氨类药物的分析.ppt

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1、第二节,芳胺类药物的分析,胺类药物的基本结构有两类：,芳香第一胺未被取代，而在芳环对位有取代的对氨基苯甲酸酯类。如：,苯佐卡因,盐酸普鲁卡因,盐酸丁卡因,局部麻醉药,芳香第一胺被酰化，并在芳环对位 有取代的芳酰胺类药物。,解热镇痛药对乙酰氨基酚,局部麻醉药盐酸布比卡因,抗麻风药醋氨苯砜,一、典型药物的结构与性质,（一）、对氨基苯甲酸酯类,芳香第一胺未被取代，而在芳环对位有取代的对氨基苯甲酸酯类。如：,1、结构,基本结构与典型药物,含有对氨基苯 甲酸酯的结构母体,苯佐卡因,盐酸丁卡因,盐酸普鲁卡因胺，抗心率失常药。,2、性质,（1）、芳香第一胺特性,具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可发生重氮化偶合

2、反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含；可与芳醛发生缩合，生成希夫碱；对日光或空气中的氧较敏感，易氧化变色。,2、易水解性：,盐酸丁卡因分子结构中无芳香第一胺则无此特性。,因分子结构中有酯键，易发生水解反应。尤其是药物受光、热或碱性条件影响，更易促进其水解。,如：盐酸丁卡因水解产物对丁氨基苯甲酸（BABA）。,3、弱碱性：,因分子结构中有芳香第一胺，同时，除苯佐卡因外，其脂烃胺侧链为叔胺氮原子，故游离体具有弱碱性。,碱性较弱，在水溶液中不能用酸滴定液直接滴定，可在非水溶液中滴定。,叔胺氮原子还能与生物碱沉淀剂发生沉淀反应。,（二）、芳酰胺类药物,是芳香第一胺被酰化，并在芳环对位 有取代的芳酰胺类药物。

3、 其共性是具有芳 酰胺基，基本结构为：,1、结构,非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚）,对乙酰氨基酚（扑热息痛）,醋氨苯砜（治疗麻风病，抑制麻风杆菌）。,盐酸利多卡因,盐酸布比卡因,2、性质,（1）水解后显芳香第一胺特性,分子结构中具有芳伯氨基，在酸性溶液中易水解为具芳香第一胺的化合物，显芳香第一胺特性反应。,对乙氨基酚的水解速度相对比较快。,利多卡因和布比卡因在酰氨基邻位存在两个甲基，由于空间位阻影响，较难水解，所以其盐的水溶液比较稳定。,（2）水解产物易酯化,对乙酰氨基酚和醋氨苯砜，水解后生成醋酸，可在硫酸介质中与乙醇反应，产生醋酸乙酯的香味。,（3）酚羟基的特性,对乙酰氨基酚具有酚羟基，与三氯化

4、铁发生显色反应，可与利多卡因和醋氨苯砜区别。,（4）、具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别 。,利多卡因和布比卡因的脂烃胺侧链有叔氮原子，显碱性，可以成盐；其叔胺还可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应，如：,与三硝基苯酚试液反应生成的沉淀具有一定的熔点。对乙酰氨基酚和醋氨苯砜不具有此侧链，亦无此类反应，可以区别。,（5）、与重金属离子发生反应,二、鉴别试验,游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。,利多卡因和布比卡因酰氨基上的氮可在水溶液中与铜离子或钴离子发生配位反应，生成有色的配位化合物沉淀。沉淀可溶于三氯甲烷等有机溶剂后呈色。,（一）重氮化偶合反应,芳香第一胺类鉴别反应。分子

5、结构中具有芳香第一胺或潜在芳香第一胺的药物，均能发生重氮化-偶合反应。,直接：盐酸普鲁卡因、对氨基水杨酸钠 、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺等在盐酸溶液中可直接与亚硝酸钠进行重氮化反应。与碱性-萘酚成偶氮染料。,苯佐卡因和盐酸普鲁卡因 ChP（2015）鉴别,（1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录）,取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性,间接：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺酯。间接的意思就是需要水解酰胺基。,-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。,对乙酰氨基酚 ChP（2015） 鉴别,（2）、取本品约

6、0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。,盐酸丁卡因中不具有芳伯氨基，无此反应，但在酸性液中与亚,硝酸钠生成N-亚硝基化合物的白色沉淀。可与芳伯氨基同类区别。,具有潜在芳香第一胺的药物，经适当方法处理后，若能游离出第一胺，也可发生重氮化-偶合反应。对乙酰氨基酚的鉴别反应如下：,+ HCl+ H2O,+ CH3COOH,+ HNO3,OH,+ NaOH,OH,N=N,OH,+ NaCl+ H2O,（二）、三氯化铁反应,对乙酰氨基酚的酚羟基可直接与三氯化铁试剂反应成蓝紫。,OH,NHC

