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1、实验七 厌氧性细菌形态染色性及培养特性(anaerobic bacteria),录像：无芽胞厌氧菌的感染 示教： 破伤风梭菌及产气荚膜梭菌的形态染色性及培养特性 Nagler反应 无芽胞厌氧菌的形态（脆弱类杆菌消化链球菌） 厌氧培养方法 操作： 产气荚膜梭菌致病性试验 肠道致病菌粪便标本的分离与鉴定（续）血清学反应,破伤风梭菌(C.tetani)革兰染色涂片： 菌体细长，芽胞正圆，比菌体粗，位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状。,破伤风梭菌电镜图,形 态,产气荚膜梭菌(C.perfringens)革兰染色涂片： 菌体粗大，两端几乎平切。芽胞呈椭圆形，位于次极端，不大于菌体，体外很少形成芽胞。,产气荚膜
2、梭菌荚膜(体内易形成)：,培 养 特 性,Clostridium perfringens shows stormy fermentation of litmus milk. Acid turns the pH indicator litmus from blue to pink, acid and enzymes coagulate the proteins in the milk, and gas tears the curds apart.,汹涌发酵： stormy fermentation,Nagler 反应,产气荚膜梭菌产生卵磷脂酶(毒素)，在蛋黄琼脂平板上，卵磷脂酶分解蛋黄中的卵磷脂，生成的甘油二酯在菌落周围形成乳白色混浊圈。当加入相应抗毒素后，卵磷脂酶活性丧失，菌落周围不出现混浊圈。,产气荚膜梭菌致病性试验,培养液注入小鼠腹腔 断颈处死 剖腹肝脏印片石炭酸复红负染 染色 涂片自然干燥 染液 迅速水洗 印干 油镜检,37 5-8h,厌氧培养方法,1.物理法：厌氧箱或厌氧缸。用物理方法将氧气吸走，充入氮气、二氧化碳、氢气。 2.化学法：氢气+氧气 水 3生物法：厌氧菌与需氧菌一起放入密闭空间培养。,钯,肠道致病菌粪便标本的分离与鉴定（续）血清学反应,标本,选择鉴别培养基 (SS平板),生化反应,血清学鉴定,37,24h,已知Ab检测未知Ag (玻片凝集试验),