基本成分？水、碳源、氮源、无机盐问题 2：从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？C、H、O、N、P、S 是构成细胞原生质的基本元素，约占原生质总量的97以上。【小结】共同归纳培养基的基本成分和主要来源。（2）特殊成分和条件提醒
2、学生培养基还需要满足不同微生物生长对PH、氧气、特殊营养物质的要求：如乳酸杆菌时需要添加维生素 ，霉菌需要将培养基 pH 调节为酸性 ，细菌时需要将 pH 调节为中性或微碱性 。（二）无菌技术讲解：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 强调无菌操作是培养微生物成功的关键。1.主要方面讲解无菌技术主要方面： （1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁和消毒 ；（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行 灭菌 ；（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近 旁进行；（4）避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品相接触。2.消毒与灭菌的比较列表让学生进行比较。阅
3、了读、 解培1.概念：讲解培养基概念：由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用二：倾养基的混合营养基质。讲授听。 相关知2.种类新课展示培养基相关图片，讲解根据物理性质划分的培养基种类、用途。识。3.成分无机盐上。【小结】共同归纳培养基的基本成分和主要来源。营养含义归纳、回物质碳源无机物：CO2、NaHCO3；有机物：糖能提供碳元素的物质类、脂肪酸、石油、花生粉饼等 无机物：N2、NH3、氨盐、硝酸盐；答。氮源水能提供氮元素的物质有机物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等细胞生命活动必不可少的物质培养基、大气、代谢产物培养基、大气盐（二）无菌技术倾了听、 解消毒和读、 灭菌阅1.主要方面思方考、 法。
4、回部分全部否是实验操作者的双手使用酒精进行消毒；饮水水源用氯气进行消毒。 （2）灭菌方法：接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；阅问题 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还 纳、有什么目的？回答。（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。【典型例题】【方法点拨】灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力，对于培养基、操作器皿和接种环等都需要灭菌。消毒仅指杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害，如操作者的手和衣着需要消毒处理。高压蒸汽通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工
5、具，如接种环。二、实验操作演进3.溶化：加水加热熔化牛肉膏；加入蛋白胨和氯化钠继续加热；加入琼脂；用蒸馏水定容到 100mL。整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。行无菌技术操作。4.调 pH：用 1mol/LNaOH溶液调节 pH至偏碱性。6.倒平板：待培养基冷却至 50左右时在酒精灯火焰附近操作进行。 【方法点拨】倒平板的方法及注意事项图文讲解倒平板的方法及注意事项，让学生回答问题。火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；阅右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰；左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖。（二）纯化大肠杆菌1.平板划线法（1）定义和目的
6、 讲解平板划线法定义和目的：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作,将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的表面。在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。分离后，一个菌体便会形成一个菌落，这是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选菌株的最简便方法之一。进行微生物培养。将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划 35 条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基。倾阅划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。2.稀释涂布平板法答
7、。（1）定义和目的讲解定义和目的：将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度菌液分别涂布 到琼脂固体培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。（2）操作步骤让学生阅读教材稀释涂布平板法的系列稀释操作和涂布平板操作图文材料，讲解相关操作步骤，让学生回答问题。12356使之混匀。12倾B.平板划线法不能用于微生物的计数，而稀释涂布平板法可用于微生物的计数C.利用平板划线法不能得到单菌落，而利用稀释涂布平板法能得到单菌落 【答案】B【方法点拨】这两种接种方法都可用于固体培养基的接种，都能用于形成单菌落，接种器具都要进行严格灭菌处理。三、结果分析与评价让学生分析回答相关问题，加以讲解。演能够对实验结果进行分分析。析、 回答。环共同回顾本节要点：一、培养基呼突应、 出本节重答。 点。节三：课堂小结回（2）常用的微生物接种方法环演突节A.高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖 练、 出重四：课堂练习回点。【方法点拨】1.倒平板时左手拿培养皿，右手拿锥形瓶，左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，倒入培养基后立即盖上培养皿皿盖，防止杂菌污染。2.灼烧接种环之后，要在火焰旁冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。