7、OCH3,3,+ FeCl3,OH,NHCOCH3,3,3,Fe3+ + 3HCl,蓝紫色,（三）与重金属离子反应,1. 与铜离子反应,分子结构中具有芳酰胺的盐酸利多卡因，在碳酸钠试液中，与硫酸铜反应生成蓝紫色配位化合物，此有色物转溶于三氯甲烷中显黄色。,具有N-芳环取代的盐酸利多卡因，在碳酸钠溶液中与硫酸铜反应生成蓝紫色，容易转入氯仿中显黄色。盐酸普鲁卡因，盐酸丁卡因，苯左卡因等都不发生此反应。,黄色,蓝紫色,硫酸铜,盐酸利多卡因,氯仿,碳酸钠,+,2、与钴离子反应,盐酸利多卡因可在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀。，容易转入氯仿中显黄色。,3羟肟酸铁盐反应,棕黑色）,暗棕

8、色,羟肟酸铁（紫红色,羟肟酸,盐酸普鲁卡因胺,+,+,D,FeCl3,H2O2,4.与汞离子的反应,盐酸利多卡因的水溶液加硝酸酸化后，加硝酸汞试液，煮沸，显黄色。,对氨基苯甲酸酯类显红色或橙黄色，可与之区别。,（四）水解产物的反应,具有酯的结构的本类药物，可在碱性条件下水解，利用其水解产物进行鉴别。,1. 盐酸普鲁卡因 ChP（2015）,鉴别方法,取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀。加热，变为油状物（水解）；继续加热，产生的蒸气（氨基醇类挥发），能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。此沉淀能溶于过量的盐酸

9、。,2. 苯佐卡因 ChP（2015）,鉴别方法,取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。,（五）制备衍生物测熔点,本类药物的衍生物，如三硝基苯酚衍生物、硫氰酸盐衍生物，有固定的熔点、可供鉴别。ChP 2005对盐酸利多卡因、盐酸部比卡因、盐酸丁卡因采用此法鉴别。,1.三硝基苯酚衍生物,（1）盐酸布比卡因的鉴别,取供试品0.15g，加水10ml溶解后，加三硝基苯酚试液15ml，有三硝基苯酚布比卡因的黄色沉淀,析出，滤过，沉淀用少量水洗涤后，再以少量甲醇和乙醚冲洗，在105干燥后， 依法测定熔点，其熔点约为194。,盐酸利多卡

10、因与三硝基苯酚生成三硝基苯酚利多卡因衍生物，其熔点约为228232，熔融时同时分解。,（2）盐酸利多卡因的鉴别,2.硫氰酸盐衍生物,盐酸丁卡因的鉴别：取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80干燥，依法测定（附录C），熔点约为131。,（六）氯化物的鉴别反应,盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因、盐酸利多卡因的水溶液显氯化物的鉴别反应。,1.取供试品溶液，加稀硝酸使成酸性后，滴加AgNO3试液，即生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀复生成。反应如下：,2.取供试品少量，置试管中，加等量的MnO2，

11、混匀，加稀硫酸湿润，缓缓加热，即产生氯气，能使用水湿润的KI淀粉试纸显蓝色。反应如下：,（七）、紫外特征吸收光谱,本类药物分子结构中均有苯环，因此具有紫外吸收光谱特征。其主要特征表现在吸收峰的位置和吸收强度上。,盐酸布比卡因鉴别：,取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录A）测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度分别为0.530.58与0.430.48。,（八）、红外吸收光谱,盐酸布比卡因 ChP（2015） 鉴别 本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集324图）一致。,三、特殊杂质检查,（一）、对

12、乙酰氨基酚,一般以硝基氯苯为原料，水解后制得对硝基酚 ,还原成对氨基酚，再酰化。按药典规定，除检查 酸度，氯化物，硫酸盐，重金属，水分和炽灼残渣 外，还需进行下列检查：,1.乙醇溶液的澄清度与颜色,生产工艺中使用铁粉作还原剂可能带入成品中。 对氨基酚的有色氧化物在乙醇中显橙红或棕色。,检查方法:取本品1.0g,加乙醇10ml溶解,溶液应澄清,无色。,2.有关物质,合成路线多，杂质来源主要是中间体、副产物及分解产物，如对氨基酚，对氯乙酰苯胺，0-乙酰基对乙酰氨基酚，偶氮苯，氧化偶氮苯，苯醌和醌亚胺等，以对氯乙酰苯胺为杂质对照品；检查方法：TLC。 其他杂质采用参比杂质对照品法。,3.对氨基酚,乙

