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1、SDS-PAGE相关试剂、缓冲液的配置方法1.5M Tris-HCl 组分浓度：1.5M 配制量：200ml 配制方法： 1.称量下列制剂，置于250ml蓝口瓶中。 Tris-base 36.33g 2.向烧杯中加入约150ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3.调pH=8.8(在磁力搅拌器上进行)，定容至200ml，4保存1.0M Tris-HCl 组分浓度：1.0M 配制量：200ml 配制方法： 1.称量下列制剂，置于250ml蓝口瓶中。 Tris-base 24.22g 2.向烧杯中加入约150ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3.调pH=6.8(在磁力搅拌器上进行)，定容至200ml，4保
2、存1.0M Tris-HCl 组分浓度：1.0M 配制量：200ml 配制方法： 1.称量下列制剂，置于250ml蓝口瓶中。 Tris-base 24.22g 2.向烧杯中加入约150ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3.调pH=7.5(在磁力搅拌器上进行)，定容至200ml，4保存10%SDS （W/V） 组份浓度： 10%（W/V）SDS 配置量： 200ml 配制方法： 1.称取2g SDS。 2.加入200ml的去离子水后搅拌溶解。 注意：溶解定容SDS时不宜剧烈摇晃，避免产生过多的泡沫；10%SDS溶液在低温是易析出晶体，可以置于70溶解。30%（W/V）丙烯酰胺 组份浓度：30%（W
3、/V）Acrylamide 配制量：200ml 配制方法： 1.称量下列制剂，置于1L烧杯中。 丙烯酰胺 58g N-N亚甲基双丙烯酰胺 2g 2.向烧杯中加入约150ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3.加去离子水将溶液定容至200ml，用定性滤纸滤去杂质。 4.于棕色瓶中4保存。 注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具有积累性，配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。10%APS （W/V） 组份浓度： 10%（W/V）过硫酸铵 配置量： 1ml 配制方法： 1.称取0.1g过硫酸铵。 2.加入1ml的去离子水后搅拌溶解。 3.
4、贮存于-20 注意：10%过硫酸铵溶液在-20保存时可使用2周左右，超过期间会失去催化作用。5电泳缓冲液 组份浓度：0.125 M Tris, 1.25 M Glycine, 0.5%(W/V)SDS配置量：1L 配制方法：1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。 Tris 15g Glycine 72g SDS 5.0g 2.加入约800ml的去离子水，搅拌溶解。 3加去离子水将溶液定容到1L后，4保存。转印缓冲液 组份浓度：0.125 M Tris, 1.25 M Glycine, 配置量：1L 配制方法：1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。 Tris 3g Glycine 14.4g 甲醇 20
5、0ml 2.加入约800ml的去离子水，搅拌溶解。 3加去离子水将溶液定容到1L后，室温保存。考马氏亮蓝染色液 组份浓度：0.25%（W/V）考马氏亮蓝 45%（V/V）甲醇10%（V/V）冰乙酸 配制量：100ml 配制方法： 1.称量0.25g考马氏亮蓝，置于烧杯中 2.量取45ml的甲醇加入上述烧杯，搅拌溶解 3.加入10ml乙酸，搅拌均匀。 4.加入45ml去离子水，搅拌均匀。 5.用滤纸出去颗粒物质后，室温保存考马氏亮蓝脱色液 组份浓度： 10%（V/V）冰乙酸 45%（V/V）甲醇 配制量：100ml 配制方法： 1.称量下列溶液，置于烧杯中 冰乙酸 10ml 甲醇 45ml 去离子水 45ml 2.充分混匀后使用5上样缓冲液 配置量：10ml 配制方法：1.称量下列试剂，置于100ml血清瓶中。 1M Tris-HCl (pH=6.8) 0.6ml 甘油 2.5ml 10%SDS 2ml 巯基乙醇 0.5ml 溴酚蓝 0.01g 去离子水 4.4ml2.混匀后1ml分装于指形管中，-20保存。TBST 组份浓度： 配制量：1L 配制方法：1.称量下列制剂，置于1L烧杯中。 1M Tris-HCl (pH=7.5)：10ml NaCl：5.8g 2.加去离子水将溶液定容至1L。 3.加500l Tween-20，磁力搅拌器混匀。