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1、Western blotting所需要试剂配方1、 超纯水2、 30%Acr/Bic(29.1)、1.5mol/L Tris.Hcl(Ph=8.8)、0.5mol/L Tris.Hcl(Ph=6.8)、1.0mol/L Tris.Hcl、10%SDS3、 10%AP(使用前加1000ul超纯水)、转移缓冲液、TBS、TBST、TEMED、甲醇、吐温204、 样品5、 上样缓冲液、电转缓冲液、Fermentas、蛋白Maker6、 PVDF膜7、 脱脂奶粉8、 一抗9、 二抗试剂配制：（1）30%Acr/Bic(29：1) 丙烯酰胺（Acr）29g甲叉双丙烯酰胺（Bic）1g超纯水至100ml溶
2、解后4保存，使用时恢复至室温且无沉淀。（2）1.5mol/L Tris.Hcl(Ph=8.8) Tris (MW121.14) 45.43g 超纯水 200ml 溶解后，用浓盐酸调pH至8.8，最后用超纯水定容至250ml，室温下保存。（3）0.5mol/L Tris.Hcl(Ph=6.8) Tris (MW121.14) 15.14g 超纯水200ml 溶解后，用浓盐酸调pH至6.8，最后用超纯水定容至250ml，室温下保存。（4）1.0mol/L Tris.Hcl Tris (MW121.14) 30.29g 蒸馏水 200ml 溶解后，用浓盐酸调pH至所需点（见下所示），最后用蒸馏水定容
3、至250ml，高温灭菌后室温下保存。PhHcl7.4约17ml7.5约16ml7.6约15ml8.0约10ml（5）10%SDSSDS10g蒸馏水至100ml 50水浴下溶解，室温保存。如在长期保存中出现沉淀，水浴溶化后，仍可使用。（6）10%过硫酸铵AP(使用前加1000ul超纯水)过硫酸铵（AP）0.1g超纯水至100ml 溶解后，4保存，保存时间为1周。（7）10*转移缓冲液甘氨酸（MW75.07）2.9g*10Tris（MW121.14）5.8g*10SDS0.37g*10甲醇200ml*10蒸馏水至1000ml溶解后室温保存，次溶液可重复使用35次（次溶液最好保存在4度冰箱，最多使用5次左右，不然影响转移效率）。（8）TBS缓冲液1 mol/L TrisHCl（pH7.5）10mlNaCl8.8g蒸馏水至1000ml可以配制成10TBS缓冲液进行保存，稀释10倍使用（9）TBST缓冲液20Tween201.65mlTBS700ml混匀后即可使用，最好现用现配（10）电转缓冲液Tris（MW121.14）3.03g甘氨酸（MW75.07）18.77gSDS1g蒸馏水至1000ml溶解后室温保存，次溶液可重复使用35次。