13、酰化不完全或贮藏不当发生水解均可引入。因毒性大又使苯品产生色泽，要严格控制限量。 反应原理：,检查方法 对照法,取本品1.0g，加甲醇溶液（12）20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1m1，摇匀，放置30min；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚50g用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.005）。,（二）、盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,有酯键，在注射液的制备过程中受灭菌温度，时间，溶液pH值，贮藏时间，以及光线和金属离子等因素的影响，可水解成对氨基苯甲酸和2-二乙氨基醇。前者长期贮藏和高温加热脱羧成苯胺，苯胺可进一步转化成有色物使注射液变黄，疗效下降，毒性增加。

14、限量为1.2%。,检查方法 TLC 杂质对照品法,精密量取本品，加乙醇稀释使成为每1ml中含盐酸普鲁卡因 2.5mg的溶液，作为供试品溶液。取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每1ml中含30g的溶液，作为对照品溶液。,取上述两种溶液各10 l，分别点于含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（141 1 4）为展开剂，展开后，取出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（2对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加冰醋酸5ml制成）喷雾显色。,供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更深。 检出限量0.01ug,苯胺,五、含量测定,（一）、亚硝酸钠

15、滴定法,分子结构中具有芳香第一胺的药物（如盐酸普鲁卡因、苯佐卡因）以及水解后具有芳香第一胺的药物（如对乙酰氨基酚），在酸性溶液中可与亚硝酸钠反应，可用亚硝酸钠滴定液测定含量。,1. 原理,在酸性溶液中与亚硝酸钠成重氮盐,具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。,2.测定条件,因生成物也不够稳定，加入适量KBr加速反应KBr为催化剂，芳伯胺的碱性越弱越有利于重氮化反应的进行。在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：,NaNO2 + HCl HNO2 + NaCl HNO2 + HCl N

16、OCl + H2O,（1）反应速度,在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：,第一步：,第一步反应的速度较慢，后两步反应的速度叫较快，整个反应取决于第一步。,第二步：,第三步：,第一步反应的快慢与芳香第一胺的游离测定密切相关。,芳香第一胺的碱性较弱，则在一定强度酸性溶液中成盐的比例较小，即游离芳香第一胺较小，则重氮化反应速度就慢。所以在测定中一般向供试品加入适量KBr，使重氮化反应速度加快。,（1）K1,（2）K2,K1300 K2 加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度,（2）酸的种类及其浓度,在不同酸中重氮化反应的速度为： HBrHCl H2SO4 HNO3,盐酸应过

17、量 1:2.56；加入盐酸： 重氮化反应速度加快； 重氮盐在酸性溶液中稳定； 防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果,（3）室温条件下滴定 1030,温度每升高10，重氮化反应速度加快2.5倍，但重氮盐分解的速度亦相应加快2倍；所以反应在低温下进行。,（4）滴定速度：先快后慢,滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定。因为属于分子型反应，速度很慢。最后一滴要搅拌震荡1-5min。,3. 指示终点的方法,有电位法，永停滴定法，外指示剂法，和内指示剂法。,（1）永停滴定法 ChP（2015）规定用永停法指示亚硝酸钠滴定法的终点，其装置见图6-1。,永停滴定法（附录

18、A） 中国药典规定，亚硝酸钠滴定用永停法指示终点。作重氮化法的终点指示时，调节R1使加于电极上的电压约为50mV。取供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水40ml与盐酸溶液（12）15ml，而后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处。,用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。,终点时，溶液中无亚硝酸，线路无电流通过，有微量亚硝酸时与电极起氧化还原反应，有电流

19、。电流计指针突然偏转。永不回复。即为终点。,层，或制成KI-淀粉试纸，当用细玻璃棒蘸取少许被滴定液划过，立即显蓝色，即为终点。,4. 测定方法,盐酸普鲁卡因 ChP（2015） 取本品约0.6g，精密称量为0.5653g，加水40ml与盐酸（1 2）,15ml,置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加入KBr2g，采用永停滴定法滴定。滴定时，将滴定管尖端插入液面下2/3处，用 用亚硝酸钠滴定液（0.1017mol/L）迅速滴定，边滴边搅拌，至近终点时将滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗，继续缓缓滴定。至电流计指针突然偏移不再回复，即为滴定终点，消耗亚硝酸钠滴定液（0.1017mol/L）20.10ml。

20、每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2HCl。中国药典2015年版规定，按干燥品计算，含C13H20N2O2HCl不得少于99.0%，通过计算判断该供试品的含量,是否符合规定。,解：,盐酸普鲁卡因%=,VTF,100%,S,20.1027.28,0.1017,0.1,100%,0.5653,=,= 98.65%,根据计算结果，98.65%99.0%，则该盐酸普鲁卡因供试品含量不符合规定。,（二）、非水溶液滴定法,盐酸利多卡因，盐酸丁卡因侧链脂肪胺具有叔胺氮，盐酸布比卡因的哌啶环也是叔胺氮，这些脂烃胺侧链都具弱碱性，在非水溶液中用酸滴定。,其中，非水

21、溶液滴定法测定盐酸利多卡因含量的滴定反应：,+ Hg（Ac）2,+ HgCl2,+ HClO4,+ HAc,盐酸盐药物用高氯酸滴定时有氢卤酸生成，故在滴定前加入醋酸汞溶液，使成为难解离的氯化汞，以除去氢卤酸的干扰。,在滴定盐酸丁卡因时，因其在冰醋酸中显较弱碱性，因此加入适量醋酐。,因醋酐解离生成的醋酐合乙酰氧离子比醋酸合质子的酸性强，有利于增强丁卡因的碱性，使滴定突跃敏锐。,滴定至终点时，溶液显蓝色。但加入醋酐应注意防止氨基被乙酰化。乙酰化物碱性很弱，以结晶紫生物指示剂时不能被滴定。,醋酐的量应按需要量加入。为防止乙酰化的发生，加冰醋酸溶解样品后，应放冷后再加入醋酐。,盐酸丁卡因的含量测定Ch

22、P（2015） 方法： 取本品约0.2g，精密称量为0.2051g，加冰醋酸25ml与醋酐5ml溶解后，加热回流2分钟，放冷，加醋酸汞试液5ml与结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.09936mol/L）滴定，至溶液显,蓝色，消耗高氯酸滴定液（0.09936mol/L）6.36ml，空白试验消耗高氯酸滴定液（0.09936mol/L）0.05ml。中国药典2015年版观点，每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于30.08mgC15H24N2O2HCl。本品按干燥品计算，含C15H24N2O2HCl不得少于99.0%。通过解释判断该供试品的含量是否符合规定。,解：,盐酸丁卡因%=,（V

23、-V0）TF,100%,S,（6.90-0.05）30.0810-3,0.09936,0.1,100%,0.2051,=,= 99.82%,根据计算结果99.82% 99.0%，则该盐酸丁卡因供试品含量符合规定。,（三）紫外分光光度法,对乙酰氨基酚在0.4氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸,收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。,对乙酰氨基酚 取本品约40mg，精密称定0.0417g，置250ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收

24、度为0.952。按C8H9NO2的吸收系数（ ）为715 计算。中国药典,2015年版规定，本品干燥品计算，含C8H9NO2应为98.0%102.0%。通过计算判断该供试品的含量是否符合规定。,解：,100,%,1,100%,1,=,1cm,W,E,A,对乙酰氨基酚%,VD,100,5,100%,1,=,100,0.0417,715,0.592,250,= 99.28%,盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有 A. 重氮化偶合反应 B. 羟肟酸铁盐反应 C. 氧化反应D. 磺化反应 E. 碘化反应,采用亚硝酸钠法测定含量的药物有 A. 苯巴比妥 B. 盐酸丁卡因 C苯佐卡因 D. 醋氨苯砜 E. 盐酸

25、去氧肾上腺素,下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者 A. 乙酰水杨酸 B. 对氨基水杨酸钠 C. 对乙酰氨基酚D. 普鲁卡因E. 苯佐卡因,亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是 A. 添加Br B. 生成NO+Br C生成HBr D. 生成Br2 E. 抑制反应进行,中国药典（2015年版）所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为 A. 电位法 B. 永停法 C. 外指示剂法 D. 内指示剂法E. 自身指示剂法,亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有 A. 自身指示剂法 B. 内指示剂法 C. 永停法 D. 外指示剂法E. 电位法,ChP（2015）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为 A. 自身指示终点法 B. 电位法指示终点 C. 永停滴定法D. 氧化还原指示剂法E. 酸碱指示剂法,以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸 A. 盐酸普鲁卡因 B. 盐酸普鲁卡因胺 C. 注射用盐酸普鲁卡因 D. 盐酸普鲁卡因胺片E. 盐酸普鲁卡因注射液,盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是 A. 强酸 B. 加入适量溴化钾 C. 室温（1030）下滴定 D. 滴定管尖端深入液面 E. 永停法指示终点,